王洁琳
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都卫生发展科研专项北京市重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- A基因型HBV转基因小鼠的品系恢复被引量：1
- 2016年
- HBV为3 200bp双链不完全环状的DNA结构,其DNA具有高度突变性,可形成不同基因型,目前分为10种（A-J）。A型多分布于西欧、南非、美国等,此地区中HBV感染者约90%为A型,而我国多见B和C型。近年我国A型HBV感染逐渐增多,但受体外试验模型限制。
- 王洁琳时景仁陈德喜石英
- 关键词：转基因小鼠体外试验急性乙型肝炎灵长类动物多聚酶链反应
- HBV rtA181T突变对Huh7细胞自噬的影响
- 2016年
- 目的探讨HBV逆转录酶区A181T(rtA181T)位点突变对Huh7细胞自噬的影响。方法 Huh7细胞分别转染1.3mer HBV野生型质粒(WT组)、1.3mer HBV rtA181T突变型质粒(181T组)及1∶1共转WT和rtA181T突变型质粒(WT+181T组)。Western Blot、免疫荧光检测细胞内HBV表面蛋白(HBs)表达水平,ELISA检测细胞外HBs Ag表达水平;Western Blot分析内源性自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)及P62表达水平,Real-time PCR检测自噬相关基因Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA的转录水平;同时转染绿色荧光蛋白LC3后,免疫荧光检测自噬颗粒。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光观察181T组、WT组及WT+181T组细胞内均有HBs表达,Western Blot结果显示181T组细胞内的HBs表达高于WT组和WT+181T组。ELISA检测3组细胞培养上清的HBs Ag水平差异有统计学意义(F=66.739,P<0.001),其中181T组细胞外的HBs Ag水平(0.111±0.056)远远低于WT组(3.157±0.490)和WT+181T组(2.240±0.797)(P值均<0.001);WT组、181T组和WT+181T组均可见LC3-Ⅱ自噬颗粒聚集,181T组LC3-Ⅱ表达水平高于WT组和WT+181T组,而P62水平低于WT组和WT+181T组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);181T组自噬相关基因Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA转录水平均明显高于WT组和WT+181T组(P值均<0.05)。结论 HBV rtA181T突变可导致HBs Ag分泌障碍,并增加Huh7细胞的自噬水平。
- 时景仁郭向华王洁琳王珊珊乔录新陈德喜
- 关键词：突变自噬
- 微滴式数字PCR用于HCV RNA定量检测的评价被引量：3
- 2016年
- 丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus，HCV）感染是引起慢性肝病的主要原因之一。HCVRNA检测对于HCV诊断、疗效监测以及治疗终点评估具有重要意义。目前，国内外广泛使用的HCVRNA定量检测试剂大多基于实时荧光定量PCR技术。由于标准品的不同，不同厂家仪器检测结果之间会存在较大差异，即使同一种方法，由于环境以及操作人员不同，反应自身扩增效率也会存在一定变化，造成结果存在差异。
- 魏飞力黄彦翔殷继明李庆王洁琳陈德喜
- 关键词：实时荧光定量PCR技术HCVRNARNA定量检测丙型肝炎病毒慢性肝病疗效监测
