史茜
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区科技支疆项目新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 阿魏菇粗多糖体外脾细胞调节功能及体内疫苗佐剂功能的研究被引量：1
- 2022年
- 为研究阿魏菇粗多糖(PFCP)体外对小鼠脾细胞增殖的作用和体内对口蹄疫灭活疫苗的佐剂功能,MTT法检测PFCP最大无毒浓度,PFCP与Con A、LPS联用刺激小鼠脾细胞增殖的能力,ELISA检测细胞培养上清中IL-4与IFN-γ含量。PFCP联合口蹄疫病毒灭活抗原皮下注射免疫接种小鼠,ELISA检测IgG生成情况,流式细胞术分析免疫后小鼠脾脏T淋巴细胞亚群比例。结果显示,PFCP安全性好,体外可协同ConA与LPS促进小鼠脾细胞的增殖,增加IL-4与IFN-γ的分泌量。体内可增强口蹄疫病毒特异性IgG的水平,增加CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量。表明PFCP对小鼠脾细胞增殖具有较好的促进作用,且具有作为口蹄疫灭活疫苗佐剂的潜力。
- 史茜胡都斯·艾尔肯龙志新王科珂蒋刚强史向向张富春
- 关键词：阿魏菇多糖脾细胞口蹄疫佐剂
- 多糖作为兽用疫苗佐剂作用机制的研究进展被引量：5
- 2022年
- 多糖可促进免疫调节,具有多靶点、多功能和多因子效应,因此可广泛用作兽用疫苗免疫佐剂。多糖作为疫苗佐剂可提高免疫动物脾脏、胸腺和法氏囊等免疫器官指数,增强巨噬细胞吞噬活性及抗原递呈能力,增强NK细胞杀伤能力,促进树突细胞的成熟和分化,增强机体对抗原的摄取能力,影响T细胞亚群的种类和数量,改变Th1、Th2型免疫应答反应的类型,促进B淋巴细胞增殖,刺激细胞因子及抗体的产生等。而多糖作为配体通过与Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)、C型凝集素受体(C-type lectins receptor,CLR)、清道夫受体(scavenger receptor,SR)等受体分子结合,激活下游信号通路,进而发挥上述免疫活性。文章主要从上述几方面对多糖作为兽用疫苗佐剂的作用机制进行阐述,以期为多糖的进一步开发和应用提供参考。
- 史茜徐新峰李学文肖媛媛白梅花张富春
- 关键词：多糖佐剂受体免疫
- HPV-16 E1蛋白的表达、纯化及其抗体制备被引量：3
- 2011年
- 目的:在原核细胞中表达、纯化人乳头状瘤病毒16型(HPV-16)E1蛋白并制备HPV-16 E1特异性抗体。方法:PCR扩增HPV-16 E1基因,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度与IPTG浓度优化HPV-16 E1蛋白可溶性表达的条件,并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下及足垫免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果:酶切和测序结果表明HPV-16 E1基因已克隆入pMAL-p2x。经优化筛选出HPV-16 E1融合蛋白诱导表达的最佳条件为28℃,IPTG浓度0.5 mmol/L。经麦芽糖亲和层析法纯化获得了HPV-16 E1可溶蛋白,纯度达到95.7%。West-ern blot检测证明制备的抗血清能与HPV-16 E1蛋白特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1∶640 000以上。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得了HPV-16 E1蛋白,该蛋白免疫新西兰白兔制备了高效价的HPV-16 E1蛋白抗血清,为HPV-16 E1功能研究提供了抗原和检测用抗体。
- 史茜侯向前郭景霞朱慧马正海
- 关键词：HPV-16E1基因原核表达纯化抗体
- 4种口蹄疫非结构蛋白抗体检测试剂盒的质量评估
- 2018年
- 为了对4种检测牛口蹄疫非结构蛋白抗体商品化ELISA检测试剂盒进行质量评估,试验采用4种试剂盒分别对非免疫无口蹄疫区、免疫无口蹄疫区、免疫健康、免疫感染和非免疫人工感染的5类不同类型牛血清样本进行检测,对试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、分析敏感性、分析特异性及重复性进行分析。结果表明：4种试剂盒的诊断敏感性为87.9%-100%,诊断特异性为81.8%-100%。经ROC曲线分析,曲线下面积（AUC）值为0.996-1.000。分析敏感性和分析特异性较好,与其他阳性血清不发生交叉反应。试剂盒的批内变异系数为（5.296±1.745）%-（21.653±3.789）%;批间变异系数为（13.436±13.663）%-（21.729±3.404）%。与酶联免疫电转移吸附试验（EITB）比较,Kappa值显示除试剂盒D为中度符合外,其余试剂盒均高度符合。综合分析试剂盒A诊断敏感性、分析敏感性、分析特异性、诊断特异性和重复性均较好,试剂盒B与试剂盒C的诊断特异性和诊断敏感性较好。
- 史茜徐新峰陈瑞花王科珂卢曾军卢曾军张富春
- 关键词：口蹄疫ELISA试剂盒ROC曲线
- 采用报告基因检测HSV-1潜伏相关启动子在神经细胞的特异性激活
- 2011年
- 1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)潜伏相关转录本启动子(latencyassociated transcripts promoter,LATP)在病毒于神经组织中潜伏感染期间保持活性.本研究利用PCR技术扩增获得HSV-1的LATP,并将LATP分别插入增强型绿色荧光蛋白(enhanced greenfluorescent protein,EGFP)基因和荧光素酶基因前,获得真核表达质粒pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc.pcDNA/LATP/EGFP转染293T细胞后,检测到绿色荧光蛋白基因的表达,表明LATP具有启动子活性,其活性低于PCMV.继而以pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc分别转染HeLa细胞、Eca109细胞、U251细胞和SK-N-SH细胞.结果表明,绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因在U251和SK-N-SH两种神经细胞中表达水平极显著(P<0.01),高于其在HeLa和Eca109两种非神经细胞中的表达.说明LATP能够驱动基因在神经组织细胞中高效表达,可作为神经组织特异性表达元件.
- 郭景霞李永鑫朱慧史茜张彩荣朱红娟马正海
- 关键词：1型单纯疱疹病毒启动子神经组织
- HPV-16 URR突变对病毒早期启动子活性影响的研究
- 2017年
- 背景与目的:新疆是宫颈癌高发区,该地区宫颈癌高发与人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus type 16,HPV-16)感染密切相关。该研究旨在分析新疆地区妇女宫颈病样组织中HPV-16上游调控区(upstream regulatory region,URR)的突变及其功能。方法:以新疆妇女子宫颈上皮非典型增生(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌病样组织标本DNA为模板,PCR扩增HPV-16 URR片段,PCR产物经测序比对,筛选代表性的URR突变体构建至p GL3-Basic载体,将其转染Vero细胞,48 h后检测荧光素酶活性,分析URR突变体启动子活性。结果:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得了55个HPV-16 URR DNA片段,测序及序列分析发现44个突变位点,其中nt7192(G→T)、nt7433(-→T)、nt7435(C→G)和nt7863(A→-)4个位点的突变为所有序列共有,nt7520(G→A)位点的突变存在于54个样品中,剩余39个位点的突变存在于不同样品中。根据突变的位置、频率和程度,筛选出9个URR突变体分别克隆至p GL3-Basic中荧光素酶基因前并转染Vero细胞。荧光素酶活性分析表明,不同URR突变体的启动子活性差异较大,来源于宫颈癌的URR突变体启动子活性显著高于来源于CIN的URR突变体(P<0.01),部分宫颈癌URR突变体的启动子活性显著高于Si Ha和Caski细胞来源的URR参照序列的启动子活性。结论:新疆地区分离的HPV-16URR发生多位点突变,其中部分突变增强了URR内部启动子的活性,导致HPV-16致癌活性增强。
- 宋丹史茜侯向前玛依努尔.尼亚孜马正海
- 关键词：人乳头瘤病毒16型上游调控区突变启动子
- 新疆妇女宫颈癌组织中HPV-16 E1/dup突变体分布的研究被引量：1
- 2012年
- 目的检测HPV-16 1311～1773位63bp重复序列插入突变的E1基因(E1/dup)在宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌病变组织中的分布及病毒的整合状态,探讨该突变对病毒致癌活性的影响.方法收集维吾尔族和汉族宫颈炎、CIN和宫颈癌临床组织标本215例,提取组织DNA,PCR检测E1/dup突变体以及病毒E1/E2基因的完整性.结果新疆地区215例宫颈病变组织中HPV-16 E1检出率为60.00%(129/215),宫颈炎、CIN及宫颈癌病样中HPV-16 E1的检出率分别为31.15%(19/61)、49.21%(31/63)和86.81%(79/91).在HPV-16E1阳性病样中,HPV-16 E1/dup突变率为37.21%(48/129),宫颈炎、CIN和宫颈癌病样中E1/dup突变率分别为15.79%、22.58%和48.10%,E1/dup突变率在宫颈癌中显著高于宫颈炎(P<0.05)和CIN(P<0.05).E1/dup突变率在汉族和维吾尔族宫颈癌病样中分别为40.00%(6/15)和50.00%(32/64),两者无显著性差异(P>0.05).在HPV-16 E1阳性病样中病毒整合率为51.72%(60/116),E1/dup突变病样中HPV16整合率[69.05%(29/42)]明显高于未发生E1/dup突变的病样[41.89%(31/74)](P<0.05).结论新疆地区E1/dup突变率在宫颈癌中显著高于宫颈炎及CIN,E1/dup与病毒致癌活性及病毒整合相关.
- 侯向前史茜朱开春玛依努尔.尼亚孜马正海
- 关键词：HPV-16宫颈癌E1
- 新疆地区宫颈癌和CIN患者HPV-16感染和血清中HPV-16L1抗体的检测及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)患者血清中HPV-16 L1抗体水平及其与HPV-16感染的关系。方法收集宫颈癌患者51例和CIN(包括CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)患者44例。取患者宫颈病变组织并提取组织DNA,PCR检测HPV-16 DNA。同时取患者血样,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清样品中HPV-16 L1抗体。结果宫颈癌组中HPV-16DNA的阳性率为82.4%,CIN组为52.3%。宫颈癌组血清HPV-16 L1抗体阳性率为70.6%,CIN组为79.5%。宫颈癌组中HPV-16 DNA阳性而HPV-16 L1抗体阴性的比例为27.5%,显著高于CIN组的9.1%(P<0.05);宫颈癌组HPV-16 DNA阴性而HPV-16L1抗体阳性的比例为15.7%,显著低于CIN组的36.4%(P<0.05)。宫颈癌组HPV-16 DNA和患者HPV-16 L1抗体均阳性的重合率为54.9%,CIN组为43.2%。结论 CIN和宫颈癌患者HPV-16 L1抗体的产生与HPV-16 DNA的检出率相关,血清中HPV-16 L1抗体可作为宫颈癌和CIN病程的辅助诊断指标。
- 阿尼克孜·阿不都艾尼马正海史茜候向前玛依努尔·尼牙孜朱开春
- 关键词：人乳头状瘤病毒宫颈癌
