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董思国: 作品数：25 被引量：92H指数：5; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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用酶标抑制法检测霍乱疫苗中LPS含量的研究: 目的:建立替代动物免疫力试验的方法。方法:建立酶标抑制法来检测霍乱灭活疫苗中LPS含量,并进行了相应的动物保护力试验,从而确定LPS含量与疫苗保护力的间接关系。结果:用酶标抑制试验检测霍乱疫苗中LPS含量的方法较为准确和...; 陈翠萍董思国; 关键词：LPS; 文献传递

克罗诺杆菌IbpA蛋白的表达、纯化及其免疫原性: 2016年; 目的表达并纯化克罗诺杆菌Ibp A蛋白,检测其免疫原性。方法提取克罗诺杆菌菌株CMCC45402的基因组,经PCR获得ibp A基因片段,连接至表达载体p ET30a(+),构建重组质粒p ET30a(+)-ibp A。将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)菌株,用不同终浓度的IPTG(0.1、0.2、0.5、0.8、1.0 mmol/L)分别于30和37℃诱导表达不同时间(2.5、4、5 h),进行SDS-PAGE及Western blot分析。表达产物经Ni凝胶亲和层析纯化后,经腹腔免疫BALB/c小鼠,每2周加强免疫1次,共2次,末次免疫1周后,经小鼠眼球采血,分离血清,ELISA法检测血清效价。同时检测热激对Ibp A蛋白表达水平的影响。结果重组质粒p ET30a(+)-ibp A经双酶切鉴定证明构建正确。最佳IPTG诱导终浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为30℃,最佳诱导时间为5 h。诱导表达产物相对分子质量约24 000,主要以可溶性形式存在,可与抗His-Tag单克隆抗体特异性结合;纯化蛋白的纯度可达96%;小鼠免疫血清效价均可达1:25 000以上。用小鼠血清可检测到热激后克罗诺杆菌Ibp A的表达。结论本实验成功构建了ibp A基因的高效原核表达系统,获得了高纯度重组蛋白,制备了高效价抗血清,为后续ibp A基因和克罗诺杆菌热抗性关系的研究奠定了基础。; 赵志晶梁昊宇董思国田万红王斌曾明; 关键词：A蛋白原核表达纯化免疫原性

1株枯草芽胞杆菌体外拮抗6种肠道致病菌的研究被引量：27: 2005年; 目的研究枯草杆菌BS3株对大肠埃希菌等6种肠道致病菌的拮抗作用。方法通过在体外BS3菌株分别与大肠埃希菌等6种致病菌混合培养后,观察不同时间内各菌的菌量变化。结果BS3菌株与6种肠道致病菌混合培养24、48、72和96h,其菌量逐渐增加;6种致病菌的菌量随着培养时间延续逐渐减少,其中产毒性大肠埃希菌、致病性大肠埃希菌和宋内志贺菌与对照组比较差异更明显。结论BS3菌株在培养生长过程中,可抑制大肠埃希菌等6种肠道致病菌的生长。; 陈天游董思国袁佩娜曾明; 关键词：肠道致病菌致病性大肠埃希菌枯草芽胞杆菌拮抗宋内志贺菌 BS

O139型霍乱菌苗人群副反应观察报告被引量：2: 1997年; 在广西田阳县中学生中，分６组共６９７人进行了Ｏ１３９型霍乱菌苗与Ｏ１群霍乱菌苗的双盲、有对照的人体反应现场观察。结果表明，不加铝佐剂的Ｏ１３９型霍乱菌苗及Ｏ１群霍乱菌苗，不论是低剂量组（两剂全程接种４５亿菌体）抑或常剂量组（全程接种９０亿）接种人群均可产生１０～２５％的体温呈轻度升高的弱反应，并且同种菌苗的两剂量组的反应率无显著差异；第一剂接种的反应率（１９～２５％）较第二剂接种的（１０～１５％）高，Ｐ＜０．０５；接种局部反应轻微，只有个别受试者出现直径小于１５ｍｍ的硬结；加佐剂的Ｏ１群吸附霍乱菌苗的反应较其它组强。结果证实，甲醛灭活的Ｏ１３９型霍乱菌苗和Ｏ１群霍乱菌苗是安全的。; 蒋仁生宁一文黄科良杨进业凌文武苏光湛李少北黄健强袁佩娜董思国吴建平罗建辉王秉瑞江丽君王燕陈锦荣; 关键词：霍乱霍乱菌苗安全性副反应

霍乱疫苗效力试验替代方法的研究: 2005年; 目的研究霍乱疫苗效力试验的替代方法。方法以不同剂量霍乱疫苗免疫小鼠,用间接ELISA方法检测小鼠全血的抗菌、抗毒抗体滴度,小鼠毒菌攻击法计算保护率。结果抗毒、抗菌抗体水平与免疫剂量和攻毒后的动物保护率成正相关,结果稳定。结论可以通过检测高免疫剂量组实验动物的抗菌、抗毒抗体替代以往小鼠攻毒法的效力试验。; 董思国陈翠萍王斌曾明; 关键词：霍乱疫苗保护率效力试验

对称分裂过程中的枯草芽孢杆菌超微结构观察: 2015年; 本研究找到适合枯草芽孢杆菌透射电镜样品制备方法,并通过透射电镜观察了枯草芽孢杆菌对称分裂过程中的形态变化。实验结果显示:在对称分裂时,枯草芽孢杆菌细胞膜首先在细胞中间的两侧形成凹陷;随后,凹陷逐渐加深,并在细胞中间形成一个完整隔膜;之后,细胞壁在隔膜附近形成,胞质分裂完成。; 喻钢田万红王斌董思国曾明; 关键词：枯草芽孢杆菌超微结构

口服双歧杆菌、酪酸梭菌活菌制剂(肠康平)的药效作用被引量：4: 2001年; 目的研究口服双歧杆菌、酪酸梭菌活菌制剂（肠康平）调整肠道菌群的药效作用。方法利用氨苄青霉素引起ＳＰＦ－ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肠道菌群失调腹泻作为模型，口服肠康平与同类单价制剂，比较其药效作用。结果肠康平对小鼠肠道菌群失调腹泻具有治疗作用，高剂量组的治疗效果优于低剂量组，肠康平制剂缓解ＳＰＦ－ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肠道菌群失调后腹泻的时间较单价制剂略快。结论肠康平是治疗肠道菌群失调腹泻的有效制剂。; 田万红董思国袁佩娜傅思武吕存女邹开勇祁欣孟筱琦; 关键词：双歧杆菌肠道菌群药效作用

甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体的制备及其初步应用: 2017年; 目的制备甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体,并对其进行鉴定及初步应用。方法用甲醛灭活的甲型副伤寒沙门菌免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出稳定分泌甲型副伤寒沙门菌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对克隆纯化后的阳性细胞扩大培养后,免疫BALB/c小鼠,收获腹水,间接ELISA法检测抗体效价,并进行Ig类和亚类鉴定;腹水经辛酸-硫酸铵盐析法纯化后,采用间接ELISA法、玻片凝集试验、SDSPAGE法、免疫扩散试验进行检测。将纯化后的2株单克隆抗体用于双抗体夹心ELISA法的建立,并用自制配对抗体检测甲型副伤寒患者血浆、乙型副伤寒患者血浆、伤寒患者血浆和正常人血浆。结果共筛选出2株持续分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H4和2A9,腹水抗体效价为1∶10~7和1∶10~6,分别为IgG_1和Ig G_3亚类,轻链均为κ型。纯化后的单克隆抗体1H4、2A9效价分别为1∶10~7和1∶10~3,1H4纯度大于85%,2A9纯度小于60%。2株单克隆抗体与甲型副伤寒沙门菌50503、50973可产生凝集反应,与伤寒沙门菌50096不产生反应;1H4在稀释度为1∶8时可与甲型副伤寒沙门菌菌体特异多糖(organism specific polysaccharide,OSP)产生凝集反应,而2A9在每个稀释度与OSP均不发生反应。将1H4和2A9用于双抗体夹心ELISA检测法建立,确定1H4/HRP-2A9的组合为最佳配对,用该配对抗体检测阳性样本检出率为100%,正常人血浆样本检出率为0。结论获得2株甲型副伤寒沙门菌菌体抗原单克隆抗体,可用于甲型副伤寒沙门菌的快速鉴定。; 梁昊宇董思国曾明王斌; 关键词：甲型副伤寒沙门菌单克隆抗体脾细胞

预防O139霍乱B亚单位/全菌体口服疫苗的研究被引量：6: 2002年; 目的研制预防O139霍乱的B亚单位／全菌体口服疫苗。方法应用重组霍乱毒素B亚单位及福尔马林灭活的O139霍乱弧菌全菌体，构建成B亚单位／全菌体疫苗，并进行安全性及免疫原性检测。结果经连续3天大剂量灌喂小鼠后，未见体重下降、发病或死亡现象。全部小鼠均健康活存。以腹腔或口服免疫小鼠后，均能产生外周血或肠道局部高滴度的特异抗体。免疫小鼠对O139活菌攻击有良好的保护作用。结论B亚单位／全菌体口服疫苗在小鼠试验中安全性及免疫原性良好。; 刘传暄马清钧张艳红方宏清于秀琴李生迪张萍陈志宏王秉瑞袁佩娜贾丽君董思国陈天游; 关键词：O139霍乱免疫原性

口服双歧杆菌、酪酸梭菌活菌制剂药效作用研究被引量：1: 2000年; 利用氨苄青霉素引起SPF BALB/C小鼠肠道菌群失调腹泻作为模型 ,观察肠康平制剂调整肠道菌群的药效作用 ,并与其它同类单价制剂比较 ,结果显示肠康平制剂对该SPF BALB/C小鼠肠道菌群失调腹泻具有治疗作用 ,高剂量组 (10 6CFU/次 )的治疗效果优于低剂量组 (10 4 CFU/次 ) ;肠康平制剂缓解SPF BALB/C小鼠肠道菌群失调后腹泻症状的时间较单价制剂略快。; 田万红董思国袁佩娜傅思武吕存女邹开勇邝欣孟筱琦; 关键词：双歧杆菌酪酸梭菌药效作用腹泻

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