- Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达被引量:2
- 2016年
- 目的检测氧化应激下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Cyclophilin D的表达,初步探索RPE细胞氧化损伤保护新靶点。方法培养细胞系ARPE19及人原代RPE细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞。不同浓度H_2O_2(0μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、500μmol·L^(-1)、1 mmol·L^(-1))处理细胞24 h后,应用RT-PCR检测Cyclophilin D在细胞内的表达。随后预先在部分细胞中加入3μmol·L^(-1)环孢素A(cyclosporin A,Cs A)处理30 min后再加入不同浓度H_2O_2(80μmol·L^(-1)、160μmol·L^(-1)、320μmo·L^(-1))2 h,即Cs A+H_2O_2组,应用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)法检测细胞致死率,并与H_2O_2组的LDH释放量相比较。结果培养的ARPE19和人原代RPE细胞均表达RPE细胞特异性抗体RPE65。100μmol·L^(-1)H_2O_2处理细胞24 h后Cyclophilin D表达量明显升高,当H_2O_2浓度增加到500μmol·L^(-1)时,Cyclophilin D表达量降低,1 mmol·L^(-1)H_2O_2处理时,Cyclophilin D表达水平未见增加。在各H_2O_2组组间,LDH的释放量随着H_2O_2浓度的升高而增加;与H_2O_2组相比,Cs A+H_2O_2组LDH的释放水平明显降低(P<0.05)。结论氧化应激下RPE细胞内Cyclophilin D的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,Cs A可能成为RPE细胞保护的新策略。
- 何媛张纯涛刘瀛王霞刘旭任媛
- 关键词:氧化应激CYCLOPHILIN视网膜色素上皮细胞环孢素A
- 巩膜上静脉烙闭法建立大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响被引量:2
- 2019年
- 目的观察巩膜上静脉烙闭法建立的大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响,为青光眼视神经损伤及保护机制提供研究基础。方法选取不同体质量SD大鼠40只,分为A组(150~200 g)、B组(>200~250 g)、C组(>250~300 g)、D组(>300~350 g),每组各10只,分别测量3 d白天及夜间基线眼压。随机选取SD大鼠(雌雄随机,250~300 g)40只,术前测量3 d基线眼压,以右眼为实验眼,烙闭实验眼3~4支巩膜上静脉,以左眼为对照眼,于术后即刻、1~7 d、14 d、21 d、28 d分别测量实验眼和对照眼眼压。于术前及术后28 d分别用光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)仪测量视网膜厚度。于术后28 d处死大鼠,行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色,计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)并测量视网膜厚度。结果不同体质量大鼠昼夜眼压比较差异均有统计学意义(均为P<0.001)。A组大鼠眼压较其他3组眼压低(均为P<0.05)。巩膜上静脉烙闭术后即刻实验眼眼压达到峰值,较对照眼高122%(P<0.001),之后缓慢下降,到术后14 d、21 d实验眼眼压较对照眼分别升高约41%、20%(均为P<0.001),到术后28 d实验眼与对照眼眼压差异无统计学意义(P>0.05)。OCT提示内层视网膜变薄(均为P<0.001)。HE染色切片结果提示RGCs数量减少,内、中、外层视网膜均变薄(均为P<0.05),且以内层变化最明显(P<0.001)。结论大鼠基线眼压昼夜存在差异,白天眼压较夜间眼压低,低体质量(150~200 g)大鼠眼压偏低。烙闭大鼠巩膜上静脉能维持3周的眼压升高,且能使视网膜变薄、RGCs数量减少,故巩膜上静脉烙闭法是建立大鼠高眼压模型的有效方法。
- 韩双羽赵靖康刘慧峰任媛蒋琳燕王霞刘旭何媛
- 关键词:动物模型高眼压视网膜
- 一种便携式青光眼检测设备
- 本发明公开了一种便携式青光眼检测设备,包括检测仪主体,所述检测仪主体上设有检测探头,且检测主体上设有按压按钮,还包括探头盖,所述检测仪主体上设有按压槽,所述按压按钮滑动连接在按压槽内,所述检测仪主体内还设有储液槽,位于按...
- 何媛张瑞雪吉智任媛
- 前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型的观察被引量:1
- 2019年
- 目的前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,观察卡波姆升眼压效果及对大鼠眼前节和视网膜的影响。方法随机选取30只SD大鼠,注射前3 d早晚测量基线眼压。右眼定为实验眼,左眼定为对照眼,右眼放出房水后将30μL的5 g·L^(-1)卡波姆混悬液注入前房,每日早10时、晚22时在大鼠清醒状态下测量眼压。每周进行双眼眼前节照相并对比。4周末处死26只大鼠(另4只持续观察眼压变化至注射后9周)并取双眼眼球行HE染色,观察实验眼与对照眼视网膜形态,对比视网膜厚度及房角形态。结果注射前,实验眼白天和夜间眼压分别为(11.10±0.90)mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)和(11.92±1.07)mmHg,对照眼分别为(11.22±1.07)mmHg和(11.76±1.08)mmHg;实验眼与对照眼相比,白天、夜间眼压差异均无统计学意义(均为P>0.05);白天与夜间眼压相比,实验眼、对照眼差异均有统计学意义(均为P<0.05)。卡波姆在前房中呈现出弥散型和沉积型两种存在方式,弥散型和沉积型大鼠1周内眼压分别为(17.83±3.54)mmHg和(13.00±1.55)mmHg,两者相比差异具有统计学意义(P<0.05)。注射后第1天至第19天,实验眼与对照眼白天眼压相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05);注射后第1天至第27天,实验眼与对照眼夜间眼压相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。实验眼视网膜形态发生改变,注射后4周视网膜厚度为(254.70±21.80)μm,与对照眼的(346.73±24.63)μm相比,差异有统计学意义(P=0.00)。实验眼前房充满卡波姆及虹膜的混合成分,紧贴角膜内皮并延伸至房角,堵塞小梁网结构,正常虹膜形态消失;对照眼房角形态正常。结论前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,可维持高眼压4周以上,昼夜眼压差异较为明显,夜间眼压较白天更高,4周后视网膜出现高眼压损伤后的表现。
- 赵靖康韩双羽刘慧峰任媛王霞刘旭何媛
- 关键词:动物模型高眼压卡波姆青光眼