韩阳
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划黑龙江省教育厅资助项目黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 抗IL-1βscfv抗体与TNF—α可溶性受体融合蛋白的构建及其生物学活性分析被引量:2
- 2012年
- 目的设计原核表达抗人白细胞介素.1B单链抗体(IL-1βscfv)与TNF.仪可溶性受体的融合蛋白,并分析其生物学活性,为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物。方法利用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增了人肿瘤坏死因子I型受体胞外区基因片段,与抗人IL-1βscfv通过抗体铰链区融合,克隆至pET27b(+)表达载体中,构建成pET-IL-1scfv:TNFR1质粒;转化大肠杆菌Rosetta进行表达。从包涵体中纯化得到IL-1scfv:TNFR1蛋白,进行IL-1scfv:TNFR1的鉴定及活性检测。结果ELISA结果证明,IL-1scfv:TNFRl可以分别结合hIL-1β和hTNF-α,并呈现剂量依赖性,表明IL-1scfv:TNFR1的单链抗体部分和可溶性受体部分可以各自形成正确的空间构象;免疫斑点分析证明,IL-1scfv:TNFRl与hTNF—α结合后仍可以结合hIL-1β,具有同时结合hlL-1β和hTNF-α的两种靶分子的能力,表明IL-1scfv:TNFR1的两个部分不会相互影响与靶分子的结合。活性测定结果表明,IL-1scfv:TNFRl可以有效封闭肿瘤坏死因子对L929细胞的细胞毒效应,具有显著抑制hlL-1β促进L929细胞增殖的活性,IL-1scfv:TNFR1对两种靶分子的拮抗作用均呈现明显的剂量依赖性。结论成功构建了能够同时结合hIL-1β和hTNF-α两种靶因子的双特异性IL-1scfv:TNFR1融合蛋白,并能有效抑制hTNF-α和IL-1β的生物活性,为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物。
- 阚方明任桂萍郭茉韩阳齐剑英张宇张雅坤李德山
- 关键词:白细胞介素1Β肿瘤坏死因子Α类风湿关节炎
- 配装预压缩机构的生物质秸秆压缩机
- 配装预压缩机构的生物质秸秆压缩机属于农副产品加工机械;在机架总成上、位于压缩成型腔体侧部呈垂直地依次配装预压缩腔体和预压缩液压油缸,所述的预压缩腔体与压缩成型腔体相互连通,预压缩液压油缸的油缸杆与预压缩腔体连通,在预压缩...
- 孙勇丁宁韩阳徐焱
- 文献传递
- 两种旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠免疫保护效果的评估被引量:2
- 2023年
- 为评估旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对BALB/c小鼠的免疫保护作用,选用2种重组表达的Serpin型和Kazal型旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsAdSPI和TsKaSPI),联合弗氏佐剂通过腹腔注射的方式单独免疫小鼠,用间接ELISA法检测免疫后小鼠特异性血清抗体IgG以及IgG亚型(IgG1和IgG2a)的水平,用CCK-8法测定重组蛋白刺激后脾淋巴细胞的增殖情况,用ELISA法检测脾淋巴细胞培养液上清中细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-12和IL-4的水平;使用旋毛虫肌幼虫攻击感染免疫后的小鼠,计算并分析小鼠肠道成虫减虫率及肠道病理变化,并评估TsAdSPI和TsKaSPI与ISA206佐剂联合免疫小鼠后对小鼠肠道成虫减虫率的影响。结果表明,与PBS组相比,2种重组蛋白所诱导的IgG和IgG亚型抗体水平均明显升高,IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10表达水平也均显著升高,且重组蛋白可诱导免疫小鼠脾淋巴细胞的体外增殖;攻虫结果表明,2种重组蛋白免疫后小鼠肠道旋毛虫成虫数量较PBS组显著减少且肠道病理变化减轻;2种重组蛋白联合免疫组的成虫减虫率高于单独免疫组。上述结果表明,重组蛋白TsAdSPI和TsKaSPI均可诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答,并且能够在一定程度上阻止旋毛虫肌幼虫对小鼠肠道的入侵,减轻旋毛虫对小鼠肠道的病理损伤,且TsAdSPI和TsKaSPI联合免疫降低旋毛虫入侵的效果更显著。
- 甄晶博刘家欣林立浩孙凤张玉恒王瑞彪李志欣韩阳刘照琨路义鑫
- 关键词:旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫保护
- 筛选糖尿病候选药物FGF-21受体激动剂的新型细胞模型的建立被引量:3
- 2011年
- 建立以成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)信号通路为靶点的药物筛选细胞模型,用于筛选FGF-21受体激动剂类的新型治疗糖尿病药物。FGF-21的生理功能主要是通过细胞表面的FGFR及辅助受体βklotho传递信号,从而激活细胞内相关调控的一系列信号通路以及基因转录来实现的。本实验将βklotho基因构建到逆转录病毒表达载体pBMN-IRES-EGFP。将该载体导入包装细胞,收集病毒上清液并感染3T3-L1细胞,筛选到稳定表达βklotho细胞系。该细胞模型在FGF-21作用下可以促进细胞葡萄糖转运蛋白-1表达及转运水平升高,从而提高细胞糖吸收能力。构建该细胞系可以方便对FGF-21及类似药物进行高通量筛选,为糖尿病药物的研究提供了一种新方法。
- 高红梅王文飞张巧韩阳王琪任桂萍付云威李德山
- 关键词:FGF-21药物筛选糖尿病药物
- FGF21-L-Fc融合蛋白表达及其降糖作用初步评价被引量:4
- 2011年
- 成纤维细胞生长因子-21(FGF21)是FGF家族成员之一,最近发现具有独立调节血糖的作用。为了提高FGF21稳定性来达到更好的药效,通过柔性接头连接,制备重组融合蛋白FGF21-L-Fc,并对其生物学活性和体内药效学进行初步研究。纯化后的FGF21-L-Fc融合蛋白经鉴定,其分子量和特异性均与理论值相符。经微量化的GOD-POD法检测表明,FGF21-L-Fc融合蛋白能刺激体外培养的已分化成熟的3T3-L1脂肪细胞葡萄糖吸收,其葡萄糖消耗率与野生型相比有很大提高;在STZ造模糖尿病小鼠体内,其药效比野生型持续时间长。结果表明,改造的蛋白比野生型药效更持久,为以后FGF21的临床应用奠定了基础。
- 姚文兵任桂萍韩阳曹宏伟高红梅阚方明王琪李德山
- 关键词:葡萄糖吸收稳定性
- 犬干扰素-γ的可溶表达及其产物的活性鉴定被引量:1
- 2013年
- 为研究犬干扰素-γ(CaIFN-γ)的可溶表达,本研究应用SUMO表达系统高效稳定、可溶地表达了SUMO-CaIFN-γ蛋白。以MDCK细胞为靶细胞,MTT法检测CaIFN-γ对该细胞增殖的抑制作用。结果表明,CaIFN-γ对MDCK具有明显的抑制作用。Real time法检测CaIFN-γ刺激MDCK细胞后,细胞内源p53 mRNA水平的变化,结果显示,p53的表达量与CaIFN-γ的剂量和时间呈依赖性关系。本研究为进一步研究CaIFN-γ的生物学特性、研制新型CaIFN-γ用于我国犬类疾病的治疗及CaIFN-γ生物制剂的生产奠定了基础。
- 韩阳郝志超王琪王文飞赵景壮郭茉吴云舟叶贤龙任桂萍李德山
- 关键词:SUMOMTTP53
- 犬γ干扰素的可溶表达及其产物的活性鉴定
- 干扰素是一种多功能的细胞因子,具有抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节等功能,分为Ⅰ和Ⅱ两个型。Ⅰ型IFN包括α、β、ω等亚型,而Ⅱ型IFN则只有γ一个型。IFN-α主要由白细胞产生,与IFN-β,IFN-ω作用于同一受体,而IF...
- 韩阳
- 关键词:可溶表达生物活性鉴定
- 文献传递
- 平模压块机压辊机构
- 平模压块机压辊机构属于农副产品加工机械;该机构的压辊轴整体呈外侧向上方翘起α角折弯状,可转动地配装在压辊轴上的压辊外工作表面整体呈圆锥形,压辊外工作表面与压辊轴心线之间呈夹角β,所述的α角角度值与β角角度值相等;本结构设...
- 孙勇丁宁徐焱韩阳
- 文献传递