张胜权
- 作品数：88 被引量：246H指数：7
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- N-乙酰半胱氨酸体外抗乙肝病毒作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨NAC体外抗乙肝病毒活性及其机制。方法 :体外以转染了乙肝病毒的HepG2 2 2 15细胞株作为实验对象 ,培养细胞中加入不同浓度的NAC( 0 ,3 ,10 ,3 0mmol/L)。用酶联免疫吸附法 (ELISA )测定培养上清液中的乙肝表面抗原 (HBsAg)、e抗原 (HBeAg)。半定量PCR测定细胞内及培养上清液中的HBVDNA的变化 ,RT PCR分析细胞内HBV表面抗原mRNA的变化。结果 :NAC对HBsAg、HBeAg均有抑制作用 ,但NAC对HBsAg的抑制较HBeAg强 ,抑制率达 90 %左右。且抑制作用具有剂量和时间依赖性。半定量PCR结果显示细胞内的HBVDNA含量随着NAC浓度的增加而升高 ,而培养上清中的HBVDNA的含量降低。RT PCR结果表明细胞内HBsAgmRNA没有显著变化。结论 :NAC体外具有抗HBV活性 ,其抑制作用发生在转录后水平。
- 张胜权罗欣陈兵徐从贞李宗寅张在和
- 关键词：体外抗乙肝病毒N-乙酰半胱氨酸毒作用RT-PCR分析
- 人巨噬细胞基质金属弹力酶对人胃癌细胞VEGF体外表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨体外人巨噬细胞基质金属弹力酶(HME)对人胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养人胃癌细胞SGC7901,并通过不同剂量HME蛋白干预胃癌细胞VEGF表达,HME干预剂量为1～5μg/ml,分别于干预后0、12、24、36h采用ELISA方法检测细胞上清中VEGF浓度变化并统计分析,同时设定对照组。结果干预36h后,HME干预剂量在1～5μg/ml时VEGF浓度均低于对照组,差异有显著性(P<0.05);对照组12h后VEGF表达明显高于0h,差异有显著性(P<0.05),在1、2、4、5μg/ml剂量组中,干预后12h与0h比较,差异无显著性(P>0.05)。结论HME蛋白浓度在1～5μg/ml范围内时在作用36h后能显著地抑制胃癌细胞VEGF表达。
- 王黎明胡乃中石海许建明张胜权鲍德明刘伟
- 关键词：内皮生长因子
- 法尼基转移酶抑制剂和香叶基香叶基转移酶抑制剂对皮肤角质形成细胞增殖的抑制作用
- 2020年
- 目的探讨法尼基转移酶抑制剂(FTI)和香叶基香叶基转移酶抑制剂(GGTI)对皮肤角质形成细胞(KCs)增殖的影响。方法使用不同浓度的FTI、GGTI对KCs进行处理,细胞活力测定实验(MTS)法分析KCs增殖受各处理组的影响;利用流式细胞术检测各加药组细胞周期受一定浓度FTI、GGTI的影响;Western blot分析各加药组细胞周期蛋白CyclinB1、CyclinE和P21及pAKT和pERK1/2表达量受一定浓度FTI、GGTI的影响。结果MTS显示FTI、GGTI对KCs增殖有抑制作用,并呈浓度依赖性,FTI(5μmol/L)、GGTI(5μmol/L)时KCs细胞活力最小,抑制率分别为14.7%、24.5%。流式周期结果表示FTI、GGTI阻滞KCs在G1、G2、S各期不明显。Western blot结果表明FTI、GGTI均能够下调CyclinB1,并且可以上调P21和CyclinE的表达。同时,FTI、GGTI能促进P13K-AKT信号通路的激活,抑制MAPKS-ERK1/2信号通路的激活。结论FTI、GGTI对原代KCs的增殖有抑制作用。
- 周宏李名聪顾亚男朱婷婷罗欣张胜权
- 关键词：法尼基转移酶抑制剂皮肤角质形成细胞
- 人白细胞介素29在cos-7细胞中表达及其体外抗乙型肝炎病毒作用被引量：2
- 2007年
- 目的：克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在cos-7细胞中表达，并初步探讨表达产物体外抗乙肝病毒（HBV）作用。方法：分离外周血单个核细胞；VSV感染后，提取总RNA，通过一步法RT-PCR获得IL-29全长cDNA。DNA测序正确后，将IL-29 cDNA的编码框序列构建到真核表达载体psectagB/His-myc中。氨苄青霉素板筛选及PCR鉴定，挑出阳性克隆进行扩增、转染cos-7细胞并经潮霉素及有限稀释法筛选稳定表达克隆。SDS-PAGE、Western blot鉴定，Ni2＋亲和层析分离纯化得到主带分子量为33000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白。体外以HepG2.2.2.15为靶细胞观察rhIL-29对HepG2.2.2.15培养上清液中HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg）影响。结果：成功获得人IL-29全长cDNA并在cos-7细胞中稳定表达。SDS-PAGE、Western blot分析显示表达的rhIL-29融合蛋白为几个蛋白质区带，分子量在20000-33000之间纯化的rhIL-29融合蛋白，主带在33000附近。rhIL-29融合蛋白具有抑制HBsAg及HBeAg分泌作用并且具有剂量效应，抑制率分别达85%。结论：获得具有生物活性的rhIL-29融合蛋白。rhIL-29融合蛋白在体外具有抑制HepG2.2.2.15细胞分泌HBsAg及HBeAg作用。
- 陈兵罗欣鲁云霞徐从贞张胜权
- 关键词：克隆抗乙肝病毒活性
- 硫代反义寡聚脱氧核苷酸体外对乙型肝炎病毒基因表达的抑制作用
- 2001年
- 目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)C基因翻译起始区和C基因区硫代反义寡聚脱氧核苷酸 (ASON)对HBV表达的序列性抑制作用。方法 以 2 2 15细胞系作为实验对象 ,设计了一系列互补于HBVmRNA编码核心蛋白基因区(C区 ) 15聚硫代ASON ,通过脂质体介导将这些合成的外源基因导入 2 2 15细胞中 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测作用细胞培养上清液中乙型肝炎病毒E抗原 (HBeAg)和乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)含量。 结果 与HBVmRNAC基因起始区互补的硫代ASON序列特异性地抑制乙型肝炎病毒基因表达 ,而正义硫代寡聚脱氧核苷酸未见有抑制效应 ,与HBVmRNAC基因内部互补的序列很少或无抗病毒活性。另外 ,硫代ASON对细胞生长无毒性作用。结论 硫2 0 0 1 0 7 0 3收稿 ,2 0 0 1 10 15修回作者单位 :1 安徽医科大学第一附属医院检验科 ,合肥 2 30 0 2 22 安徽医科大学生化教研室 ,合肥 2 30 0 2 2作者简介 :吴 庆 ,女 ,36岁 ,主管技师 ,硕士研究生 ,主攻方向 :生物化学张在和 ,女 ,6 2岁 ,教授 ,硕士生导师 ,研究方向
- 吴庆张胜权张在和
- 关键词：乙型肝炎病毒反义寡核苷酸类
- 阿尔茨海默病的执行功能障碍与ApoE基因相关性研究被引量：6
- 2007年
- 目的了解阿尔茨海默病(AD)的执行功能障碍的临床特征以及与ApoE基因多态性的相关性。方法采用简易痴呆筛选量表(MMSE)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、Fuld物体记忆测验(FOM)、词语流畅性测验(RVR)、日常生活行为量表(ADL)、画钟测验(CDT)及Hachinski缺血积分量表等认知功能测评及ApoE基因检查。结果认知功能检查显示:AD患者的记忆、执行功能、计算力较健康对照组有显著性差异,结合ApoE基因检查显示带有e4者认知功能损害更明显。结论AD的认知功能较健康对照组明显减退,且带有ApoEε4者损害更严重。ε4是AD的风险基因。
- 张许来张晓莉陶领知夏海森杨佩玲孔晓明张丽程丽高红李泽爱张胜权
- 关键词：阿尔茨海默病APOE基因
- N-乙酰半胱氨酸（NAC）抗乙肝病毒（HBV）作用
- 目的:探讨NAC抗乙肝病毒活性及其机制.方法:体外以转染了乙肝病毒的HepG2.2.2.15细胞株作为实验对象,培养细胞中加入NAC.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中的乙肝表面抗原(HBsAg)、e抗原(HB...
- 张胜权
- 关键词：乙型肝炎病毒N-乙酰半胱氨酸乙肝表面抗原
- 文献传递
- IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响
- 2013年
- 目的探讨白介素-10(IL-10)对皮肤角质形成(HaCaT)细胞中血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响及其可能机制。方法培养HaCaT细胞,用不同剂量IL-10刺激后,通过荧光定量PCR(Real-time PCR)在mRNA水平上分析IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响;通过Western blot法分析IL-10对HaCaT细胞信号通路:丝裂原蛋白激活激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)及磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)的影响,并通过MAPKs-ERK1/2特异性阻断剂PD98059及PI3K-AKT特异性阻断剂LY294002阻断这两个信号途径,进而分析IL-10影响HaCaT细胞中VEGF-A表达的可能机制。结果 Real-time PCR分析结果显示IL-10能抑制HaCaT细胞中VEGF-A转录水平的表达;Western blot法结果显示:IL-10能够增加ERK1/2和AKT的磷酸化水平。阻断剂研究显示IL-10抑制VEGF-A转录水平表达的作用不依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径。结论 IL-10抑制HaCaT细胞中VEGF-A转录水平的表达,不依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥作用。
- 贾波罗欣李磊程丰伟王芳黄海良杨小萍张胜权
- 关键词：HACAT细胞IL-10信号途径
- 人白细胞介素-21cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达被引量：4
- 2004年
- 目的 :克隆人细胞因子IL 2 1全长cDNA及其在大肠杆菌中表达 ,并进一步检测其表达产物的功能。方法 :抽取外周血 ,分离淋巴细胞 ;抗CD3抗体刺激后 ,提取总RNA ,通过RT PCR获得两个部分重叠的IL 2 1cDNA片段 (分别为 5′端 2 4 2bp ,3′端 4 2 5bp) ,重组PCR扩增出IL 2 1全长cDNA。DNA测序正确后 ,将成熟IL 2 1cDNA的编码框序列构建到原核表达载体pET2 8a(+)中。卡那霉素平板筛选及PCR鉴定 ,挑出阳性克隆进行扩增、转化大肠杆菌进行IPTG诱导表达。SDS PAGE、Westernblotting鉴定 ,亲和层析分离纯化得到Mr 为 186 0 0的带有组氨酸标签重组人IL 2 1融合蛋白。透析法重折叠复性 ,MTT法测定其对T细胞增殖活性。结果 :成功获得人IL 2 1全长cDNA ,并以包涵体形式表达于大肠杆菌中。重折叠后的rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。
- 张胜权陈兵罗欣徐从贞
- 关键词：克隆包涵体重折叠T细胞增殖
- 人白细胞介素29对Hela细胞抗病毒保护作用
- 2008年
- 目的研究重组人白介素29(rhIL-29)对Hela细胞的抗病毒保护作用及其作用机制。方法传代培养的Hela细胞按一定密度接种于24孔培养板,分别加入不同浓度的rhIL-29,培养24h后换液一次,继续以含rhIL-29的培养基培养16h,用水疱性口炎病毒(VSV)感染后,以不加rhIL-29为空白对照。RT-PCR分析MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶(2′,5′-OAS)mRNA及VSV的RNA水平;MTT及细胞形态学检测分析rhIL-29对Hela细胞的抗病毒保护作用。结果经rhIL-29处理的Hela细胞的MxA蛋白、2′,5′-OAS的mRNA表达明显上调,VSVRNA含量显著下降。MTT分析结果rhIL-29对Hela细胞有保护作用且具有剂量依赖关系(P<0.01)。结论rhIL-29通过上调MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶,抑制VSV增殖具有一定的保护Hela细胞免受病毒损伤的作用。
- 罗欣黄海良张胜权
- 关键词：抗病毒药蛋白质类
