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韩先干: 作品数：186 被引量：376H指数：9; 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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牛型布氏杆菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及免疫原性检测: 根据已发表的牛型布氏杆菌外膜蛋白OMP2b基因的核苷酸序列,设计一对特异性的引物,以牛型布氏杆菌A19株基因组为模板,通过PCR扩增出OMP2b全长,将OMP2b经T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,OMP2b全长1 ...; 何亮韩先干胡青海丁铲于圣青; 关键词：蛋白表达; 文献传递

鸭疫里默氏杆菌血凝素基因的克隆、表达及其蛋白的定位分析: 根据本实验室测定的鸭疫里默氏杆菌CH3株全基因组精细图中的血凝素基因序列设计一对特异性引物，PCR扩增不同血清型鸭疫里默氏杆菌的血凝素基因，进行序列测定与分析。结果表明血凝素基因全长1059bp，编码352个氨基酸。鸭疫...; 屠晶胡青海于圣青丁铲韩先干朱寅玉王小兰苗双卢凤英; 关键词：鸭疫里默氏杆菌血凝素基因克隆原核表达蛋白定位

一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法: 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法。本发明公开了一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒，其包含3对引物：RADnaBP1和RADnaBP2；E.coliphoAP1和E.c...; 于圣青胡青海韩先干丁铲仇旭升宋翠萍; 文献传递

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1的原核表达与免疫学检测被引量：3: 2010年; 本研究采用原核表达载体pCold-HF在大肠杆菌中表达I型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus type Ⅰ,DHV-Ⅰ)弱毒株FC64株的VP1蛋白,经超声波裂解结果显示:VP1融合蛋白呈现可溶性表达。利用His-bindResin试剂盒纯化该产物,作为免疫原免疫小鼠,制备特异性抗体,进行免疫学检测。结果表明:该抗体与原核表达产物、DHV感染的SPF尿囊液总蛋白呈现特异性反应,这为DHV-Ⅰ快速诊断方法的建立奠定了基础。; 宋翠萍韩先干仇旭升于圣青陈鸿军丁铲; 关键词：鸭肝炎病毒 VP1 原核表达

上海水产品中异尖线虫分子鉴定与流行性调查的初步研究: 目的:为了解上海市海洋鱼类中异尖线虫的感染现状,探讨其对水产品的健康危害。方法:从市场上随机抽取10种海洋鱼类,通过目测和显微镜检测异尖线虫。聚合酶链反应扩增核糖体DNA(rDNA)的内部转录间隔区(ITS)序列并测序分...; 王旭贾海燕米荣升黄燕韩先干陈兆国; 关键词：海洋鱼类; 文献传递

禽致病性大肠杆菌等的多重PCR检测引物组、方法及试剂盒: 本发明提供了一种用于禽致病性大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR引物组、包括该引物组的多重PCR检测试剂盒以及利用该引物组的多重PCR检测方法，引物组包括：特异性扩增禽大肠...; 韩先干王志豪祁克宗左佳坤龚建森苗晋锋陈兆国蒋蔚王少辉米荣升黄燕

流产布鲁菌变异株S2308△rfbE感染促进小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)成熟和细胞因子释放被引量：2: 2020年; 目的研究流产布鲁菌变异株S2308△rfbE感染对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)成熟和免疫应答功能的影响。方法采用流式细胞术检测S2308△rfbE感染小鼠BMDC后主要组织相容性抗原复合体Ⅰ(MHCⅠ)、MHCⅡ、CD40、CD86的表达变化,ELISA检测BMDC的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10的分泌量。结果S2308△rfbE感染BMDC后,细胞表达MHCⅠ、MHCⅡ、CD40、CD86明显增强,TNF-α、IL-6和IL-10分泌量升高。结论布鲁菌变异株S2308△rfbE促进BMDC成熟和细胞因子分泌。; 谭婧玉韩先干张敏刘海文; 关键词：毒力基因

基于不同靶基因的3种住肉孢子虫PCR检测方法比较被引量：6: 2020年; 为筛选敏感、特异的住肉孢子虫(Sarcocystis spp.)PCR检测方法,对以住肉孢子虫18S rRNA、28S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶I基因(cox 1)的部分片段为靶基因设计的3套引物建立的PCR方法进行敏感性和特异性试验,并对田间采集的100份牛源和猪源肌肉样品进行检测。结果显示,以18S rRNA和28S rRNA为靶基因的PCR检测方法的敏感性相似,DNA最小检出量均为1×10-2 ng/μL;而以cox 1为靶基因的PCR检测方法敏感性相对较低,DNA的最低检出量为1 ng/μL。对7种不同寄生虫DNA进行特异性试验,结果以cox 1基因为靶基因的PCR方法特异性较好,仅能够扩增出枯氏住肉孢子虫(Sarcocystis cruzi)DNA;以18S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫和微小隐孢子虫也有相似扩增条带;以28S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫、微小隐孢子虫和欧猥迭宫绦虫DNA也能扩增出杂带,但大小不符。利用3种方法对100份牦牛和猪肉样品进行扩增,发现以18S rRNA、28S rRNA和cox 1为靶基因的PCR法的阳性率分别为36.00%(36/100)、43.00%(43/100)和38.00%(38/100)。结果表明,以cox 1为靶基因的PCR法有良好的特异性,适合用于田间动物肌肉样品中住肉孢子虫的检测,为开展动物住肉孢子虫病分子流行病学及防控研究提供了依据。; 孙滔米荣升张烨华张世杰张晓丽贾海燕贾海燕黄燕曾江勇黄燕陈兆国龚海燕; 关键词：PCR方法住肉孢子虫

一种基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统的构建及评价被引量：1: 2021年; 为构建一种具有广泛适用性的原核启动子报告系统,以质粒pFLX107为骨架,通过多克隆位点替换和序列改造,构建出基于lacZ基因和pUC复制子的pFGH系列报告载体,然后以lacZ基因缺失株MC4100为宿主菌筛选背景活性最低的质粒作为最终的报告系统,并利用诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM分别对其进行测试。结果显示,在所构建的pFGH系列质粒中,pFGH06的背景活性显著低于同系列其他质粒,在28℃培养条件下甚至显著低于低拷贝参考质粒pRCL的活性(P<0.01)。进一步的评估测试显示,质粒pFGH06可用于诱导型启动子或组成型启动子的克隆及活性测定,且在模拟应用于启动子筛选时,通过蓝白斑筛选即可实现对目标启动子的完全识别。与已报道的原核启动子报告系统相比,pFGH06具有体积小、克隆位点多、背景活性可调、对启动子筛选识别效率高等优点,具有广泛的应用前景。; 付立霞付立霞韩先干韩先干赖迎迢赖迎迢黄志斌; 关键词：报告基因 Β-半乳糖苷酶定点突变

禽致病性大肠杆菌安徽分离株luxS和pfs基因的克隆、表达与细胞外合成AI-2活性检测被引量：14: 2012年; 【目的】LuxS/AI-2型密度感应系统存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于细菌种间交流的通用自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2),细菌许多生理功能都受此系统的调节。本研究开展对禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)自诱导信号分子AI-2的检测和建立体外合成、定量的方法,为进一步研究APEC的AI-2调控作用奠定基础。【方法】利用哈维弧菌BB170(Vibrio harveyi BB170)开展对APEC AI-2的检测;利用表达、纯化的LuxS和Pfs在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(Sadenosylhomocysteine,SAH),进行AI-2的体外合成。【结果】APEC能产生自诱导信号分子AI-2;成功表达可用于AI-2合成的可溶性重组蛋白LuxS和Pfs;纯化的重组蛋白LuxS和Pfs与SAH同时作用后,合成了浓度为300μmol/L的AI-2;运用哈维弧菌BB170对合成的AI-2活性检测表明,其活性是阴性对照的700倍。【结论】APEC存在LuxS/AI-2型密度感应系统,APEC的LuxS和Pfs可以在体外催化SAH生成有活性的AI-2分子。本研究为进一步研究APEC的AI-2的调控作用奠定基础。; 韩先干白灏刘蕾陈文静丁铲胡青海祁克宗于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌密度感应系统 LUXS

韩先干

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