张润青
- 作品数：64 被引量：191H指数：9
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- 弱D25变异型血型抗原表位分析及输血策略探讨被引量：9
- 2018年
- 目的对1例输注阳性血液的D变异型患者进行Rh血型血清学及分子生物学鉴定,并对其进行不规则抗体检测,探讨该D变异型的输血策略。方法采集患者标本,用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定D抗原,并用试剂盒检测D变异体抗原表位,Rh CE抗原分型,红细胞直接抗球蛋白试验,不规则抗体筛查;采用多重链接酶依赖的探针扩增（MLPA）方法检测RHD及RHCE基因型,对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对RHD基因全部10个外显子进行PCR扩增及产物直接测序分析。结果该患者初步D抗原鉴定结果显示为D抗原弱表达,且直接抗球蛋白试验阴性;D抗原表位检测结果显示其红细胞与D抗原ep D5.4、ep D2.1和ep D3.1表位特异性单克隆抗体产生弱凝集反应,与其余表位抗体均无凝集反应,大量输注D阳性血液后的168 d及232 d抗体筛查结果均为阴性;Rh CE抗原分型为cc Ee,MLPA结果显示其基因型为RHD/d,RHCE基因MLPA基因分型结果与血清学表型一致;RHD基因外显子直接测序发现其第3外显子携带纯合的c.341G〉A（p.Arg114Gln）错义突变。结论患者为弱D25变异型,对弱D25型的D抗原进行表位分析的显示其部分抗原表位缺失。该患者大量输注阳性血液后未产生抗-D,为制定该血型患者的临床输血策略提供数据。
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- 关键词：RH血型抗原表位
- RHCE*ce(308C>T)突变型等位基因Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
- 目的建立Rh血型系统RHCEce(308C>T)突变型等位基因的Taqman探针实时荧光定量PCR检测方法,筛查携带该等位基因的个体,并对其RhCE血型抗原进行鉴定分析。方法针对RHCE基因c.308C>T突变位点设计特...
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- 文献传递
- 罕见复合抗体抗-A_1Le^b的鉴定及其特征分析——附1例报告被引量：3
- 2015年
- 目的探讨罕见复合抗体抗-A1Leb的鉴定方法并分析其特征。方法首先用试管法鉴定患者的ABO及Lewis血型,并做抗体筛选及鉴定;再将患者血清和多个随机献血者红细胞反应,初步判断抗体的特性;最后将患者血清与已知ABO亚型及Lewis血型的献血者红细胞反应,鉴定抗体的特异性。结果患者血型为A1,Le(a-b-);其血清与所有O型红细胞及Leb抗原阴性的红细胞均不反应,仅与Le(b+)的A1型红细胞反应,鉴定为抗-A1Leb。结论当遇到仅与部分A或B型红细胞反应而不与任何O型红细胞反应的不规则抗体时,应考虑该抗体可能是针对Lewis血型系统复合抗原的抗体。
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- 关键词：LEWIS血型
- 多重连接探针扩增技术(MLPA)在广州地区无偿献血者人群红细胞血型抗原高通量基因分型中的应用
- 目的 采用新型红细胞血型系统的MLPA检测试剂盒对广州地区收集的91名无偿献血者进行常见血型抗原的基因分型.方法 提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒对17种红细胞血型系统的近50个血型抗原进行基因分型.结果 在91...
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- 关键词：红细胞血型多重连接探针扩增技术基因分型
- 广州地区汉族人群Diego血型系统多态性调查被引量：14
- 2015年
- 目的了解广州地区汉族人群中Diego血型系统DI1(Dia)和DI2(Dib)、DI3(Wra)和DI4(Wrb)两对抗原的基因频率分布,为指导临床输血提供依据。方法随机收集广州地区献血者200名,从静脉血提取基因组DNA。采用红细胞血型系统多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术对DI1和DI2、DI3和DI4两对抗原进行基因分型。采用测序法对MLPA基因分型结果做进一步确认。结果广州地区汉族人群中DI1、DI2、DI3和DI4抗原的基因频率分别为0.040 0、0.960 0、0.000 0和1.000 0。MLPA基因分型结果与测序法分型结果完全一致。DI1和DI2、DI3和DI4抗原在广州地区汉族人群随机输血中抗原不配合率分别为3.84%和0.00%。结论 DI1和DI2抗原在广州地区汉族人群随机输血中不配合率较高,具有一定临床意义。通过MLPA方法可以对DI1和DI2抗原进行基因分型从而推测其表型,解决了因抗体来源困难导致抗原鉴定难以开展的难题。
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- 关键词：基因测序基因频率
- 混合抗体型自身免疫性溶血性贫血的血型定型和抗体鉴定被引量：14
- 2013年
- 【目的】建立合适的方法解决混合抗体型自身免疫性溶血性贫血的血型定型和抗体鉴定。【方法】分离标本的血清和红细胞,将红细胞进行轻度热放散和氯喹放散实验后,用于ABO正定型、Rh血型抗原分型和后续的自身吸收实验;取适量患者血清,加入等量O型红细胞进行抗体吸收,吸收后的血清用于ABO反定型实验;分别采用PEG法和自身吸收法对自身抗体进行吸收,比较两者的吸收时间、吸收次数、吸收后血清抗体鉴定结果;取适量红细胞进行乙醚放散,放散液用于抗体鉴定。【结果】21例患者的ABO血型得到正确鉴定,15例患者的Rh血型进行了正确定型。2种吸收方法处理后的血清抗体检测结果一致:检出自身抗体合并同种抗体7例,其中4例同种抗体得到确认,3例同种抗体特异性未明确;单纯自身抗体14例。PEG法总吸收时间为825 min,平均为39.3 min;总吸收次数55次,平均每例吸收2.6次;自身细胞放散后吸收实验总耗时为2 070 min,平均为98.7 min;总吸收次数66次,平均每例吸收3.1次。【结论】轻度热放散结合氯喹放散法适用于混合抗体型AIHA患者血型定型前的红细胞处理;PEG吸收法快速、简便、吸收效果好,适合用于临床实际工作。
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- 关键词：自身免疫性溶血性贫血放散氯喹
- 混合抗体型自身免疫性溶血性贫血的输血前试验研究
- 2012年
- 目的建立合适的方法,解决混合抗体型自身免疫性溶血性贫血的血型定型和抗体鉴定。方法分离标本的血清和红细胞,将红细胞进行轻度热放散和氯喹放散试验后,用于ABO正定型、Rh血型抗原分型和后续的自身吸收试验;取适量患者血清,加入等量O型红细胞进行抗体吸收,吸收后的血清用于ABO反定型实验;分别采用PEG法和自身吸收法对自身抗体进行吸收,比较2者的吸收时间、吸收次数、吸收后血清抗体鉴定结果;取适量红细胞进行乙醚放散,放散液用于抗体鉴定。结果21名患者的ABO血型得到正确鉴定,15名患者的Rh血型进行了正确定型。
- 骆宏张润青罗广平赵阳魏玲莫春妍姬艳丽王贞
- 关键词：输血前抗体鉴定反定型放散试验同种抗体
- 广州地区人群中RHD* 960A突变型等位基因的鉴定及血型血清学与分子生物学特征分析被引量：7
- 2017年
- 目的分析广州地区人群中RHD*960A突变型等位基因个体的血型血清学与分子生物学特征。方法收集RhD变异型标本,采用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定RhD血型,抗球蛋白凝胶卡法进行直接抗球蛋白试验,并用RhD抗原表位检测试剂盒(D-Screen)检测RhD抗原表位;此外,采用Rh血型分型卡检测Rh CE抗原;采用多重连接酶依赖的探针扩增(MLPA)方法检测RHD及RHCE基因型;对MLPA方法无法给出检测结论的标本,进行RHD基因全部10个外显子的PCR扩增及产物直接测序。结果发现3例RhD变异型标本,直抗阴性,初步血清学结果显示RhD抗原弱阳性表达,RhD抗原表位检测结果显示其红细胞与RhD抗原epD6.6、epD8.2和epD9.1表位特异性单克隆抗体无凝集反应,与其余表位抗体呈弱阳性凝集反应;RHCE抗原分型1例为CCee,其余2例为Ccee;RHD基因的MLPA基因分型显示其基因型为正常的RHD/d(即未鉴定出其携带的突变型RHD等位基因),后续RHD基因外显子直接测序发现其第7外显子携带c.960G>A(p.Leu302Leu)同义突变,RHCE基因MLPA基因分型结果与血清学表型一致。结论首次在广州地区人群中发现了RHD*960A突变型等位基因个体,并进行血清学抗原表位和基因型检测,其血清学表现为部分D。
- 王贞温机智张润青罗广平魏玲骆宏姬艳丽
- 关键词：RH血型MLPA
- 红细胞疑难与稀有血型检测技术的建立及临床应用
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- 该项目属于生物医药高新技术领域。其主要技术内容：在广州血液中心临床输血研究所建立了一系列的血型血清学及分子生物学技术，包括凝胶血型检测卡及不完全抗体快速反应介质试剂的研发、红细胞血型抗原高通量的多重连接依赖式探针扩增（M...
- 关键词：
- 关键词：血型检测红细胞血型
- MNS杂交糖蛋白GP. Mur的高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型被引量：2
- 2018年
- 目的采用高分辨率熔解曲线（HRM）基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型并验证HRM基因分型方法的可靠性。方法收集254例献血者全血标本（广州地区献血者104例,澳大利亚华裔献血者150例）,利用DNA提取试剂盒抽提基因组DNA;以HRM基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型;以多重连接依赖的探针扩增技术（MLPA）或血清学方法对GP.Mur阳性标本做确证试验,同时采用直接测序法对HRM检出的变异曲线标本确证。结果 HRM基因分型254例标本中杂合的GP.Mur有14例,其中11例GP.Mur阳性标本均来自广州献血者,经MLPA基因分型方法证实其基因型为GYP＊Mur/GYPB,另外3例为澳大利亚华裔献血者标本,血清学试验证实红细胞表型为GP.Mur。此外,HRM方法还检出了4例变异曲线标本,测序结果显示这4例标本均在GYPB基因上携带有点突变。结论 HRM方法能准确地对GP.Mur糖蛋白做基因分型,该方法在突变扫描方面具有极大的优势。
- 魏玲姬艳丽张润青王贞温机智付涌水罗广平
- 关键词：高分辨率熔解曲线基因分型
