刘旭
- 作品数:19 被引量:50H指数:2
- 供职机构:西安医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 线粒体分裂/融合基因在氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞中的表达
- 目的:前期研究显示线粒体分裂融合基因表达异常可导致线粒体功能障碍,本研究通过不同浓度的过氧化氢建立人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)氧化损伤模型,观察线粒体分裂基因(Fis1,Dnmp1,MTP18)和融合基因(Mf...
- 刘旭
- 关键词:过氧化氢
- 线粒体分裂/融合基因在氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞中的表达
- 刘旭
- MEF2C在湿性年龄相关性黄斑变性中的表达及其对脉络膜新生血管和巨噬细胞极化的影响
- 2023年
- 目的:揭示肌细胞增强因子2C(MEF2C)在湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)中的表达及其对脉络膜新生血管(CNV)和巨噬细胞极化的影响。方法:通过qRT-PCR法检测30例湿性AMD患者(AMD组)和30例健康体检者(健康对照组)的血清MEF2C水平。将MEF2C过表达慢病毒(MEF2C-LV组)和阴性对照过表达慢病毒(NC-LV组)转染至恒河猴脉络膜血管内皮细胞系(RF/6A)。转染后,将RF/6A细胞分为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)、低氧+NC-LV组(Hypoxia+NC-LV组)、低氧+MEF2C-LV组(Hypoxia+MEF2C-LV组)。转染及缺氧处理后,分别测定各组细胞进行Matrigel小管。通过激光诱导CNV C57BL/6J小鼠模型,将建模成功的C57BL/6J小鼠随机分为模型组、NC-LV组和MEF2C-LV组,每组10只,未建模的小鼠作为对照组。然后对NC-LV组和MEF2C-LV组小鼠玻璃体腔注射NC-LV或MEF2C-LV,对照组和模型组小鼠不进行治疗。治疗7 d后进行眼底荧光血管造影(FFA)和眼球苏木精伊红(HE)染色。通过qRT-PCR和Western blot检测MEF2C、VEGFA、VEGFR2、IL-12p35、IL-12p40和IL-10的m RNA和蛋白表达。结果:与Healthy组相比,AMD组患者的血清MEF2C水平显著降低(1.00±0.23 vs 0.48±0.29,t=7.689,P<0.001)。与Normoxia组相比,Hypoxia组的闭合管腔数量增加(P<0.05)。与Hypoxia组相比,Hypoxia+MEF2C-LV组的闭合管腔数量减少(P<0.05)。与模型组相比,MEF2C-LV组视网膜和脉络膜病变程度减轻,结构基本恢复正常,脉络膜组织厚度降低,血管生成减少。与模型组相比,MEF2C-LV组的CNV相对荧光强度降低,脉络膜组织中MEF2C、VEGFA和VEGFR2的m RNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与模型组相比,MEF2C-LV组脉络膜组织中IL-12p35和IL-12p40的m RNA和蛋白表达水平均升高,IL-10均降低(P<0.05)。结论:MEF2C在湿性AMD患者血清中低表达,上调MEF2C可抑制脉络膜血管生成,并促进巨噬细胞从M2型向M1型的转换。
- 刘旭万鹏飞杨维佳贾俊何媛赵靖康
- 关键词:年龄相关性黄斑变性脉络膜新生血管血管生成
- Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达被引量:2
- 2016年
- 目的检测氧化应激下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Cyclophilin D的表达,初步探索RPE细胞氧化损伤保护新靶点。方法培养细胞系ARPE19及人原代RPE细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞。不同浓度H_2O_2(0μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、500μmol·L^(-1)、1 mmol·L^(-1))处理细胞24 h后,应用RT-PCR检测Cyclophilin D在细胞内的表达。随后预先在部分细胞中加入3μmol·L^(-1)环孢素A(cyclosporin A,Cs A)处理30 min后再加入不同浓度H_2O_2(80μmol·L^(-1)、160μmol·L^(-1)、320μmo·L^(-1))2 h,即Cs A+H_2O_2组,应用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)法检测细胞致死率,并与H_2O_2组的LDH释放量相比较。结果培养的ARPE19和人原代RPE细胞均表达RPE细胞特异性抗体RPE65。100μmol·L^(-1)H_2O_2处理细胞24 h后Cyclophilin D表达量明显升高,当H_2O_2浓度增加到500μmol·L^(-1)时,Cyclophilin D表达量降低,1 mmol·L^(-1)H_2O_2处理时,Cyclophilin D表达水平未见增加。在各H_2O_2组组间,LDH的释放量随着H_2O_2浓度的升高而增加;与H_2O_2组相比,Cs A+H_2O_2组LDH的释放水平明显降低(P<0.05)。结论氧化应激下RPE细胞内Cyclophilin D的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,Cs A可能成为RPE细胞保护的新策略。
- 何媛张纯涛刘瀛王霞刘旭任媛
- 关键词:氧化应激CYCLOPHILIN视网膜色素上皮细胞环孢素A
- 眼底病变临床检测的视物标准检查器
- 本发明涉及医疗领域,且公开了眼底病变临床检测的视物标准检查器,包括检查器主体,检查器主体的下方设有支撑板,支撑板上固定连接有两个第一滑轨,第一滑轨内滑动连接有滑条,滑条的上表面固定连接有调节组件,调节组件与检查器主体的底...
- 刘旭贾俊
- 不同年龄段人视网膜色素上皮细胞氧化应激过程中一氧化氮的水平分析
- 2019年
- 目的探讨不同年龄段人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激过程中一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放水平以及色素上皮衍生因子(pigment epithelium-deriverd factor,PEDF)对不同年龄段人RPE细胞中NO释放的影响。方法将原代RPE细胞(分别来源于9~20岁,50~55岁,60~70岁,> 70岁人群)用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,分为四组进行实验,分别为不加任何物质干预的阴性对照组,单独加300μmol·L^(-1) H_2O_2氧化损伤组,单独加250μg·L-1PEDF处理保护组以及同时加入250μg·L^(-1)PEDF+300μmol·L^(-1)H_2O_2的损伤保护组,处理12 h,随后用NO检测试剂盒对各组细胞NO水平进行检测。结果倒置相差显微镜观察培养的人原代RPE细胞内可见清晰透明的圆形细胞核以及双核,胞浆内含丰富黑色素颗粒。H_2O_2氧化损伤组各年龄段细胞相邻细胞发生粘连,细胞皱缩加重,死亡及悬浮细胞增多。PEDF处理保护组较H_2O_2氧化损伤组中的细胞胞质更加饱满,死亡细胞数量显著减少。随着年龄的增长,未作任何处理的50~55岁、60~70岁、> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是9~20岁年龄段的1. 37倍、1. 25倍、1. 62倍,差异均无统计学意义(均为P> 0. 05)。随着年龄的增加,H_2O_2氧化损伤组9~20岁、50~55岁、60~70岁,> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是阴性对照组的1. 35倍、1. 15倍、0. 98倍及1. 05倍,差异均无统计学意义(均为P> 0. 05),而PEDF处理保护组能够保护氧化损伤条件下不同年龄段人RPE细胞,但PEDF处理保护组9~20岁、50~55岁、60~70岁、> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是阴性对照组的1. 17倍、1. 10倍、1. 04倍及0. 96倍,NO的释放量差异均无统计学意义(均为P> 0. 05)。结论在不同年龄段人RPE细胞中NO的两种完全相反作用可能处于一个动态平衡中,故NO释放水平无明显变化。PEDF对RPE细胞的保护作用不通过NO途径。
- 吉智吉智刘旭王霞何媛
- 关键词:视网膜色素上皮细胞一氧化氮过氧化氢色素上皮衍生因子
- 玻璃体腔注射康柏西普在湿性老年性黄斑变性患者中的应用评价
- 2020年
- 目的评价分析玻璃体腔注射康柏西普在湿性老年性黄斑变性患者中的应用与价值。方法纳入我院2019年1月至2020年6月收治的86例湿性老年性黄斑变性患者,随机数字表法分为研究组、对照组,每组各43例,对照组给予玻璃体腔注射雷珠单抗干预,研究组给予玻璃体腔注射康柏西普干预,就两组患者治疗效果与眼底微循环改善情况进行评定对比。结果治疗3次后的疗效评定示研究组治疗总有效率高于对照组,同时CRA-EDV、CRA-PSV、PCA-EDV、PCA-PSV等眼底微循环指标均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论对湿性老年性黄斑变性患者开展玻璃体腔注射康柏西普治疗,在提升疗效、促进眼底微循环改善方面的价值突出。
- 刘旭杨维佳万鹏飞贾俊
- 关键词:湿性老年性黄斑变性玻璃体腔
- 沿阶草酮甲对干眼症小鼠结膜内白细胞和杯状细胞增殖的影响
- 2024年
- 目的:探讨沿阶草酮甲(OPA)对干眼症(DED)小鼠的治疗作用及机制。方法:将小鼠分为5组:NC组(n=12)、DED组(n=14)、L-OPA组(n=14)、M-OPA组(n=14)和H-OPA组(n=14)。NC组为正常对照小鼠,其他组小鼠为苯扎氯铵诱导的干眼症模型小鼠。NC组和DED组小鼠腹腔注射1%二甲基亚砜(DMSO),L-OPA组、M-OPA组和H-OPA组小鼠分别腹腔注射10、20和40 mg/kg/d的OPA,共治疗4周。治疗结束后,检测各组小鼠的泪液分泌量,并进行角膜荧光素钠染色、结膜过碘酸-雪夫(PAS)染色和角膜TUNEL染色。通过ELISA法测定泪液中的白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。通过RT-qPCR检测角膜Bax和Bcl-2 mRNA水平。通过Western blot或免疫组化染色检测结膜K10和白细胞共同抗原(LCA)蛋白表达水平。结果:与NC组比较,DED组的泪液分泌量和泪膜破裂时间(BUT)降低(P<0.05),角膜荧光素钠染色分级升高(P<0.05),泪液IL-1β、ICAM-1和TNF-α水平均升高(P<0.05),结膜杯状细胞数量降低(P<0.05),角膜TUNEL阳性率和Bax mRNA相对表达量均升高(P<0.05),角膜Bcl-2 mRNA相对表达量降低(P<0.05),角膜K10蛋白相对表达量升高(P<0.05),结膜LCA蛋白相对表达量升高(P<0.05)。与DED组比较,L-OPA组、M-OPA组和H-OPA组的泪液分泌量和BUT升高(P<0.05),角膜荧光素钠染色分级降低(P<0.05),泪液IL-1β、ICAM-1和TNF-α水平均降低(P<0.05),结膜杯状细胞数量升高(P<0.05),角膜TUNEL阳性率和Bax mRNA相对表达量均降低(P<0.05),角膜Bcl-2 mRNA相对表达量升高(P<0.05),角膜K10蛋白相对表达量降低(P<0.05),结膜LCA蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论:沿阶草酮甲在治疗苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠中效果显著,其机制可能与抑制白细胞介导的炎症反应以及促进杯状细胞增殖有关。
- 刘瀛杨洁何媛贾俊张瑞雪杨香香崔钰尧刘旭
- 关键词:干眼症炎症杯状细胞白细胞
- 智能眼科临床用面部固定装置
- 本发明涉及眼科治疗技术领域,且公开了智能眼科临床用面部固定装置,包括眼科诊床和固定安装在眼科诊床底部用于对眼科诊床进行支撑的底撑支架,本发明中,眼科诊床上在外部患者仰躺后,头部首先可以与头部枕垫顶部进行贴合,这时通过两组...
- 刘旭贾俊
- 文献传递
- 巩膜上静脉烙闭法建立大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响被引量:2
- 2019年
- 目的观察巩膜上静脉烙闭法建立的大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响,为青光眼视神经损伤及保护机制提供研究基础。方法选取不同体质量SD大鼠40只,分为A组(150~200 g)、B组(>200~250 g)、C组(>250~300 g)、D组(>300~350 g),每组各10只,分别测量3 d白天及夜间基线眼压。随机选取SD大鼠(雌雄随机,250~300 g)40只,术前测量3 d基线眼压,以右眼为实验眼,烙闭实验眼3~4支巩膜上静脉,以左眼为对照眼,于术后即刻、1~7 d、14 d、21 d、28 d分别测量实验眼和对照眼眼压。于术前及术后28 d分别用光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)仪测量视网膜厚度。于术后28 d处死大鼠,行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色,计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)并测量视网膜厚度。结果不同体质量大鼠昼夜眼压比较差异均有统计学意义(均为P<0.001)。A组大鼠眼压较其他3组眼压低(均为P<0.05)。巩膜上静脉烙闭术后即刻实验眼眼压达到峰值,较对照眼高122%(P<0.001),之后缓慢下降,到术后14 d、21 d实验眼眼压较对照眼分别升高约41%、20%(均为P<0.001),到术后28 d实验眼与对照眼眼压差异无统计学意义(P>0.05)。OCT提示内层视网膜变薄(均为P<0.001)。HE染色切片结果提示RGCs数量减少,内、中、外层视网膜均变薄(均为P<0.05),且以内层变化最明显(P<0.001)。结论大鼠基线眼压昼夜存在差异,白天眼压较夜间眼压低,低体质量(150~200 g)大鼠眼压偏低。烙闭大鼠巩膜上静脉能维持3周的眼压升高,且能使视网膜变薄、RGCs数量减少,故巩膜上静脉烙闭法是建立大鼠高眼压模型的有效方法。
- 韩双羽赵靖康刘慧峰任媛蒋琳燕王霞刘旭何媛
- 关键词:动物模型高眼压视网膜