汪生鹏
- 作品数：32 被引量：132H指数：8
- 供职机构：江苏科技大学生物与环境工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家蚕一种hAT家族转座酶基因的分析
- 2011年
- 【目的】对家蚕中一个潜在的hAT家族转座酶编码基因BmhAT进行分析。【方法】通过生物信息学方法,分析BmhAT转座酶的结构域及序列同源性。采用Real-time PCR方法,对BmhAT在野蚕及家蚕不同品种中的拷贝数进行分析以及在mRNA水平上测定BmhAT在家蚕不同组织中的相对表达量。【结果】BmhAT与许多hAT家族转座酶在序列上有很高的同源性,并具有hAT家族转座酶的保守结构域;BmhAT在家蚕基因组中存在约3—6个拷贝;在家蚕后部丝腺和脂肪体中的表达量分别是参照基因actin 3的0.4倍和0.6倍。【结论】BmhAT可能是家蚕中一个有活性的转座酶基因,编码家蚕一种新的hAT家族转座酶。
- 沈小绢孙霞汪生鹏郭锡杰
- 关键词：家蚕转座酶
- 家蚕的载脂蛋白Ⅲ在原核细胞中的表达与纯化
- 载脂蛋白Ⅲ是昆虫体内用于脂质转运的一种不含脂质的血淋巴蛋白,同时参与鳞翅目昆虫体内的细胞免疫。为了研究家蚕载脂蛋白Ⅲ在原核细胞中的表达情况,本实验研究在不同大肠杆菌表达菌株、不同IPTG诱导浓度和不同诱导温度的条件下家蚕...
- 汪生鹏刘虹均
- 关键词：原核表达
- 家蚕裸蛹突变系统的研究进展
- 2011年
- 主要介绍了裸蛹突变系统突变机制的相关研究和裸蛹突变系统的开发利用,并且简单总结了家蚕基因定位克隆的方法,希望为裸蛹突变系统进一步研究提供一定的帮助。
- 梅兴林李木旺汪生鹏
- 关键词：家蚕突变系统定位克隆
- 二化性家蚕卵低温和常温催青的胚胎期蛋白质表达差异分析被引量：3
- 2010年
- 家蚕二化性品种的滞育性受上代胚胎期环境条件调控,查找家蚕胚胎期滞育关联蛋白,可为最终阐明家蚕滞育的分子机制提供实验依据。以家蚕二化性品种秋丰的蚕卵为材料,分别在25℃常温和18℃低温条件下催青,提取胚胎不同发育时期蚕卵的易溶性和难溶性蛋白,采用蛋白质双向电泳(2-DE)和图像分析技术,研究蚕卵在胚胎不同发育时期的蛋白质差异表达谱。在易溶性和难溶性蛋白图谱中分别检测到5个和7个差异显著的蛋白点。对这些差异蛋白点进行质谱鉴定,有8个蛋白点得到可信的最佳匹配蛋白报告,共鉴定出卵特异蛋白、卵黄原蛋白、表皮蛋白和丙酮酸脱氢酶激酶4种蛋白。这些差异表达蛋白可能导致蚕卵胚胎中物质代谢和能量代谢的不同,据此推测低温和常温催青可能在蚕卵胚胎中诱导了不同的生理生化反应。
- 章扬裘智勇赵巧玲唐顺明汪生鹏宋海韬沈兴家
- 关键词：家蚕滞育蛋白质质谱鉴定
- 家蚕品种间抗氟性比较及遗传分析被引量：4
- 1998年
- 王章娥汪生鹏裘智勇曹志清刘扣宝范建奇孔岳樵
- 关键词：家蚕抗氟性
- 日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶(SjCTPI)基因在家蚕中的表达
- 该实验利用DNA重组技术将日本血虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶(SjCTPI)基因克隆到转移载体pBacPAK8上,通过限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳分析表明,SjCTPI基因已正确定向克隆到转移载体上,置于多角体蛋白启动子控制...
- 汪生鹏
- 关键词：基因表达家蚕植酸酶
- 文献传递
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人生长素被引量：2
- 2011年
- 人生长素是由腺垂体分泌的一种在人体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素,具有广泛的生理作用。利用家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bac-to-Bac表达系统,将人生长素基因(hgh)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,通过细菌转座子原理,转化BmDH10Bac细胞,获得重组穿梭载体质粒Bacmid-hgh,并将其转染家蚕BmN细胞,获得含有hgh的重组杆状病毒。将此重组病毒感染家蚕BmN细胞,收集重组病毒液并穿刺接种家蚕5龄起蚕,3 d后观察到家蚕感染了杆状病毒的症状,并通过SDS-PAGE和Western blotting方法在家蚕血液中检测到分子质量约20 kD的目的蛋白,表明人生长素通过Bac-to-Bac系统在家蚕体内获得了表达。
- 付凡陈蔚唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：家蚕核型多角体病毒家蚕
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白被引量：2
- 2011年
- 瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4～5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。
- 陈蔚付凡唐顺明汪生鹏黄金山赵巧玲沈兴家
- 关键词：重组杆状病毒融合蛋白家蚕
- 家蚕对AcMNPV感染基因的定位分析
- 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica nuclearpolyhedrosisvirus,AcMNPV)作为杆状病毒的代表种,能够感染30多种鳞翅目昆虫,经常被作为生物农药来利用和研究....
- 于焕君李木旺汪生鹏李娟张静侯成香
- 关键词：家蚕ACMNPV基因定位
- 家蚕裸蛹基因(Nd)的SSR定位被引量：10
- 2009年
- 家蚕裸蛹是自然突变产生的,裸蛹基因(Nd)与丝素重链基因(Fib-H)同处于第25染色体上,二者紧密连锁。利用家蚕雌性不交换的特点,以家蚕正常茧品种P50和裸蛹品种Nd为亲本获得P50×(P50×Nd)和(P50×Nd)×P50回交群体(分别记为BC1M和BC1F),再用已经构建的家蚕SSR分子标记连锁图谱对Nd基因进行定位,共筛选出7个与Nd基因连锁的SSR标记。BC1F群体中的所有裸蛹个体均表现出与(P50×Nd)F1相同的杂合型带型;而所有正常茧个体带型与亲本P50一致,为纯合型。利用另一个群体BC1M构建了Nd基因的遗传连锁图,连锁图的遗传距离为96.8 cM,Nd基因位于60.8 cM。同时得到了2个与Nd紧密连锁的SSR标记S2511及S2513,与Nd基因的距离分别为0.1 cM和1.1 cM。
- 杨晓博李木旺汪生鹏王修业郭秋红徐安英黄勇平郭锡杰
- 关键词：家蚕SSR定位
