江慧
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)C57BL/6J小鼠模型构建被引量：1
- 2015年
- 目的建立慢性-非缓解的实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,以便用于多发性硬化症的研究和治疗。方法采用背部多点MOG35-55免疫建立EAE模型,模型期间按Benson评分标准对EAE的病程进行临床评估,取发病高峰期脊髓和脑组织进行H&E染色,观察炎症细胞浸润情况。结果经该方法建立C57BL/6J小鼠EAE模型,具有稳定、发病率高的特点。对EAE小鼠的脊髓、脑组织进行的病理学检测结果表明,与对照组小鼠相比,EAE小鼠的脊髓、脑组织中炎性细胞浸润增多。结论本研究成功构建了MOG35-55免疫的C57BL/6J EAE小鼠模型。
- 黄夏冰康巧珍王晓东丁聪江慧刘诗梦刘鑫
- 关键词：多发性硬化症自身免疫性脑脊髓炎
- 兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用
- 2017年
- 利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。
- 门颖丽康巧珍王小龙江慧刘诗梦汲振余王婷刘鑫
- 关键词：LPSIFN-Γ
- 蛋白4.1家族在小鼠黑色素瘤细胞中的表达及其对细胞增殖的影响
- 2016年
- 目的筛选小鼠黑色素瘤细胞中蛋白4.1家族的表达,探讨蛋白4.1对小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响。方法以MEF、B16、B16-F10细胞基因组RNA和总蛋白为模板,经PCR法和Western blot筛选蛋白4.1在小鼠黑色素瘤细胞中的表达;通过分子克隆构建真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3并转染黑色素瘤细胞;检测表达蛋白4.1B后B16、B16-F10细胞增殖的变化。结果蛋白4.1B在黑色素瘤细胞中表达缺失;通过转染成功构建的真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3发现,表达蛋白4.1B的黑色素瘤细胞的增殖作用被显著性抑制。结论通过真核表达载体p EGFP-N1-EPB41L3转染表达蛋白4.1B可显著抑制B16和B16-F10黑色素瘤细胞的增殖。
- 门颖丽康巧珍丁聪刘诗梦江慧王晓东汲振余刘鑫王婷
- 关键词：黑色素瘤细胞真核表达抑制增殖
- rMBP‑NAP调控巨噬细胞及直接抗肿瘤的用途
- 本发明提供了rMBP‑NAP调控巨噬细胞的用途，本发明人意外发现，所述MBP‑NAP可促进巨噬细胞增殖和/或增强巨噬细胞吞饮能力和/或促进巨噬细胞向M1型极化。本发明还提供了MBP‑NAP融合蛋白直接抗肿瘤的应用。
- 康巧珍刘鑫江慧杜娟王婷鲁吉珂汲振余石雨
- 文献传递
- 小鼠PD-1胞外段重组蛋白表达及其包涵体复性被引量：2
- 2017年
- 旨在利用原核表达系统制备可溶性的PD-1胞外段(以下简称exPD-1)蛋白.以C57BL/6小鼠脾细胞cDNA为模板,扩增小鼠exPD-1基因,成功构建重组质粒pET-28a-exPD-1,并在E.coliBL21(DE3)中诱导表达.结果显示,小鼠exPD-1重组蛋白大小约为17kD,以包涵体形式存在.exPD-1包涵体蛋白经8mol/L尿素变性、Ni-NTA亲和层析后,采用尿素梯度透析法对蛋白进行复性,复性效果不佳,添加氧化/还原型谷胱甘肽复性后,复性率达到50%以上,提高了复性效率.小鼠exPD-1蛋白的成功制备,为进一步研究PD-1的免疫学功能奠定了材料基础.
- 江慧康巧珍黄夏冰张成龙刘鑫
- 关键词：PD-1原核表达载体包涵体复性PD-1
