黄伟波
- 作品数:6 被引量:21H指数:2
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- 相关领域:轻工技术与工程化学工程农业科学自然科学总论更多>>
- 诺卡氏菌产高活力腈水合酶补料分批发酵工艺的优化
- 2010年
- [目的]优化诺卡氏菌产腈水合酶的发酵工艺,获得高活力的腈水合酶。[方法]对诺卡氏菌(Nocardiasp.)发酵产腈水合酶过程中菌体生长、pH变化以及葡萄糖消耗对腈水合酶合成的影响进行了分析。[结果]在分批补糖工艺中,使发酵液的葡萄糖浓度维持在1.5~6 g/L,发酵结束时,发酵液酶活达到2 814.3 U/ml,是优化前的8.7倍。[结论]分批补糖工艺增加了菌生长的生物量,大大提高了诺卡氏菌的产酶水平。
- 黄伟波黎常宏王筱兰
- 关键词:腈水合酶诺卡氏菌
- 腈水合酶在大肠杆菌中的表达纯化
- 2010年
- 微生物的腈水合酶是催化丙烯腈生成丙烯酰胺的重要生物催化剂,广泛应用于氨基酸、酰胺、羧酸及其衍生物的合成。通过PCR扩增得到诺卡氏菌的腈水合酶基因。实验先构建得到BL21-pGEX-4T-1/NHase重组菌,表达GST-NHase融合蛋白。由于GST的相对分子质量较大,阻碍了腈水合酶的β亚基与α亚基的正确结合,从而使腈水合酶表现不出酶活。于是又构建了BL21-pET-30c/NHase重组菌,IPTG诱导表达结果显示,腈水合酶α亚基基本没有得到表达,影响了腈水合酶的活性。经生物信息学分析发现,腈水合酶α亚基的起始密码子为gtg,可能不易被大肠杆菌的RNA聚合酶识别,于是通过点突变将gtg替换成atg,阳性重组子经IPTG诱导表达,结果显示腈水合酶β亚基和α亚基的表达量都有所提高。诱导表达的菌液经超声破碎,离心得到粗酶液,用EPI-30-ARG-IDA-Co2+亲和载体纯化带6×His tag的腈水合酶,气相色谱法检测腈水合酶的酶活达到200 U/mL。
- 周全伟黄伟波黎常宏王筱兰
- 关键词:诺卡氏菌腈水合酶重组质粒
- 一珠腈水合酶产生菌发酵过程的控制及其酶学性质的研究
- 来源于微生物的腈水合酶(Nitrilehydratase,NHase,EC4.2.1.84)是工业生产丙烯酰胺(Acrylamide,AM)的重要生物催化剂。它催化丙烯腈(Acrylonitrile,AN)转化为AM的反...
- 黄伟波
- 关键词:腈水合酶诺卡氏菌补料分批发酵酶学性质
- 文献传递
- 一株腈水合酶产生菌发酵过程的控制及其酶学性质的研究
- 来源于微生物的腈水合酶(Nitrile hydratase,NHase,EC4.2.1.84)是工业生产丙烯酰胺(Acrylamide,AM)的重要生物催化剂。它催化丙烯腈(Acrylonitrile,AN)转化为AM的...
- 黄伟波
- 关键词:腈水合酶诺卡氏菌补料分批发酵
- 文献传递
- 明代术数分类研究
- 术数,指以种种方术观察自然界可注意到的现象,来推测人和国家的气数和命运。术数源于原始社会的巫术。术数不仅种类丰富,数量众多,而且各种术数的内容相互交织,难以区别,其分类在历朝历代不尽相同。明朝术数的发展有两个方面比较显著...
- 黄伟波
- 关键词:社会阶层
- 硫酸盐还原菌的筛选及生理特性研究被引量:19
- 2010年
- [目的]为使用硫酸盐还原菌处理废水提供理论依据。[方法]利用硫酸盐还原菌选择培养基从生产赤霉素产生的废水中筛选硫酸盐还原菌。依据不同菌株对硫酸根的降解效率,对筛选出的菌株进行复筛。选取对硫酸盐降解效果最好的菌株,研究温度、pH值、接种量等对其生理活性的影响。[结果]从供试废水中共筛选出8种硫酸盐还原菌,其对硫酸根的降解效率为26.22%~87.75%。经综合分析,确定8号菌株为优势菌;不同接种量对其硫酸盐降解效率影响不大;温度和pH值对硫酸盐还原菌的影响较大,最适温度和pH值分别为35℃和7.5。[结论]8号菌株为优势菌,在最适条件下其对污水中硫酸盐的去除率达80%以上。
- 李俊叶黄伟波王筱兰邹峥嵘
- 关键词:硫酸盐还原菌污水处理