王芙
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胎盘片微生物限度检查方法的建立及验证被引量：1
- 2015年
- 目的建立人胎盘片微生物限度检查方法并进行验证。方法按照《中国药典》2010年版一部微生物限度检查方法的要求进行验证。结果可用常规法检查人胎盘片的细菌数、霉菌、酵母菌和控制菌,并能符合微生物限度的要求。结论该方法简单快捷、准确可行,可用于人胎盘片的微生物限度检查,有效控制人胎盘片的质量。
- 李静王芙
- 关键词：微生物限度检查常规法
- 适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体的构建被引量：3
- 2004年
- 为构建适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体,利用标记瞬时稳定的原理,在痘苗病毒单选择标记载体psc65的基础上,构建成带有neo和LacZ双选择标记的痘苗病毒载体pVI75。为检验载体pVI75的有效性,将HIV-1合成基因syngpnef插入到载体pVI75上,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,并与天坛株752-1痘苗病毒共转染CEF细胞。筛选得到的重组病毒经PCR和Dotblot检验表明,标记基因已被删除,而目的基因被整合到痘苗病毒基因组上。Westemblot检测结果表明,目的基因的表达正确。痘苗病毒载体pVI75的构建使得疫苗株筛选的工作量大为降低,时间大大缩短,为利用痘苗病毒载体构建重组病毒疫苗株的研究提供了参考。
- 周小云刘颖饶力群王芙戴凯凡段丹丽邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒载体疫苗株共转染重组病毒标记基因
- 表达HIV-1多价合成基因的重组痘苗病毒疫苗株的构建
- 2005年
- 为研制适合我国使用的HIV疫苗,选择具有代表意义的中国流行株HIV CN54(B′/C)病毒gag、pol、nef等基因的合成基因syngpnef,插入到自行构建的能在病毒筛选过程中将标记基因去除掉的双标记基因痘苗病毒载体pVI75的KpnI酶切位点,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,与我国的天坛株痘苗病毒共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝白斑筛选得到的重组病毒疫苗株DNA。经PCR鉴定标记基因已被删除并有目的基因的整合,Western blot可检测到目的基因的融合表达。此重组病毒疫苗株有望成为HIV/AIDS候选疫苗。
- 周小云邵一鸣饶力群刘颖王芙戴凯凡
- 关键词：重组痘苗病毒合成基因HIV疫苗
- 实时定量PCR方法监测重组痘苗外源基因传代稳定性
- 2008年
- 目的建立实时定量PCR方法以监测外源基因在不同重组痘苗代次中的稳定性。方法裂解法提取8个代次插入有HIV基因的重组痘苗DNA，用实时定量PCR的绝对和相对定量方法，研究不同代次基因组中插入的外源基因与痘苗基因组的数量关系。结果绝对和相对定量方法均证明，在传代过程中，重组痘苗中的外源基因有缺失现象。结论建立的实时定量PCR方法可以特异、定量地分析外源基因在重组痘苗中的稳定性。
- 王宁李媛媛徐静王芙戴凯凡刘颖罗兰邵一鸣刘建源
- 关键词：实时定量PCR重组痘苗病毒传代稳定性
