张晓伟
- 作品数:26 被引量:41H指数:5
- 供职机构:北京大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理文化科学更多>>
- 端粒酶与肿瘤关系的研究进展被引量:5
- 2001年
- 李贺张晓伟张宗玉
- 关键词:端粒酶肿瘤肿瘤治疗
- 端粒酶反义腺病毒载体对乳腺癌细胞MCF-7端粒酶的抑制作用被引量:10
- 2000年
- 目的 研究端粒酶RNA的反义对人乳腺癌细胞系MCF 7细胞端料酶活性的影响。方法 用重组腺病毒转移并表达端粒酶RNA的反义cDNA ,采用基因重组、脂质体共转染法获得端粒酶反义重组病毒 ,用Southern杂交鉴定病毒的整合功能 ,用TRAP 银染法检测端粒酶活性。结果 MCF 7细胞是恶性乳腺癌的典型细胞系。与对照组MCF 7、MCF 7 vAd AAV细胞相比 ,反义病毒感染后的MCF 7 vAdT AAV细胞的端粒酶活性明显降低 ,只扩增出小片段的寡聚核苷酸。结论 端粒酶RNA的反义cDNA的导入 。
- 张晓伟童坦君
- 关键词:乳腺癌端粒端粒酶MCF-7基因抑制
- 绿色荧光蛋白cDNA在腺病毒重组载体转染中的应用被引量:6
- 1998年
- 绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因是目前发现的唯一能在细胞内表达,且不需要其他外源底物参与的全新报告基因.将GFPcDNA与腺病毒载体pAdE1CMV重组,以lipofectin转染293细胞(一种人胚肾细胞),观察其在真核细胞内的表达情况,为转基因技术提供了新的监测方法.
- 张晓伟王福山童坦君
- 关键词:绿色荧光蛋白报告基因腺病毒
- 整合型腺病毒载体的构建及端粒酶反义cDNA对乳腺癌细胞恶性表型的影响
- 病毒载体因其能高效转导目的基因而被认为是最有尖用前景的载体系统.研究小组构建的整合型腺病毒载体pAdE<,1>CMVITREXneo,集腺病毒及腺病毒相关病毒的优点,克服二者的缺点,具有转导效率高,稳定整合,高效表达外源...
- 张晓伟
- 关键词:端粒酶细胞恶性表型腺病毒载体
- 定点整合型基因治疗腺病毒载体的构建被引量:5
- 1997年
- 目的:构建定点整合型基因治疗腺病毒载体。方法:以逐步亚克隆法将腺病毒伴随病毒的两个末端倒转重复序列与neo基因表达盒克隆至pAdE1CMV,其中HCMV启动子控制下的neo基因表达盒位于腺病毒伴随病毒两个末端倒转重复序列之间,将得到的转移载体pAdE1CMVITREXneoDNA和pJM17DNA以脂质体法共转染293细胞,G418法连续筛选重组腺病毒。以病毒核酸酶切及感染293细胞的CPE(cytopathiceffect )观察鉴定是否获得重组腺病毒。结果:获得有腺病毒伴随病毒的两个末端倒转重复序列和位于其间的neo基因表达盒的重组腺病毒vAd-AAV。结论:重组腺病毒vAd-AAV的构建成功将为基因治疗提供定点整合型腺病毒载体。
- 王福山张晓伟童坦君
- 关键词:腺病毒基因疗法
- 慢病毒载体pITA-HBP1的制备及感染效率的测定
- 2010年
- 慢病毒载体是目前基因治疗中研究较多的载体,与通常使用的逆转录病毒载体和腺病毒载体比较,它有感染非分裂期细胞及容纳大片段外源性目的基因等优点.本文应用基因重组的方法,构建了1种新型的慢病毒载体,并将转录因子HBP1基因插入到这一载体上,成为pITA-HBP1.检测其在人的肿瘤细胞和正常细胞中的转染效率,发现转染效率明显增加,Western印迹证实外源基因得到高效表达.这一结果,对今后实验室提高基因的转染效率、表达水平,以及研究基因的表达调控,都提供了重要的技术方案.
- 陈月萍杜毅聪董威王维斌张晓伟
- 关键词:慢病毒载体
- P300/CBP介导的转录因子HBP1乙酰化调控p16基因表达
- 目的:确定在细胞增殖和分化过程中重要的转录因子HBP1调控细胞衰老的分子机制。HBP1是一种序列特异的转录因子。在细胞增殖和分化过程中,HBP1可以激活或抑制某些特定基因的表达。我们之前的研究结果证实HBP1与p16 p...
- 王维斌徐芳张晓伟
- 关键词:P300/CBP转录因子乙酰化细胞衰老
- 文献传递
- HMG盒转录因子1(HBP1)参与H_2O_2诱导的细胞衰老过程被引量:2
- 2012年
- 为探讨HMG盒转录因子1(HBP1)在过氧化氢(H2O2)诱导的细胞衰老中所起的作用,通过慢病毒感染得到稳定表达HBP1的MDA-MB-231细胞,以H2O2处理细胞.采用Western免疫印迹杂交试验和实时PCR检测HBP1、p16和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达水平的变化.用荧光免疫试验检测H2O2对HBP1表达的影响,以及HBP1在H2O2的诱导下对于p16和细胞周期蛋白D1启动子的影响.用细胞增殖试验检测H2O2对于细胞增殖的影响.用基因敲减实验和衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测在H2O2诱导的细胞衰老中HBP1所起的作用.Western和免疫荧光实验结果显示,细胞经H2O2处理后,HBP1表达增高的同时促进了p16的表达,降低了细胞周期蛋白D1的表达.细胞增殖实验结果显示,H2O2显著抑制了细胞的增殖.基因敲减实验和SA-β-Gal染色实验说明,H2O2可诱导HBP1表达正常的MDA-MB-231细胞衰老,而HBP1的敲减则抑制了H2O2诱导的细胞衰老过程.本研究结果提示,在H2O2诱导的衰老中,HBP1的表达显著增加,并通过促进衰老相关基因p16的表达和抑制生长因子cyclinD1的表达来阻碍细胞增殖,促进细胞衰老.HBP1在H2O2诱导的细胞衰老过程中起着重要作用,H2O2诱导的细胞衰老必须在HBP1存在的情况下才能发生.
- 姜彬张晓伟
- 关键词:P16细胞周期蛋白D1衰老过氧化氢处理
- 一种基于升华法的转移石墨烯的方法
- 本发明公开了一种转移石墨烯的方法。该方法利用易升华的物质作为转移石墨烯的支撑层,首先通过加热易升华物质,使其在生长于初始基体上的石墨烯表面凝华形成致密支撑层,然后去除初始基体并将石墨烯/支撑层转移至目标衬底,再将支撑层升...
- 邓玉豪王逸伦张晓伟戴伦马仁敏
- 文献传递
- 一种基于升华法的转移石墨烯的方法
- 本发明公开了一种转移石墨烯的方法。该方法利用易升华的物质作为转移石墨烯的支撑层,首先通过加热易升华物质,使其在生长于初始基体上的石墨烯表面凝华形成致密支撑层,然后去除初始基体并将石墨烯/支撑层转移至目标衬底,再将支撑层升...
- 邓玉豪王逸伦张晓伟戴伦马仁敏
- 文献传递