陈惠华
- 作品数：45 被引量：77H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 14-3-3ζ抑制肺癌细胞转移的实验研究被引量：7
- 2005年
- 目的:探讨14-3-3ζ与肺癌转移的关系。方法:以人肺巨细胞癌高低转移细胞株为模型,Western印迹验证14-3-3ζ在高低转移株中的差异表达;随后采用细胞转染技术将1433ζ基因导入人肺巨细胞癌高低转移株,通过研究转染后细胞增殖能力、黏附能力以及迁移能力的变化,探讨14-3-3ζ与肿瘤转移的相关性。结果:Western印迹检测发现14-3-3ζ在低转移株PLA801C中的表达水平显著高于高转移株PLA801D,在此基础上,构建成功正反义表达载体并转染细胞,转染正义载体后细胞的增殖减慢,黏附能力提高,体外迁移能力下降;而转染反义载体后细胞的增殖加快,体外迁移能力提高。结论:1433ζ可能抑制肺癌细胞的转移。
- 陈惠华王妍徐元基杜芝燕郝好杰徐丁尧谭晓刚蔺会云陆应麟
- 关键词：肿瘤转移肺肿瘤
- 带红色荧光蛋白靶向线粒体载体的构建与表达被引量：2
- 2005年
- 选取由核表达的线粒体蛋白细胞色素C氧化亚单位Ⅷ(COX8)的前导序列为靶序列,从人胚胎肺成纤维细胞中扩增出COX8的前导序列,插入到pcDNA3.1/myc-HisA中,并将pDsRED1-n1中的红色荧光蛋白序列RFP克隆至COX8的下游,形成融合蛋白。在脂质体的介导下,将重组载体转染至肿瘤细胞中,在荧光显微镜下观察其在细胞内的表达及分布情况。构建的靶向线粒体的载体以及以红色荧光蛋白为报告基因的靶向线粒体的载体,经酶切、DNA序列测定,结果表明构建正确。将pcDNAmito-RFP转染到HeLa细胞的线粒体中,16h即可见散在荧光,72h达高峰,第10d开始减弱。以上结果表明成功构建了以红色荧光蛋白为报告基因的线粒体靶向的特异表达载体,在靶序列的引导下将红色荧光蛋白输入到线粒体中,为进一步对线粒体疾病的基因治疗研究提供了重要工具。
- 郝好杰凌贤龙徐元基杜芝燕王妍陈惠华陆应麟
- 关键词：线粒体靶向红色荧光蛋白
- 3-3ζ与肺癌转移关系的实验研究
- 目的: 探讨14-3-3ζ与肺癌转移的关系.
方法: 以人肺巨细胞癌低转移细胞株为模型,利用RNAi技术研究14-3-3ζ被干涉后肿瘤细胞恶性表型的变化,探讨14-3-3ζ与肿瘤转移的相关性.
结果:...
- 陈惠华谭晓刚徐元基杜芝燕王妍郝好杰蔺会云刘刚陆应麟
- 关键词：肿瘤转移肺癌RNA干扰
- 文献传递
- 肝癌靶向性腺病毒载体的构建及其作用的研究被引量：1
- 2006年
- 背景与目的:抑癌基因p16是肿瘤基因治疗最常用的治疗基因之一,通过腺病毒载体介导p16基因表达引发肿瘤细胞凋亡在多种p16基因失活的肿瘤细胞系中都得到了证实。研究表明,p16在人原发性肝细胞癌中存在高频率失活。因此,本研究通过观察外源性p16基因经AFP启动子驱动表达后对AFP阳性肝癌细胞的影响,以探讨p16基因在肝癌靶向基因治疗中应用的可行性。方法:将外源性p16基因置于人AFP核心启动子AF0.3下游,构建了携带p16基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-AFP-p16,感染肝癌细胞后,应用MTT比色法、Westernblot、DNA片段化分析、流式细胞术分析等方法在体外研究外源性p16基因表达对细胞生长的影响。小鼠皮下接种感染重组腺病毒的鼠肝癌细胞H22,观察病毒对肝癌细胞体内成瘤性的影响。结果:感染Ad-AFP-p16的肝癌细胞高效表达P16蛋白,MTT结果显示细胞生长受到明显抑制,到第六天Ad-AFP-p16对肝癌细胞Bel-7402和HepG2的生长抑制率分别为(94.42±11.70)%和(94.99±6.74)%,DNA片段化分析和流式细胞术分析证实p16能诱导肝癌细胞发生显著凋亡,感染后48hBel-7402和HepG2的凋亡率分别为39.57%和39.75%。感染Ad-AFP-p16的肝癌细胞体内成瘤受到明显抑制,对照组、Ad-GFP组、Ad-AFP-p16组以及Ad-CMV-p16组瘤体体积分别为(1.54±0.65)cm3、(1.71±1.01)cm3、(0.25±0.39)cm3和(0.25±0.45)cm3。结论:AFP启动子驱动p16基因表达可以诱导肝癌细胞发生凋亡。
- 徐丁尧杜芝燕王妍陈惠华徐元基陆应麟
- 关键词：肝肿瘤P16甲胎蛋白启动子细胞凋亡
- 靶向性溶瘤腺病毒对肝癌细胞的特异性杀伤研究被引量：1
- 2004年
- 陈泽建徐丁尧陆应麟杜芝燕徐元基张金强陈惠华凌贤龙吕品
- 关键词：溶瘤腺病毒特异性杀伤肝癌细胞靶向性启动子活性
- 几个转移相关基因的评估被引量：1
- 2009年
- 背景与目的围绕本实验室筛选鉴定的MAG-1，MAG-2，14—3—3f和PAR1等转移相关基因进行分析比较，对其在肿瘤转移的功能和作用机理进行评估。方法MAG-1，MAG-2，14—3．3ζ黾利用抑制消减杂交技术（Suppression subtractive hybridization，SSH），以同源性人巨细胞肺癌细胞系PLA-801亚克隆得到的一对具有不同转移能力的细胞株为模型，结合cDNA微阵列（cDNA microarry）得到了99条在高转移性细胞株中高表达的序列和98条在低转移细胞株中高表达的序列。从高转移性细胞株中高表达的序列中选择具有自主创新性的肿瘤转移相关新基因MAG—1，MAG-2；从低转移细胞株中高表达的序列选出已知基因14．3．3ζ。PAR1是凝血酶受体基因。对以上基因通过生物信息学分析，分子克隆和基因转染表达于肺癌细胞株，结合正反义和RNA干涉技术，检测细胞的生物学功能变化。并对其可能涉及的相关分子及信号传导路径进行分析。并结合临床标本进行验证。
- 陆应麟张金强陈惠华孟宇宏贾海泉蔺会云谭晓刚刘刚王妍徐元基杜芝燕
- 关键词：肿瘤转移MTOR信号通路RNA干涉技术
- RNA干扰在肿瘤转移研究中的应用被引量：2
- 2005年
- RNA干扰是与特定基因同源互补的双链RNA在体内以序列特异的方式引发靶基因的mRNA降解,从而导致转录后基因沉默的过程。由于其在基因沉默中的高度特异性和有效性,在基因功能和基因药物的研究中有很大潜力。综述了RNA干扰可能的分子机制、分子生物特性和其在肿瘤特别是肿瘤转移中的应用。
- 谭晓刚陈惠华陆应麟
- 关键词：RNA干扰转录后基因沉默肿瘤转移
- 利用干涉RNA技术对MAG-1基因功能的研究
- 目的: MAG-1为我室利用抑制消减杂交技术和基因芯片技术从人肺巨细胞癌高低转移株95-D、C中发现的与转移相关的基因.经NCBI的gene bank比对与MGC11324同源,但文献检索并未检索到研究其功能的文献.RN...
- 谭晓刚陈惠华徐元基蔺会云王妍杜芝燕郝好杰徐丁尧陆应麟
- 关键词：RNA干扰肿瘤转移肺癌细胞增殖
- 文献传递
- 溶血磷脂酸酰基转移酶β促进人肺成纤维细胞的增殖、迁移与黏附被引量：2
- 2012年
- 目的分析溶血磷脂酸酰基转移酶β(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAATβ)在多种细胞系中的表达情况及其过表达对细胞体外增殖、迁移与黏附的影响。方法通过免疫印迹实验检测LPAATβ在多种细胞中的表达水平;构建pcDNA3.1A(+)/LPAATβ真核表达载体,转染人肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF)并筛选稳定转染细胞株;通过MTT细胞增殖实验分析过表达LPAATβ对HLF细胞体外增殖的作用,通过划痕修复实验分析稳定株细胞的体外迁移能力,利用细胞黏附实验分析稳定株细胞对细胞外基质成分Matrigel的黏附情况。结果 LPAATβ蛋白在肿瘤细胞中表达水平存在差异。体外生物学实验显示,稳定转染LPAATβ的HLF细胞增殖能力明显增强,细胞迁移能力显著提高,与细胞外基质成分Matrigel的黏附能力显著增强。结论 LPAAT家族成员LPAATβ在人类多种细胞中的表达具有普遍性,其过表达明显促进HLF细胞的增殖、迁移及黏附能力,提示该基因在细胞体外生长过程中具有重要作用。
- 杜芝燕张家恺韩晓曦陈惠华乔鑫陆应麟王妍
- 关键词：肿瘤转移细胞增殖细胞迁移细胞黏附
- 一种复合壳聚糖水凝胶敷料及其制备方法和应用
- 本发明揭示一种复合壳聚糖水凝胶敷料及其制备方法和应用，所述复合壳聚糖水凝胶敷料，其特征在于，包括以下组分及含量：壳聚糖盐酸盐1‑6质量份；壳聚糖季铵盐0.1‑5质量份；交联剂10‑45质量份；人角质细胞生长因子2突变体0...
- 徐东刚付文亮陈惠华邹民吉蔡欣夏文戎
- 文献传递
