胡豫杰 作品数:19 被引量:154 H指数:7 供职机构: 国家食品安全风险评估中心 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 北京市自然科学基金 北京市科技新星计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 经济管理 理学 更多>>
鼠伤寒沙门菌婴幼儿分离株耐药基因及毒力基因研究 被引量:11 2016年 目的基于全基因组测序结果,分析鼠伤寒沙门菌耐药表型和耐药基因的关系,研究其耐药发生机制和毒力因子。方法利用美国临床和实验室标准委员会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法对5岁以下腹泻患儿粪便中分离的321株鼠伤寒沙门菌开展药物敏感性试验,从中选择不同耐药表型的3株鼠伤寒沙门菌(S1:敏感;S2:TET耐药;S3:ESBLs阳性,10重耐药)进行全基因组测序,通过与抗生素抗性基因数据库(ARDB)和病原毒力因子数据库(VFDB)比对以及美国国立生物技术信息中心(NCBI)核酸数据库人工检索,对耐药基因和毒力基因进行注释。结果 321株鼠伤寒沙门菌对IPM和MEM均敏感,对TET和AMP的耐药率最高,分别为84.4%(271/321)和83.8%(269/321),206株菌株显示为耐3类以上抗生素(64.2%,206/321),11株CIP-CTX耐药株均为ESBLs阳性(3.4%,11/321);全基因组测序结果显示,S1、S2和S3的全基因组大小依次为4 876 427、4 970 690、5 133 380 bp,预测编码基因数分别为4 825、4 936和5 082个,GC含量依次为52.18%、52.14%、51.87%;对S1、S2和S3基因组中18、20和32个耐药基因进行注释,除共有基因外,S2主要携带tet A和sul2基因,S3主要携带sul1/2/3、tetB、AAC(3)-IV、AAC(6')-I、ANT(2″)-I、ANT(3″)-I、aph A1、bla_(CTX-M-14)、bla_(OXA-1)、catB3、cml_e1和cml_e3基因。与阳性鼠伤寒沙门菌株LT2的gyr A基因进行序列比对发现,S3 gyr A基因第87位密码子由GAC突变为AAC(Asp87→Asn);分别注释S1、S2和S3基因组的130、129和120个毒力基因,发现主要以三型分泌系统和粘附因子为主。结论 5岁以下腹泻患儿粪便样品中鼠伤寒沙门菌耐药现象严重;全基因组测序分析发现耐药基因与耐药表型一致,且存在多种毒力因子;为后续开展耐药基因传播机制和菌株致病性研究,评估其对人群的健康风险,防控鼠伤寒沙门菌感染提供技术支持。 王伟 胡豫杰 徐进 彭子欣 张宏元 赵熙 许学斌 李凤琴关键词:婴幼儿 鼠伤寒沙门菌 耐药基因 全基因组测序 食源性致病菌 RapidChek SELECT检测食品中沙门菌方法的评价 被引量:1 2015年 目的评价Rapid Chek SELECT方法对食品中沙门菌的检测效果并验证。方法用添加并回收沙门菌标准菌株方法验证Rapid Chek SELECT的检测限,添加非沙门菌标准菌株方法测定其特异性,以国标法为参比,通过检测实际样品,对Rapid Chek SELECT方法进行验证。结果 1Rapid Chek SELECT沙门菌检测试纸条的检测限为1 cfu/25 g(或1 cfu/ml);2与10种非沙门菌无交叉反应特异性;3直接检测食品中沙门菌的最低浓度为106cfu/ml;4对实际样品中沙门菌的检测结果显示,Rapid Chek SELECT方法和国标方法阳性率分别为87.5%(35/40)和85%(34/40),两种方法最终检测结果的符合率为97.5%(39/40),Rapid Chek SELECT方法等同于国标方法。结论与国标方法相比,Rapid Chek SELECT沙门菌检测试剂盒灵敏度高、特异性强、操作简便,有效减少非沙门菌的干扰、省时,适用于食品中沙门菌的快速检测。 闫韶飞 王伟 胡豫杰 徐进 赫英英 李凤琴关键词:RAPID SELECT 沙门菌 食品 食源性致病菌 中国食源性和猪源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌遗传特性和耐药特征分析 被引量:7 2013年 目的了解从肉猪养殖和屠宰环境、猪胴体及猪回肠淋巴结和即食食品中分离的877株金黄色葡萄球菌中甲氧西林耐药基因(mecA)的分布,筛选出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA),并对MRSA的耐药特征进行研究。方法经表型和耐热核酸酶基因(nuc基因)鉴定为金黄色葡萄球菌的877株菌,通过聚合酶链反应测定其mecA基因的携带情况,筛选出MRSA,并用微量肉汤稀释法对筛选出的MRSA进行耐药性分析。结果 877株实验菌株中有71株mecA基因阳性,为MRSA,检出率为8.1%;71株MRSA中有48株源自肉猪养殖和屠宰环境、猪胴体及猪回肠淋巴结,占该来源菌株的20.6%(48/233),为猪源性MRSA;23株分离自即食食品,占该来源菌株的3.6%(23/644),为食源性MRSA。猪源性MRSA检出率明显高于食源性MRSA(χ2=53.040,P<0.01)。71株MRSA对利奈唑胺、万古霉素、替加环素和呋喃妥因均敏感,对头孢西丁、苯唑西林和苄青霉素均耐药;对克林霉素、红霉素、四环素、环丙沙星、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑和庆大霉素的耐药率分别为98.6%(70株)、95.8%(68株)、88.7%(63株)、80.3%(57株)、80.3%(57株)和32.4%(23株);对左氧氟沙星、摩西罗星、利福平和奎奴普汀/达福普丁耐药者各1株;猪源性MRSA菌株对环丙沙星、四环素和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑的耐药率要明显高于食源性MRSA菌株(环丙沙星:χ2=29.110,P<0.01;四环素:χ2=18.816,P<0.01;甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑:χ2=36.394,P<0.01)。耐3种以上抗生素的多重耐药MRSA菌株有70株(98.6%),耐药谱有8种。结论中国猪源性和食源性MRSA多重耐药现象严重。 王伟 郭云昌 裴晓燕 胡豫杰 白莉 孙爱萍 刘继开 付萍 李凤琴关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药 2013年夏季北京市售整鸡沙门菌分离株耐药性及耐药机制研究 被引量:4 2017年 目的了解2013年夏季北京市售整鸡样品中分离的166株沙门菌耐药性及耐药机制。方法采用微量肉汤稀释法对166株沙门菌进行9类11种抗生素的耐药性检测,挑选头孢类耐药株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测,并对环丙沙星和头孢噻肟双耐药株进行耐药机制分析。结果 94.6%(157/166)的沙门菌至少对一种抗生素耐药,多重耐药株占58.4%,对萘啶酸耐药率最高,为92.2%(153/166),其他依次为氨苄西林(48.8%)、氨苄西林-舒巴坦(44.0%)和四环素(44.0%)。共有27种耐药谱,常见的耐药谱为萘啶酸(n=46,29.3%)、萘啶酸-氨苄西林-氨苄西林/舒巴坦(n=28,17.8%)。47株头孢噻肟耐药株中有41株(87.2%)ESBLs阳性,其中有38株同时对环丙沙星耐药。这38株环丙沙星和头孢噻肟双耐药且ESBLs阳性的沙门菌中存在喹诺酮耐药决定区(QRDRs)、质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)和ESBLs等耐药机制,37株测试菌株的GyrA的第83位、87位氨基酸和ParC的57位、80位氨基酸存在不同程度突变。38株测试菌株均检测到不同种类和数量的PMQR基因,如qnrB、qnrS、oqxAB和aac(6’)-Ib-cr等,部分基因存在突变。主要存在的β-内酰胺酶类型为CTX-M型(35株)、TEM型(20株)和OXA型(36株),未检测到SHV型和AmpC型。结论北京市售整鸡中沙门菌整体耐药水平较严重,需强化对肉鸡养殖、屠宰、运输、销售等环节中沙门菌耐药性监测,分析耐药机理及传递机制,同时注意临床感染治疗用药监管。 胡豫杰 赫英英 白瑶 李凤琴 徐进关键词:沙门菌 耐药性 耐药机制 stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法检测产志贺毒素大肠埃希菌的评估 被引量:4 2014年 目的评价stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法在检测产志贺毒素大肠埃希菌的特异性和敏感性的差异。方法运用stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒分别对29株大肠埃希菌参考菌株和45株食品分离大肠埃希菌株进行检测。结果 stx-PCR方法可以判定50株菌携带stx基因,同时Vero细胞毒性试验可以判定这些菌株具有细胞毒性,两者的一致性为100%;酶联免疫试剂盒能判定其中38株菌具有志贺毒素。结论 3种方法都具有很好的特异性。stx-PCR方法和Vero细胞毒性试验较酶联免疫试剂盒具有更高的敏感性,试剂盒适用于食源性疾病暴发事件中产志贺毒素大肠埃希菌的快速筛选,stxPCR方法推荐作为实验室常规快速检测方法,Vero细胞毒性试验是检测产志贺毒素大肠埃希菌是否具有志贺毒素生物学活性的金标准方法。 白莉 胡豫杰 王佳慧 吴青 赫英英 王伟 甘辛 韩春卉 李凤琴 徐进关键词:产志贺毒素大肠埃希菌 志贺毒素 生孢梭菌代谢产物对ICR小鼠的毒性研究 被引量:6 2014年 目的研究生孢梭菌代谢产物对ICR小鼠的毒性作用。方法将分离自浓缩乳清蛋白粉及其制品样品中的生孢梭菌分别培养在庖肉肉汤及TPGY肉汤培养基中,将过滤除菌及处理后的培养液分别经灌胃和腹腔注射给予ICR小鼠,观察其中毒及死亡情况。结果生孢梭菌培养液及处理后的培养液经腹腔注射ICR小鼠后均对其有毒性作用,中毒症状表现为小鼠急促呼吸后猝死,死亡时间多集中在10 min内,平均为5~7 min,A-F多价抗肉毒毒素诊断血清对小鼠无保护作用。结论生孢梭菌代谢产物中含有不同于肉毒毒素的有毒代谢产物,腹腔注射可导致ICR小鼠猝死。 董银苹 韩春卉 江涛 张宏元 王佳慧 韩小敏 甘辛 白莉 王伟 胡豫杰 李凤琴 徐进关键词:代谢产物 毒性试验 食品安全 ICR小鼠 北京市餐饮业食用冰块微生物污染水平调查 被引量:5 2014年 目的评估北京市餐饮业食用冰块微生物污染的风险。方法在北京市场抽检了63份餐饮业食用冰块样品,冰块独立分装在无菌采样袋中,2 h内完成采样到检测的过程。按照国家标准方法检测其中的菌落总数、大肠菌群、沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。结果 63份餐饮业食用冰块样品均未检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌等致病菌。连锁快餐店和咖啡店食用冰块的菌落总数和大肠菌群等指示菌计数较低,部分饮品甜品店食用冰块菌落总数和大肠菌群较高。结论检测的食用冰块样品均是安全的。部分饮品甜品店用食用冰块指示菌较高,提示生产过程中可能存在微生物污染,需要严格执行卫生操作规范的程序。 韩春卉 余东敏 韩海红 董银萍 白莉 王伟 甘辛 胡豫杰 徐进关键词:大肠菌群 菌落总数 食用冰块 致病菌 青岛市屠宰场整鸡中沙门菌污染水平定量检测及耐药性分析 被引量:1 2016年 目的调查青岛市规模化肉鸡屠宰场屠宰后整鸡样品中沙门菌的污染及抗生素耐药谱分布状况。方法2014年10-12月在青岛市选择2家规模化肉鸡屠宰场,采用胴体漂洗法定量检测3次共采集的141份屠宰后整鸡样品中沙门菌,根据Kauffmann-White表对沙门菌菌株进行血清学鉴定,应用微量肉汤稀释法检测菌株对11种抗生素的耐药性。结果整鸡样品沙门菌总体污染率为74.5%(105/141),污染水平3.6〉1 100 MPN/100 g,中位数为43 MPN/100 g;共分离355株沙门菌,血清型分布为肠炎沙门菌220株,印第安纳沙门菌88株和阿贡纳沙门菌19株,以及其他型28株。355株沙门菌分离株的总体耐药率为90.4%(321/355),萘啶酸(NAL)耐药率最高(88.7%,315/355)。220株肠炎沙门菌中219株(99.5%)耐药,6株(2.7%)为多重耐药株,优势耐药谱为奈啶酸(156株)。88株印第安纳沙门菌均耐药,85株为多重耐药株,优势耐药谱为庆大霉素-氯霉素-环丙沙星-萘啶酸-氨苄西林-青霉烷砜/氨苄西林-头孢他啶-头孢噻肟-复方新诺明。19株阿贡纳沙门菌除1株对奈啶酸耐药外,其余18株对所测试11种抗生素均敏感。结论青岛市肉鸡屠宰场沙门菌污染率较高,血清型以肠炎沙门菌、印第安纳沙门菌和阿贡纳沙门菌为主。沙门菌总体耐药率较高,并呈现多重耐药性趋势。 王伟 王伟 赵熙 张雅楠 胡豫杰 马柯 李凤琴 李凤琴 马爱国关键词:屠宰场 沙门菌 食源性致病菌 耐药 血清分型 北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌的耐药特征分析 被引量:4 2016年 目的了解北京市某大型集贸市场内部环境样品和零售生鲜猪肉中分离肠球菌的耐药性特征。方法采用肉汤稀释法测定86株肠球菌对10种临床常用抗生素的药物敏感性。结果 86株肠球菌对四环素、红霉素、高浓度链霉素、环丙沙星、高浓度庆大霉素和氯霉素的耐药率分别为67.44%(58/86)、54.65%(47/86)、38.37%(33/86)、26.74%(23/86)、23.26%(20/86)和20.93%(18/86),耐3种以上抗生素的多重耐药肠球菌有30株,占34.88%,耐药谱共有22种。所有肠球菌对氨苄西林、青霉素和万古霉素均敏感。耐药谱型分析发现,不同样品来源肠球菌的耐药谱差异较大。另外,本研究从国内食品中分离到对达托霉素耐药的肠球菌,此前我国未见相关报道。结论北京市集贸市场内部环境和零售生鲜猪肉中分离的肠球菌耐药严重,并呈现一定的耐药谱型差异,而且分离到达托霉素耐药株,应引起关注。 彭子欣 张爽 王伟 胡豫杰 吕涵阳 张建中 李凤琴关键词:肠球菌 药敏试验 耐药性 集贸市场 食源性致病菌 免疫磁珠富集联合荧光定量PCR快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌O26∶H11 被引量:9 2014年 目的建立肉制品中免疫磁珠富集(IMS)联合实时荧光定量PCR(qPCR)技术快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)O26∶H11的方法。方法建立针对编码O26抗原wzx基因实时荧光定量PCR方法,并验证其特异性和敏感性;人工污染不同浓度STEC O26∶H11的牛肉馅样品,在增菌不同时间后,将增菌液原液、增菌液经免疫磁珠特异性捕获分离物分别进行qPCR检测及平板分离。结果 qPCR检测O26∶H11可产生特异性荧光信号,而23株其他血清型的大肠埃希菌及7株其他种属细菌均未见荧光信号;本方法对纯培养的检测限为5×102cfu/ml。人工染菌试验中,当初始染菌浓度达到或高于3×102cfu/25 g时,增菌培养6 h后IMS捕获物可以检测到荧光信号。培养20 h后,初始染菌浓度为3"10-1cfu/25 g以上,对增菌液直接检测和IMS捕获物检测都可以检测到荧光信号。初始污染浓度较低时,增菌6 h后IMS-qPCR的检测灵敏度高于增菌液直接qPCR检测;IMS捕获物涂布显色培养基分离目标菌检测灵敏度高于增菌液直接涂布;CHROMagar STEC显色培养基分离STEC O26∶H11的检测灵敏度高于山梨醇麦康凯培养基(SMAC)。结论 IMS联合qPCR检测食品中的STEC O26∶H11具有特异性强、敏感度高、快速、易操作等特点,可以提高样品中STEC O26∶H11菌的检出率,适用于牛肉制品中STEC O26∶H11的快速检测。 白莉 王伟 胡豫杰 吴青 赫英英 徐进 韩春卉 李凤琴关键词:免疫磁珠分离 食源性致病菌