- 大鼠EGF、CNTF真核表达载体的构建及其体外表达
- 目的分别构建大鼠pSecTag2//Hygro B-EGF、pSecTag2//Hygro B-CNTF真核表达质粒，并检测其在cos-7细胞中的共表达，为下一步进行基因治疗脊髓损伤提供实验基础。
方法①pSec...
- 何健
- 关键词：睫状神经营养因子真核表达载体
- 文献传递
- 大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子真核表达载体的构建及其体外表达的鉴定被引量：2
- 2012年
- 背景:星形胶质细胞被激活后表现出神经干细胞的特性,细胞表面的神经营养因子(表皮生长因子、睫状神经营养因子)受体超表达,通过改善复杂的内环境,有利于定向诱导神经干细胞向神经元的分化。目的:构建大鼠pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF真核表达质粒,检测其在cos-7细胞中的共表达。方法:采用反转录-聚合酶链反应技术从大鼠颌下腺、坐骨神经组织总RNA中扩增出表皮生长因子、睫状神经营养因子基因功能区,将上述基因片段分别连接到真核表达载体pSecTag2/Hygro B,聚合酶链反应初步筛选、双酶切鉴定后送测序。将构建成功的两种重组载体单独及共转染cos-7细胞,Western blot法鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白的瞬时表达。结果与结论:反转录-聚合酶链反应结果证实成功获得大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子cDNA。DNA序列分析证实2种真核表达载体中的表皮生长因子、睫状神经营养因子序列与GenBank中目的序列一致。脂质体介导转染cos-7细胞48h后,Western blot鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白在cos-7细胞中的表达,分别在Mr6000,22000处出现阳性条带。提示大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子基因的真核表达载体pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF构建成功,共转染cos-7细胞后能够共表达重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白。
- 何健尹宗生高维陆罗庆礼张胜权
- 关键词：表皮生长因子睫状神经营养因子真核表达载体转染
- 美菲膜防治中晚期鼻咽癌急性放射性皮肤损伤的疗效观察
- 目的 观察美菲膜防治中晚期鼻咽癌急性放射性皮肤损伤的临床疗效及安全性,为今后防治急性放射性皮肤损伤提供一个新的方法。方法 选择安徽省肿瘤医院放疗科2014年10月~2016年11月收治的120例行容积旋转调强放疗(VMA...
- 何健
- 关键词：鼻咽癌急性放射性皮肤损伤
- 文献传递
