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大鼠卵黄囊的分化及其肿瘤性转化研究: 2006年; 目的研究12d大鼠胚胎脏层卵黄囊(VYS)向多胚层组织分化的潜能和在逆转录病毒感染下的肿瘤性转化特征。方法在不同培养条件、移植位点的条件下,观察VYS体内外分化的改变;另外利用逆转录病毒载体将荧光蛋白基因(GFP)转染12d卵黄囊细胞,对GFP标记的转化细胞进行体内外研究。结果在不同培养条件下,均对体外培养的或体内移植的大鼠卵黄囊向三个胚层分化的进程无特异的导向性。将荧光蛋白标记卵黄囊克隆细胞接种在裸鼠皮下长出了未分化的间质细胞肉瘤。结论12d大鼠胚胎脏层卵黄囊具有向三胚层分化的潜能;逆转录病毒感染导致卵黄囊间质细胞发生肿瘤性转化。; 徐元基陈惠华杜芝燕王妍陆应麟; 关键词：卵黄囊逆转录病毒绿色荧光蛋白质类细胞转化肿瘤

肿瘤及其转移调控的基础研究: 陆应麟李春海葛学铭张金强范文红王涛凌贤龙徐元基丁秀云王妍杜芝燕; 利用自身建系建株的肿瘤细胞，经早期克隆（如PLA-801C/D同源性人肺巨细胞癌高低转移株，LM2小鼠肺腺癌高转移株），鉴定成为转移研究的模型或平台。对肿瘤转移密切相关的金属蛋白酶MMP-2、金属蛋白酶组织抑制物（TIM...; 关键词：; 关键词：肿瘤转移肿瘤相关基因

几个转移相关基因的评估被引量：1: 2009年; 背景与目的围绕本实验室筛选鉴定的MAG-1，MAG-2，14—3—3f和PAR1等转移相关基因进行分析比较，对其在肿瘤转移的功能和作用机理进行评估。方法MAG-1，MAG-2，14—3．3ζ黾利用抑制消减杂交技术（Suppression subtractive hybridization，SSH），以同源性人巨细胞肺癌细胞系PLA-801亚克隆得到的一对具有不同转移能力的细胞株为模型，结合cDNA微阵列（cDNA microarry）得到了99条在高转移性细胞株中高表达的序列和98条在低转移细胞株中高表达的序列。从高转移性细胞株中高表达的序列中选择具有自主创新性的肿瘤转移相关新基因MAG—1，MAG-2；从低转移细胞株中高表达的序列选出已知基因14．3．3ζ。PAR1是凝血酶受体基因。对以上基因通过生物信息学分析，分子克隆和基因转染表达于肺癌细胞株，结合正反义和RNA干涉技术，检测细胞的生物学功能变化。并对其可能涉及的相关分子及信号传导路径进行分析。并结合临床标本进行验证。; 陆应麟张金强陈惠华孟宇宏贾海泉蔺会云谭晓刚刘刚王妍徐元基杜芝燕; 关键词：肿瘤转移 MTOR信号通路 RNA干涉技术

利用干涉RNA技术对MAG-1基因功能的研究: 目的: MAG-1为我室利用抑制消减杂交技术和基因芯片技术从人肺巨细胞癌高低转移株95-D、C中发现的与转移相关的基因.经NCBI的gene bank比对与MGC11324同源,但文献检索并未检索到研究其功能的文献.RN...; 谭晓刚陈惠华徐元基蔺会云王妍杜芝燕郝好杰徐丁尧陆应麟; 关键词：RNA干扰肿瘤转移肺癌细胞增殖; 文献传递

新鉴定的转移相关基因: ＜正＞对于肿瘤转移的共识,第一点,肿瘤的异质性是一普遍的现象,即不是所有肿瘤细胞都具有转移能力;在同一肿瘤内的不同细胞亚群具有不同的转移潜力。虽然肿瘤细胞必先具有成瘤性,然后才可能在远隔部位生长成为转移灶,所以成瘤性是...; 陆应麟张金强孟宇宏陈惠华王妍徐元基杜芝燕; 文献传递

蜘蛛牵引丝蛋白MaSp1原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：1: 2014年; 目的通过基因工程手段实现牵引丝关键组成蛋白MaSp1在大肠杆菌中的异源表达,并对其进行分离纯化,从而建立基因工程蜘蛛丝基因序列串联拼接、载体构建以及原核表达与纯化的关键技术体系。方法利用同尾酶连接法对合成的基因工程蜘蛛丝基因单体序列进行串联拼接,获得多倍串联体克隆重组子,将鉴定正确的多倍串联体克隆重组子与原核表达载体pET28a(+)连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western印迹进行鉴定。在此基础上对工程菌进行高密度发酵,所获蛋白通过硫酸铵分级分离方法进行纯化。结果与结论成功构建了基因工程蜘蛛丝MaSp1多串联体的表达载体,原核表达蛋白的相对分子质量与预期一致,且纯化的目的蛋白纯度达80%以上。上述研究工作为开展基因工程蜘蛛丝蛋白的规模化制备建立了关键技术方法,并为后续基因工程蜘蛛丝的人工纺丝提供必要的前提和工作基础。; 乔鑫王妍李俊杰段翠密王海滨周瑾杜芝燕王常勇; 关键词：基因工程原核表达蛋白质纯化

香菇多糖对抗模拟微重力环境培养的淋巴细胞免疫功能抑制的实验研究被引量：5: 2012年; 本研究旨在探索香菇多糖对抗旋转式细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)模拟微重力环境下淋巴细胞免疫功能降低的作用。体外分离培养小鼠脾淋巴细胞,在正常重力环境和RCCS模拟微重力环境下分别添加10、20和40μg/ml的香菇多糖溶液,培养24、48和72 h取样,用MTT法、ELISA和流式细胞术分别检测香菇多糖对细胞增殖度、细胞因子分泌量和表面标志表达的影响。结果表明,10、20和40μg/ml香菇多糖在处理时间内对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显促进作用;不同浓度的香菇多糖均可提高小鼠脾淋巴细胞在模拟微重力环境下IL-2和IFN-γ的分泌量和促进小鼠脾淋巴细胞表面CD4和CD8分子的表达。结论:香菇多糖具有对抗模拟微重力环境造成的淋巴细胞免疫功能降低的作用。; 郝彤王滟濛李俊杰杜芝燕段翠密王常勇宋锦苹王林杰李莹辉王妍; 关键词：香菇多糖模拟微重力淋巴细胞

卵黄囊组织多分化模型与功能基因筛选: 1.研究目标:为配合功能基因组计划,建立大鼠、小鼠脏层卵黄囊体外培养和体内移植分化模型,通过直接将新基因编码蛋白或生物性因子介入印黄囊培养,移植体系,鉴定新基因的定向促分化功能,为进而分离与克隆卵黄囊多分化潜能干细...; 陆应麟张超华安明榜王妍谢庆军; 文献传递

基因芯片研究血卟啉单甲醚对人肝癌细胞HEPG2基因表达的影响被引量：8: 2001年; 目的 :利用芯片技术观察血卟啉单甲醚 (HMME)光动力疗法对人原发性肝癌 HEPG2细胞基因表达的影响 ,以深入探讨其作用的分子机制。方法 :HMME加激光照射处理培养的肝癌 HEPG2细胞 ,H- E染色观察细胞形态 ;抽提细胞 m RNA,利用荧光标记 d UTP逆转录制备 c DNA探针 ,与人肝癌表达谱基因芯片杂交 ,并对 Cy3、Cy5荧光信号做扫描分析。结果 :光照射后实验组细胞呈现凋亡形态 ;芯片扫描显示 2 .47%的检测基因 (389/15 38)出现明显表达差异 ,其中下调基因占 80 % ,多与细胞增殖调控功能有关 ;而细胞凋亡通路中几个重要关键蛋白 (CCP32、AIF、Mch2 )的基因明显上调。结论 :HMME激光疗法可诱导 HEPG2细胞凋亡 ;; 郑世荣王妍朱建国罗芸缪海珍; 关键词：基因芯片基因表达谱光动力学疗法肝癌细胞HEPG2 血卟啉单甲醚

血管紧张素Ⅱ2型受体重组腺病毒的扩增及其在INS-1细胞中的转染: 2014年; 目的利用人胚肾(HEK)293A细胞株扩增含有大鼠血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因的重组腺病毒,并在大鼠胰岛素瘤细胞INS-1细胞株中进行转染,构建AT2R高表达的胰岛β细胞模型。方法利用293A细胞株扩增重组腺病毒Ad-G-AT2R-EGFP和对照病毒Ad-CMV-EGFP,并测定病毒滴度。在INS-1细胞中瞬时转染后利用实时PCR、Western印迹以及免疫荧光和激光共聚焦技术检测细胞中AT2R与AT1R的表达。结果扩增后得到重组腺病毒Ad-G-AT2R-EGFP和Ad-CMV-EGFP的滴度分别为9×109和8×109pfu/ml。在INS-1细胞中转染Ad-GAT2R-EGFP后,AT2R mRNA的表达随病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI)值的增加呈剂量依赖性增加。当MOI值为10时,AT2R mRNA的表达达到峰值(P<0.05),同时AT2R蛋白的表达明显高于转染了Ad-CMV-EGFP的细胞和未转染细胞,但AT1R的表达无显著变化。结论成功扩增并得到高滴度且携带有AT2R基因的重组腺病毒载体,并将其转染入INS-1细胞中构建出AT2R高表达的胰岛β细胞模型,为下一步探讨AT2R在胰岛β细胞中的作用奠定了基础。; 李晓静刘敏王妍户义尹士男母义明; 关键词：腺病毒科

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王妍

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