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马鼻肺炎1型病毒LAMP检测方法的建立: 马鼻肺炎是引发马呼吸道感染和怀胎母马病毒性流产为主要特征的一种高度性传染性疾病的总称，病原为:马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)两种关系密切的疱疹病毒。　　本研究根据马鼻肺炎糖蛋白B(gB)基因特...; 杨夷平; 关键词：GB基因; 文献传递

马疱疹病毒1型gD基因主要中和抗原区原核表达载体的构建和表达被引量：5: 2013年; 根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)gD基因序列,设计一对特异性引物。将扩增的EHV-1gD基因片段克隆至pET-30a表达载体,筛选获得重组质粒pET-30a-gD。经鉴定证明pET-30a-gD原核载体构建成功。将其转化入BL-21大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,并对培养时间、IPTG诱导浓度等培养条件进行优化,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示pET-30a-gD获得了高效融合表达,其表达的蛋白分子量约为29kD。Western blot分析结果表明,显示获得的融合蛋白与EHV-1/EHV-4阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性。; 孙建华何晶石明徐全圆杨夷平冉多良; 关键词：原核表达 GD基因

马疱疹病毒1型LAMP检测方法的建立被引量：6: 2014年; 本试验旨在建立一种检测马疱疹病毒1型(EHV-1)的快速、灵敏、特异的环介导等温扩增技术(LAMP),同时评价该方法的可靠性。根据马鼻肺炎糖蛋白B(gB)基因特异保守序列设计多对LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320仪监测反应进程,进行引物筛选和反应条件的优化,建立能特异性扩增EHV-1DNA的LAMP检测方法,并加入SYBR GreenⅠ通过肉眼判断结果。该方法在65℃恒温下作用50min,使EHV-1DNA获得了高效率的特异性扩增,与其他马易感病毒如马疱疹病毒4型(EHV-4)等无交叉反应;且具有极高的灵敏性,可检测到10-4稀释的目标病毒,比普通PCR的灵敏度高10倍;反应结束后加入SYBR GreenⅠ肉眼观察的结果与LAMP Real Time Turbidimeter LA-320仪监测结果一致。通过将4份临床样品的LAMP检测结果与已得到验证的PCR结果进行比对,结果显示符合率为100%。本研究建立的LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏、简单易操作且设备要求低等特点,具有实地检测EHV-1的前景。; 杨夷平刘建华冉多良许全圆李娜加尔肯; 关键词：环介导等温扩增技术

马链球菌马亚种FNEB蛋白的截短表达及其免疫保护性研究被引量：12: 2015年; 为研究马链球菌马亚种FNEB蛋白的免疫保护性,本研究采用PCR方法从马链球菌马亚种新疆分离株中扩增FNEB基因部分片段,克隆于原核表达载体p ET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白大小约60 ku,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以马链球菌马亚种新疆分离株进行攻毒,结果显示该重组蛋白对免疫组小鼠具有保护力,保护率为65%。本研究克隆了马链球菌马亚种的FNEB截短基因并表达了相应重组蛋白,免疫小鼠后能够提供较好的保护,为重组FNEB蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。; 徐全圆石明杨夷平李娜刘建华加尔肯冉多良; 关键词：原核表达

新疆部分地区马鼻肺炎的血清学调查被引量：15: 2014年; 为了解新疆马鼻肺炎(ER)的流行情况,利用间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)对2012年—2013年采自新疆5个地区的3 195份马血清进行马鼻肺炎血清学流行病学调查。结果显示,3 195份马血清中共检出阳性血清1 237份,平均阳性率为38.71%,其中,马鼻肺炎在秋季的阳性率最高(45.85%),其次是夏季的阳性率(43.44%),冬季的阳性率最低(19.32%)。而且,XJ-C地2013年马鼻肺炎的阳性率显著低于2012年(P<0.01)。此次调查数据可为新疆马鼻肺炎的防控工作及马产业的健康发展提供参考。; 李娜孙建华石明徐全圆杨夷平刘建华加尔肯冉多良; 关键词：马鼻肺炎血清流行病学调查间接ELISA

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杨夷平