徐全圆
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家级星火计划国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马腺疫链球菌FNE基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2014年
- 采用PCR方法从马腺疫链球菌新疆分离株中扩增FNE基因片段,克隆至pMD19-T载体。利用分子生物学软件分析测序结果,将FNE截短基因亚克隆至原核表达载体pET-30a中,转化到大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导FNE重组蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western blot法分析蛋白表达及其反应原性。序列分析显示,其与GenBank收录的马腺疫链球菌4047(登录号YP002747216)核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为99%。采用PCR法扩增到675bp的FNE截短基因片段构建重组表达载体获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析在46ku处出现明显条带,Western blot分析显示具有反应原性。成功克隆和表达了马腺疫链球菌的FNE截短基因,为重组FNE蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 徐全圆刘建华苏艳加尔肯王世民冉多良
- 关键词：原核表达
- 马链球菌马亚种FNEB蛋白的截短表达及其免疫保护性研究被引量：12
- 2015年
- 为研究马链球菌马亚种FNEB蛋白的免疫保护性,本研究采用PCR方法从马链球菌马亚种新疆分离株中扩增FNEB基因部分片段,克隆于原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白大小约60 ku,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以马链球菌马亚种新疆分离株进行攻毒,结果显示该重组蛋白对免疫组小鼠具有保护力,保护率为65%。本研究克隆了马链球菌马亚种的FNEB截短基因并表达了相应重组蛋白,免疫小鼠后能够提供较好的保护,为重组FNEB蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。
- 徐全圆石明杨夷平李娜刘建华加尔肯冉多良
- 关键词：原核表达
- 牛病毒性腹泻病毒两种目的基因核酸疫苗免疫效果的比较
- 2015年
- 为研究和比较牛病毒性腹泻病毒(BVDV)囊膜蛋白E0和E2基因作为核酸疫苗候选基因的免疫效果,本实验构建了真核重组表达质粒p VAX1-E0和p VAX1-E2,并转染至293T细胞中,通过RT-PCR和western blot方法检测目的基因在293T细胞中的转录和表达情况。同时将重组质粒联合基因佐剂p VAX1-IL-2免疫小鼠,ELISA检测其中和抗体,结果表明,p VAX1-E0免疫组能够有效的诱导特异性血清抗体的产生,而p VAX1-E2免疫组效果不明显。MTT检测显示两组均显著促进了特异性淋巴细胞的增殖,并且p VAX1-E2组效果优于p VAX1-E0组。由此表明,p VAX1-E0可以诱导较好的体液免疫,而p VAX1-E2在细胞免疫方面效果较好。
- 石明宫玉玲徐全圆李娜刘建华加尔肯冉多良
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2基因真核表达核酸疫苗
- 马腺疫链球菌的分离鉴定及FN结合蛋白免疫原性的研究
- 本实验通过分离鉴定马腺疫链球菌新疆株并对马腺疫链球菌新疆株的FNE和FNEB基因的克隆及原核表达，获得FNE和FNEB截短基因编码的蛋白，并免疫小鼠分析表达产物的免疫原性。 本研究从马腺疫病马的脓汁中分离纯化得到革兰氏...
- 徐全圆
- 关键词：原核表达免疫保护
- 文献传递
- 马疱疹病毒1型gD基因主要中和抗原区原核表达载体的构建和表达被引量：5
- 2013年
- 根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)gD基因序列,设计一对特异性引物。将扩增的EHV-1gD基因片段克隆至pET-30a表达载体,筛选获得重组质粒pET-30a-gD。经鉴定证明pET-30a-gD原核载体构建成功。将其转化入BL-21大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,并对培养时间、IPTG诱导浓度等培养条件进行优化,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示pET-30a-gD获得了高效融合表达,其表达的蛋白分子量约为29kD。Western blot分析结果表明,显示获得的融合蛋白与EHV-1/EHV-4阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性。
- 孙建华何晶石明徐全圆杨夷平冉多良
- 关键词：原核表达GD基因
- 新疆部分地区马鼻肺炎的血清学调查被引量：15
- 2014年
- 为了解新疆马鼻肺炎(ER)的流行情况,利用间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)对2012年—2013年采自新疆5个地区的3 195份马血清进行马鼻肺炎血清学流行病学调查。结果显示,3 195份马血清中共检出阳性血清1 237份,平均阳性率为38.71%,其中,马鼻肺炎在秋季的阳性率最高(45.85%),其次是夏季的阳性率(43.44%),冬季的阳性率最低(19.32%)。而且,XJ-C地2013年马鼻肺炎的阳性率显著低于2012年(P<0.01)。此次调查数据可为新疆马鼻肺炎的防控工作及马产业的健康发展提供参考。
- 李娜孙建华石明徐全圆杨夷平刘建华加尔肯冉多良
- 关键词：马鼻肺炎血清流行病学调查间接ELISA
