王松
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河南科技学院动物科学学院更多>>
- 发文基金：家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗菌肽抗原虫作用研究进展
- 2017年
- 抗菌肽是机体抵抗外来病原入侵而产生的一类具有生物活性的多肽物质,是机体先天性免疫系统的重要组成部分,具有广谱的抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗寄生虫以及抗肿瘤的生物学活性。原虫为单细胞真核生物,致病性原虫对人类健康和畜牧业生产造成了严重危害。研究证实抗菌肽可抑制原虫的生长发育甚至杀死原虫。本文对抗原虫作用的抗菌肽种类、作用机制与应用前景等方面进行综述,为研制新型广谱抗原虫病药物提供理论基础。
- 朱惠丽王松徐彦召胡建和张龙现孙亚伟
- 关键词：抗菌肽原虫
- 猪囊尾蚴API基因原核表达条件的优化被引量：1
- 2017年
- 【目的】获得猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂(API)基因在大肠杆菌中的最佳表达条件,为API功能研究奠定基础。【方法】以表达载体pEGX-4T-1、pET-30a及猪囊尾蚴API基因的原核表达载体pEGX-4T-1/API-Flag、pET-30a/API为材料,对影响API蛋白表达的载体(pEGX-4T-1、pET-30a)、温度(25,30,37℃)、诱导时间(2,4,6,8h)、IPTG终浓度(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mmol/L)和卡那霉素终浓度(100,200,300,400mmol/L)等条件进行优化,筛选重组蛋白最佳的表达条件。对在最佳条件下获取的目的蛋白进行超声处理,4℃、10 000r/min离心分别收集上清液和沉淀,对目的蛋白进行可溶性分析;SDS-PAGE后,将目的蛋白条带转印至硝酸纤维素膜上,与抗His标签抗体共孵育,检测目的蛋白的反应原性。【结果】当选择pET系列载体(pET-30a)时,API表达量高于其在pGEX系列(pGEX-4T-1)中的表达量。API融合蛋白最佳表达条件为:在含200mmol/L卡那霉素的LB培养基上于37℃培养3h后,加入终浓度为0.4mmol/L的IPTG,再于30℃诱导培养6h。SDS-PAGE结果表明,pET-30a/API融合蛋白分子质量约为53ku,与预期蛋白分子质量一致。Western-blot检测结果显示,重组蛋白pET-30a/API能够识别特异性抗体,显示获得了大量表达正确的目的蛋白。【结论】确定了API基因的最佳表达条件,获得了较大表达量的API融合蛋白。
- 苏文强胡鑫宇王秋霞欧长波郭爱疆李辉骆学农余燕张艳红姜金庆刘兴友马金友王松才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴原核表达
- 鸡源抗菌肽研究进展
- 2023年
- 抗菌肽作为机体抵御外来病原入侵而产生的一类具有生物活性的多肽物质,能够迅速杀菌且不易产生耐药性,可单独使用或与抗菌药物联合使用,成为具有重要发展潜力的天然药物,然而关于鸡源抗菌肽的报道较少。自从鸡的异嗜性白细胞中首次分离到抗菌肽后,大量研究人员投身到鸡源抗菌肽的生物学活性、作用机理以及开发应用的研究领域。论文对鸡源抗菌肽的种类与结构、分布与表达、生物活性以及在家禽养殖中的应用进行综述,以期为研发新型、高效、环保型抗生素替代品提供理论依据。
- 朱惠丽王松胡建和韩艳辉张圳
- 关键词：生物学活性
- 柔嫩艾美耳球虫微线蛋白1(EtMIC1)基因的原核表达与重组蛋白的免疫原性分析
- 2023年
- 为了解原核表达柔嫩艾美耳球虫微线蛋白1(Eimeria tenella microneme 1,EtMIC1)重组蛋白的免疫原性,试验以柔嫩艾美耳球虫广东株孢子化卵囊为材料,首先采用PCR技术扩增去除信号肽的EtMIC1基因,将其插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达载体,然后将重组原核表达载体pET32a(+)-EtMIC1转化至大肠杆菌T7pLysY感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,最后对重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明:PCR扩增出大小为2055 bp的去信号肽EtMIC1基因片段,与预期结果一致;构建的重组原核表达载体pET32a(+)-EtMIC1可在大肠杆菌T7pLysY感受态细胞中表达,重组蛋白分子质量大小约为93 ku,主要表达在上清液中,可被自然感染抗柔嫩艾美耳球虫鸡血清和EtMIC1重组蛋白多克隆抗体特异性识别。说明试验成功表达了EtMIC1重组蛋白,原核表达的EtMIC1重组蛋白具有良好的免疫原性。
- 张圳王松孙铭飞胡建和王丹妮朱惠丽
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫原核表达免疫原性SDS-PAGE分析
- 猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达
- 2016年
- 为了探究凋亡蛋白酶抑制剂基因在猪囊尾蚴生活过程中的作用,利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴凋亡蛋白酶抑制剂基因,并将其克隆至原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(D E3),经IPTG诱导后,用SDS-PAGE进行初步分析,在53 ku处出现明显的蛋白条带,与预期结果一致。W estern-blot结果表明,重组融合蛋白能够与抗H is特异性抗体发生反应。凋亡蛋白酶抑制剂基因的成功表达为后续对其功能进行研究奠定了基础。
- 王秋霞苏文强关俊勇郭爱疆骆学农李辉欧长波余燕姜金庆马金友刘兴友王松张艳红才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴克隆
