胡巧玲
- 作品数:18 被引量:138H指数:7
- 供职机构:武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 狂犬病病毒核衣壳抗原诊断试剂盒实验室内的质控方法
- 2007年
- 目的探讨狂犬病病毒核衣壳抗原诊断试剂盒实验室内质控方法。方法以ELISA双抗体夹心法检测狂犬病病毒抗原为例,采用“Levey-Jennings”和“即刻法”质控法进行对比。结果“Levey-Jennings”质控图中所有测定结果均处于“在控状态”,而“即刻法”质控图中一次测定结果处于“失控状态”。结论宜采用双质控方法进行狂犬病病毒核衣壳抗原诊断试剂盒实验室内质控。
- 王泽鋆胡巧玲徐葛林
- 关键词:狂犬病病毒试剂盒
- 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体(ScFv)的表达和鉴定
- 目的:对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行可溶性表达及特异性鉴定和中和活性检测.
方法:将表达人源单链抗体的菌株A12进行诱导后进行SDS-PAGE及Westernblot检测,用流式细胞仪(...
- 闭兰张爱华孙可芳胡巧玲祝玉桃王志友余模松
- 关键词:单链抗体可溶性表达噬菌体抗体库
- 文献传递
- 两种无佐剂国产狂犬病疫苗的免疫效果观察被引量:7
- 2007年
- 目的评价以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)及以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)的免疫效果。方法选取35名(1组)和46名(2组)一般的Ⅱ级暴露后患者,按0、3、7、14和28d的免疫程序,分别接种武汉生物制品研究所(CTN-1株毒种、Vero细胞)和河南普新生物技术公司生产的无佐剂狂犬病疫苗(aG株毒种、原代地鼠肾细胞),观察接种后的不良反应,采用快速荧光灶抑制实验(RFFTT)检测初免后7、14d血清狂犬病毒中和抗体。结果两种疫苗初免后7d的抗体阳转率分别为58.52%和65.22%,无显著性差异,初免后14d的抗体阳转率均为100%,接种Vero细胞狂苗组无不良反应;接种原代地鼠肾细胞狂苗组有1人接种第二针后出现4cm×4cm的红肿。结论两种无佐剂国产狂犬病疫苗产生保护性抗体时间短,以CTN-1株毒种在Vero细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(冻干型)免疫效果好于以aG株毒种在原代地鼠肾细胞上生产的无佐剂狂犬病疫苗(液体型)。
- 赵德峰徐葛林郑新雄祝玉桃胡巧玲严家新
- 关键词:狂犬病疫苗免疫效果安全性
- 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定被引量:4
- 2005年
- 目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性。结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带。FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应。RFFIT表明,A12 ScFv在1∶27倍稀释时能完全中和病毒。结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性。
- 闭兰张爱华孙可芳胡巧玲祝玉桃王志友余模松
- 关键词:单链抗体基因表达可溶性表达
- 狂犬病疫苗细胞培养灭活验证实验方法的建立被引量:1
- 2010年
- 目的建立狂犬病疫苗细胞培养灭活验证实验方法。方法将9批狂犬病疫苗样品及含有不同病毒量的CTN病毒悬液在Vero细胞上培养21d,丙酮固定细胞后,采用免疫荧光法检测,同时与小鼠法进行比较;并验证细胞培养法的重复性和灵敏度。结果细胞培养免疫荧光法检测的9批狂犬病疫苗样品结果均为阴性,CTN病毒液均为阳性,与小鼠法检测结果一致。细胞培养法的检测灵敏度可达3.3FFU/ml,重复性良好。结论已建立了狂犬病疫苗细胞培养灭活验证实验方法 ,该法具有良好的灵敏度和重复性,可用于狂犬病疫苗的灭活验证。
- 汪霞徐葛林孙文唐建蓉毕军吴杰张丽娜卢颖林娜胡巧玲张永振
- 关键词:狂犬病疫苗灭活细胞培养
- 表达狂犬病毒糖蛋白的重组痘苗病毒对狗的免疫效果观察被引量:8
- 1993年
- 用表达狂犬病毒糖蛋白的两株重组痘苗病毒对狗口服、划痕和肌肉注射三种途径的免疫效果进行观察。结果口服免疫未见抗体阳转,而划痕和肌注免疫在第七天就能诱导中和抗体。中和抗体滴度达642。以肌肉注射、皮下注射和脚掌注射免疫小鼠,亦获得较好的免疫效果。
- 蔡兵应保龄胡巧玲陈乃民李承平兰华庚江立新朱家鸿
- 关键词:痘苗糖蛋白狂犬病病毒
- 人用狂犬病疫苗ELISA快速鉴别试验的建立及验证被引量:2
- 2011年
- 目的:建立人用狂犬病疫苗快速鉴别试验并进行验证。方法:采用双抗体夹心ELISA,以4株抗狂犬病毒核蛋白单抗包被微孔板,通过捕捉检品中狂犬病病毒核蛋白进行快速鉴别试验,对该方法进行特异性、灵敏度、重复性和适用性验证。结果:采用双抗体夹心ELISA进行鉴别试验,验证结果显示该方法具有较高的特异性和灵敏性,RSD<15%,对于不同疫苗生产毒株均可有效鉴别。结论:双抗体夹心ELISA可以替代传统效力试验对人用狂犬病疫苗进行快速鉴别。
- 曹守春唐建蓉胡巧玲徐葛林李加吴小红刘景华曲小肃石磊泰董关木
- 关键词:生物制品疫苗狂犬病酶联免疫吸附试验
- 狂犬病疫苗评价
- 徐葛林严家新孟胜利胡巧玲张永振王定明周敦金唐建蓉杨晓明王萍朱凤才肖奇友董关木郑新雄明平刚吴杰
- “狂犬病疫苗评价”课题属于传染病应用研究领域,针对中国狂犬病近几年来呈上升趋势,该课题首次在全国范围内对中国狂犬病高发、低发及无狂犬病地区有代表性地选取5个点,分别采集动物样品,检测分离其中可能存在的狂犬病毒,并对其主要...
- 关键词:
- 关键词:狂犬病疫苗疫病诊断
- 狂犬病毒糖蛋白及核蛋白在非复制型痘苗病毒天坛株中的共同表达被引量:12
- 2000年
- 目的 提高重组痘苗病毒狂犬疫苗的有效性和安全性。方法 利用TK区表达狂犬病毒糖蛋白 (RG)的重组痘苗病毒作为亲本株 ,通过两步同源重组 ,删除痘苗病毒基因组CK片段间与毒力和宿主范围相关的核酸片段 ,同时将狂犬病毒核蛋白 (RN)基因插入C K片段之间 ,获得了含有RG基因和RN基因的非复制型重组痘苗病毒VTKRGΔCKLacZRN。结果 经PCR鉴定 ,RN基因已插入CK区 ;Westernblot结果显示 ,该株病毒能同时表达RG和RN ,相对分子质量 (Mr)分别为 6 5× 10 3 和 5 0 5× 10 3。VTKRGΔCKLacZRN在人源细胞如TK 143细胞中不能正常繁殖 ,在鸡胚成纤维细胞 (CEF)中能正常复制。与非复制型重组病毒VTKRGΔCK相比 ,VTKRGΔCKLacZRN免疫小鼠后能更快地诱生较高滴度的中和抗体 ,效果相当于复制型重组病毒VTKRG免疫组 ;它们均能保护小鼠针对致死剂量狂犬病毒国际标准攻击毒株 (CVS)的攻击。
- 李萍朱家鸿严家新郭斐胡巧玲王继麟刘碧芬阮力
- 关键词:狂犬病毒糖蛋白核蛋白
- 检测狂犬病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用被引量:29
- 2004年
- 目的 建立一种简易快速、适用于野外的胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测动物脑或唾液中的狂犬病街毒抗原。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗狂犬病毒单抗 ,制成免疫层析测试条。样品中的狂犬病毒抗原与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果 GICA测试条只与狂犬病毒抗原有特异性反应 ,与乙型脑炎病毒、正常小鼠脑组织等无交叉反应。GICA与EIA比较检测了 4 8份可疑狂犬病犬唾液样品 ,两法的符合率为 88 2 %。结论 GICA检测样品中的狂犬病毒抗原特异性强、、灵敏度高、简便快速、无需仪器设备 ,对基层单位开展初步鉴定狂犬病毒样品工作而言 ,不失为一种有效的方法。
- 徐葛林胡巧玲吴杰郑新雄张燕
- 关键词:狂犬病毒胶体金免疫层析法