戴凯凡
- 作品数:7 被引量:8H指数:2
- 供职机构:中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金:湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 天坛痘病毒载体的改造及在HIV疫苗研究中的应用
- 痘苗病毒是唯一彻底消灭人类病毒性疾病的疫苗。痘苗病毒载体已经被广泛应用于预防艾滋病、疟疾、结核的传播及基因和肿瘤治疗的研究中。<br> 痘苗病毒为逃避免疫系统的监视而编码很多干扰宿主免疫系统且往往与毒力...
- 戴凯凡
- 关键词:HIV疫苗痘苗病毒天坛株免疫原性细胞免疫应答
- 表达HIV-Ⅰ多价野生基因和合成基因重组痘苗病毒疫苗株的构建及与DNA疫苗联合免疫效果的研究
- 该研究的目的是基于中国HIV-1主要流行株B'/C重组株CN54,构建两株不带筛选标记的多价重组痘苗病毒疫苗株,并与相应的DNA疫苗联合免疫BALB/c小鼠,从而探讨其诱发的HIV特异性免疫应答.同时设立平行实验组,比较...
- 戴凯凡
- 关键词:疫苗株重组痘苗病毒PRIME-BOOST
- 文献传递
- 适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体的构建被引量:3
- 2004年
- 为构建适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体,利用标记瞬时稳定的原理,在痘苗病毒单选择标记载体psc65的基础上,构建成带有neo和LacZ双选择标记的痘苗病毒载体pVI75。为检验载体pVI75的有效性,将HIV-1合成基因syngpnef插入到载体pVI75上,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,并与天坛株752-1痘苗病毒共转染CEF细胞。筛选得到的重组病毒经PCR和Dotblot检验表明,标记基因已被删除,而目的基因被整合到痘苗病毒基因组上。Westemblot检测结果表明,目的基因的表达正确。痘苗病毒载体pVI75的构建使得疫苗株筛选的工作量大为降低,时间大大缩短,为利用痘苗病毒载体构建重组病毒疫苗株的研究提供了参考。
- 周小云刘颖饶力群王芙戴凯凡段丹丽邵一鸣
- 关键词:痘苗病毒载体疫苗株共转染重组病毒标记基因
- 表达HIV-1多价合成基因的重组痘苗病毒疫苗株的构建
- 2005年
- 为研制适合我国使用的HIV疫苗,选择具有代表意义的中国流行株HIV CN54(B′/C)病毒gag、pol、nef等基因的合成基因syngpnef,插入到自行构建的能在病毒筛选过程中将标记基因去除掉的双标记基因痘苗病毒载体pVI75的KpnI酶切位点,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,与我国的天坛株痘苗病毒共转染鸡胚成纤维细胞,通过蓝白斑筛选得到的重组病毒疫苗株DNA。经PCR鉴定标记基因已被删除并有目的基因的整合,Western blot可检测到目的基因的融合表达。此重组病毒疫苗株有望成为HIV/AIDS候选疫苗。
- 周小云邵一鸣饶力群刘颖王芙戴凯凡
- 关键词:重组痘苗病毒合成基因HIV疫苗
- 杜仲绿茶干燥工艺研究被引量:3
- 2005年
- 对杜仲绿茶干燥工艺的研究结果表明,采用全炒的干燥方式以叶量150 g、干燥温度80℃的条件干燥和高温提香有利于杜仲绿茶品质的形成。
- 黄友谊刘波罗新飞阳永学李洪发戴凯凡
- 关键词:杜仲绿茶感官品质
- 实时定量PCR方法监测重组痘苗外源基因传代稳定性
- 2008年
- 目的建立实时定量PCR方法以监测外源基因在不同重组痘苗代次中的稳定性。方法裂解法提取8个代次插入有HIV基因的重组痘苗DNA,用实时定量PCR的绝对和相对定量方法,研究不同代次基因组中插入的外源基因与痘苗基因组的数量关系。结果绝对和相对定量方法均证明,在传代过程中,重组痘苗中的外源基因有缺失现象。结论建立的实时定量PCR方法可以特异、定量地分析外源基因在重组痘苗中的稳定性。
- 王宁李媛媛徐静王芙戴凯凡刘颖罗兰邵一鸣刘建源
- 关键词:实时定量PCR重组痘苗病毒传代稳定性
- 表达HIV-I CN54株gagpol基因重组痘苗病毒疫苗株的构建被引量:2
- 2003年
- 为研制不带筛选标记的HIV活载体疫苗,首先构建含有neo基因和lacZ基因双重筛选标记的pVI75转移质粒,并将HIV-Ⅰ中国主要流行株B’/C重组株CN54 gagpol基因置于pVI75的启动子pE/L下,构建重组质粒pVI75-Gagpol。重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染鸡胚细胞。前三轮通过G418加压,噬斑纯化,得到既含目的基因又含筛选标记的蓝色重组痘苗病毒;后三轮在无G418选择压力下,筛选只含目的基因而缺失了筛选标记的白色重组痘苗病毒。结果表明筛选到了一株重组病毒,经PCR和Dot blot检测确认该株重组痘苗病毒的neo基因和lacZ基因已丢失;PCR鉴定表明目的基因已插入重组痘苗病毒中;抗体染色和Western blot结果证实该重组病毒能很好地表达目的蛋白。
- 戴凯凡刘颖周小云王芙段丹丽吴岚赵斌邵一鸣
- 关键词:重组痘苗病毒疫苗株人免疫缺陷病毒