黄夏冰
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：郑州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- rMBP-NAP依赖IL-12/IL-23轴对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究r MBP-NAP在肝癌H22荷瘤小鼠模型中的肿瘤生长抑制作用以及IL-12/IL-23在其发挥抗肿瘤作用中的角色。方法 BABL/c小鼠左前肢腋下皮下注射2×106个H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,荷瘤后第2天将小鼠随机分为两组,PBS组和r MBP-NAP组,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行治疗,期间监测肿瘤体积。取荷瘤小鼠脾脏制成单细胞悬液,分为对照组和抗体阻断组,同时加入丝裂霉素C处理过的H22细胞和r MBP-NAP与脾细胞共培养,抗体阻断组中分别加入anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体,对照组中加入同型抗体。于培养3 d和7 d后检测IFN-γ的表达。结果相对于PBS组,r MBP-NAP治疗组小鼠的肿瘤生长显著减缓。r MBP-NAP刺激后,荷瘤小鼠脾细胞分泌大量IFN-γ,共培养3 d和7 d后,IFN-γ表达持续累积。anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体阻断后,均可导致IFN-γ的表达量显著性下降。结论 r MBP-NAP能够显著性抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。
- 王小龙康巧珍门颖丽黄夏冰张亚萌刘鑫
- 关键词：IL-12IL-23IFN
- MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：将12只6～8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×10^6个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17A mRNA的相对表达量。结果：MBP能抑制肿瘤的生长（P〈0.05）。与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降（P〈0.05）。结论：MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应。
- 门颖丽康巧珍王小龙杜明宣黄夏冰张亚萌汲振余王婷刘鑫
- 关键词：麦芽糖结合蛋白TH1TH17
- 共抑制分子VISTA胞外段重组蛋白表达及其对EAE小鼠治疗作用的研究
- 研究背景：共刺激分子参与调节T细胞的活化/凋亡，其中负性共刺激分子（共抑制分子）能够产生负性信号，削弱、限制或中止免疫应答，它可以诱导免疫耐受的形成并且维持外周耐受，从而阻止自体免疫发生。大量研究表明，共抑制分子在多发性...
- 黄夏冰
- 关键词：自身免疫性脑脊髓炎调节T细胞病程进展
- 实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)C57BL/6J小鼠模型构建被引量：1
- 2015年
- 目的建立慢性-非缓解的实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,以便用于多发性硬化症的研究和治疗。方法采用背部多点MOG35-55免疫建立EAE模型,模型期间按Benson评分标准对EAE的病程进行临床评估,取发病高峰期脊髓和脑组织进行H&E染色,观察炎症细胞浸润情况。结果经该方法建立C57BL/6J小鼠EAE模型,具有稳定、发病率高的特点。对EAE小鼠的脊髓、脑组织进行的病理学检测结果表明,与对照组小鼠相比,EAE小鼠的脊髓、脑组织中炎性细胞浸润增多。结论本研究成功构建了MOG35-55免疫的C57BL/6J EAE小鼠模型。
- 黄夏冰康巧珍王晓东丁聪江慧刘诗梦刘鑫
- 关键词：多发性硬化症自身免疫性脑脊髓炎
- GST-NAP融合蛋白可溶性表达及柱上切割GST标签被引量：8
- 2015年
- 利用基因工程的方法,以实验室保存的p MAL-C2X-NAP质粒为模板,PCR扩增NAP基因,构建重组质粒p GEX-NAP.重组质粒通过酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),再经IPTG低温诱导获得可溶性GST-NAP融合蛋白,最后利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶树脂进行纯化,Prescission蛋白酶进行柱上切割去除GST标签.结果表明,p GEX-NAP重组质粒构建正确,在大肠杆菌中经IPTG低温诱导表达,可获得大量可溶性GST-NAP融合蛋白.Prescission蛋白酶柱上切割去除GST标签后,经Western Blot验证NAP蛋白能被兔抗NAP多克隆抗体特异识别.
- 黄夏冰康巧珍傅国汲振余刘鑫
- 关键词：重组质粒蛋白表达
- 小鼠PD-1胞外段重组蛋白表达及其包涵体复性被引量：2
- 2017年
- 旨在利用原核表达系统制备可溶性的PD-1胞外段(以下简称exPD-1)蛋白.以C57BL/6小鼠脾细胞cDNA为模板,扩增小鼠exPD-1基因,成功构建重组质粒pET-28a-exPD-1,并在E.coliBL21(DE3)中诱导表达.结果显示,小鼠exPD-1重组蛋白大小约为17kD,以包涵体形式存在.exPD-1包涵体蛋白经8mol/L尿素变性、Ni-NTA亲和层析后,采用尿素梯度透析法对蛋白进行复性,复性效果不佳,添加氧化/还原型谷胱甘肽复性后,复性率达到50%以上,提高了复性效率.小鼠exPD-1蛋白的成功制备,为进一步研究PD-1的免疫学功能奠定了材料基础.
- 江慧康巧珍黄夏冰张成龙刘鑫
- 关键词：PD-1原核表达载体包涵体复性PD-1
