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BSA系统ELISA检测前列腺特异抗原方法的建立被引量：4: 2000年; 张继成黄俊全家妩张兴德; 关键词：前列腺特异抗原前列腺癌 ELISA

反义RNA抑制synaptotagminⅡ在RBL-2H3的表达及对胞吐的作用: 2006年; 目的:研究Synaptotagm inⅡ(简称Syt2)在RBL-2H3(简称RBL)中的表达及其在胞吐中的作用。方法:通过W estern b lot检测Syt2在RBL中的表达情况。用高保真酶扩增Syt2,与pEGFP-N1构建全长反义基因表达载体,电穿孔转染RBL,G418筛选获得稳定转染细胞。通过钙离子载体和抗原刺激,应用W estern b lot检测稳定转染细胞和对照细胞分泌的组织蛋白酶D,分析Syt2对胞吐的影响。结果:在RBL中检测到Syt2表达。构建了pEGFP-N1-Syt2-AS质粒,插入片段测序结果与GenBank登录号NM012665(rat Syt2)序列完全一致。经转染和G418筛选,获得了稳定转染细胞RBL-Syt2-AS,W estern b lot结果显示,两株RBL-Syt2-AS表达的Syt2均明显减少,分别只有对照的8%和10%。经刺激后,RBL-Syt2-AS分泌的组织蛋白酶D较对照明显增加。结论:Syt在RBL中表达,其对RBL溶酶体胞吐起负调控作用。; 张继成吕文利胡俊华吴健民; 关键词：钙结合蛋白溶酶体胞吐

Tim-3启动子区基因多态性与类风湿关节炎之间关系的研究被引量：12: 2005年; 目的分析湖北省汉族成人T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-3(Tim-3)启动子区-1541C>T和-574G>T单核苷酸多态性(SNP),探讨其与类风湿关节炎(RA)易感性之间的关系。方法分别采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)检测湖北省115例RA患者和100名健康者Tim-3启动子区-1541C>T和-574G>T的SNP,计算基因型和等位基因频率。结果①湖北省健康人群Tim-3启动子区-1541位C/C、C/T和T/T基因型频率分别是0.960、0.040和0,而RA患者其频率分别为0.948、0.052、0,其基因型和等位基因频率均与对照组差异无统计学意义(P>0.05);②湖北省健康人群Tim-3启动子区-574位G/G、G/T和T/T基因型频率分别是0.990、0.010和0,而RA患者频率分别为0.974、0.026、0,其基因型和等位基因频率均与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论湖北汉族人群Tim-3启动子区-1541和-574位存在单核苷酸多态性变异,但这两位点的变异与该地区汉族成人RA易感性无关。; 张才成吴健民崔天盆张继成王平; 关键词：基因多态性类风湿关节炎基因型等位基因

糖皮质激素对于活化RBL-2H3表达IL-5的影响: 2005年; 目的:探讨糖皮质激素对于活化RBL-2H3(简称RBL)表达白细胞介素5(IL-5)的影响。方法:利用抗原和钙离子载体A23187分别激活RBL表达IL-5,通过总RNA提取、逆转录和半定量PCR研究加入糖皮质激素后对于RBL活化表达IL-5的影响。结果:经A23187活化的RBL,加入10-7mol/L地塞米松后,其IL-5表达量降低到对照的9%,加入10-6mol/L氢化可的松后,其IL-5表达量降低到对照的8.5%。经抗原活化的RBL,加入10-6mol/L地塞米松后,其IL-5表达量降低到对照的12%,加入10-6mol/L氢化可的松后,其IL-5表达量降低到对照的9%。结论:糖皮质激素对于活化RBL表达IL-5具有极大的抑制作用,提示糖皮质激素在临床上治疗哮喘的作用与其抑制肥大细胞表达IL-5存在一定关系。; 张继成吕文利高贵民吴健民张才成; 关键词：白细胞介素5 RBL-2H3 糖皮质激素 IL-5 活化表达钙离子载体A23187

NOS1基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的关系被引量：3: 2005年; 目的　研究一氧化氮合成酶结构式基因 (NOS1)第 2 9外显子翻译终止位点下游 2 76 bp处 C/ T(C5 2 6 6 T)位点多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性及血浆 Ig E水平的关系。方法　用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR- RFL P)方法对湖北汉族 134例变应性哮喘患者 (哮喘组 )及 90例无血缘关系的汉族健康人(对照组 )进行 NOS1基因 C5 2 6 6 T位点多态性分析 ,用免疫发光法测定血浆总 Ig E水平。结果　哮喘组 NOS1基因 C5 2 6 6 T位点 TT基因型频率与对照组相比差异显著 (P=0 .0 0 9) ,T等位基因频率与对照组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。哮喘组 TT基因型者血浆总 Ig E显著高于 CC和 CT基因型者 (P<0 .0 5 )。结论　 NOS1基因C5 2 6 6 T位点 TT基因型与湖北汉族人哮喘易感性和高血浆总 Ig E水平均相关。; 胡俊华吴健民崔天盆李一荣张继成; 关键词：变应性哮喘易感性血浆总IGE 基因多态性等位基因频率

病毒诱导机体产生细胞因子及其信号转导的研究进展被引量：1: 2004年; 病毒感染后,可诱导机体产生许多细胞因子,这些细胞因子在宿主抗病毒反应及病毒感染引起的免疫病理中起着非常重要的作用.有关病毒感染诱导机体产生细胞因子及其信号转导的研究取得了很大的进展,为开发抗病毒新药开辟了新途径.本文介绍了病毒诱导机体产生细胞因子的病毒成分及其主要信号转导途径.; 张继成吕文利吴健民; 关键词：细胞因子信号转导病毒诱导免疫病理抗病毒新药

Synaptotagmin Ⅱ在RBL-2H3细胞系表达及在胞吐中的作用研究: 2005年; 研究SynaptotagminII(简称Syt2)在大鼠嗜碱性白血病细胞(RBL-2H3,简称RBL)中的表达、分布及其在胞吐中的作用。通过Westernblot检测Syt2在RBL中的表达情况。用高保真酶扩增Syt2,构建pEGFP-N1-Syt2表达质粒,电穿孔转染RBL,G418筛选获得稳定表达Syt2-EGFP的细胞。通过钙离子载体和抗原刺激,应用Westernblot检测稳定转染细胞和对照细胞分泌的组织蛋白酶D,分析Syt2对胞吐的影响。结果显示,在RBL中检测到Syt2表达。构建了pEGFP-N1-Syt2质粒,插入片段测序结果与GenBank登录号NM012665(ratSyt2)序列完全一致。经转染和G418筛选,获得了稳定表达细胞RBL-Syt2-S,经刺激后,其分泌的组织蛋白酶D较对照明显减少。证实Syt2主要分布在RBL的质膜,在胞浆中表达较少,Syt2对于RBL溶酶体胞吐起负调控作用。; 张继成吴健民吕文利崔天盆; 关键词：钙结合蛋白嗜碱性粒细胞基因表达溶酶体胞吐

SynaptotagminⅡ在大鼠嗜碱性白血病细胞胞吐中的调节作用研究: 2005年; 目的研究SynaptotagminⅡ(简称Syt2)在RBL2H3(简称RBL)胞吐中的作用。方法利用钙离子载体和抗原分别刺激Syt2+和Syt2(分别为Syt2过表达和表达减弱的RBL),诱导其活化而分泌,检测分泌的β氨基已糖苷酶、组织蛋白酶D和5羟色胺,分析Syt2对于细胞分泌的影响。结果与对照相比,Syt2+分泌的β氨基已糖苷酶无明显区别,而Syt2分泌的β氨基已糖苷酶增加达3.5倍,结果说明Syt2的过表达对β氨基已糖苷酶分泌无影响,而Syt2表达减弱却促进β氨基已糖苷酶的分泌。与对照相比,Syt2+分泌的组织蛋白酶D减少近一半,而Syt2分泌的组织蛋白酶D增加近1倍,说明Syt2的表达量与组织蛋白酶D分泌量成负相关关系。与对照相比,Syt2+分泌的5羟色胺无明显差别,而Syt2分泌的5羟色胺有少量增加,说明Syt2的表达量对于5羟色胺分泌有轻微影响。结论Syt2主要对于RBL溶酶体胞吐起负调控作用。; 张继成吴健民吕文利李一荣; 关键词：SYNAPTOTAGMIN 组织蛋白酶D 5-羟色胺

银杏叶提取物对双酚A活化RBL-2H3细胞株表达IL-4和TNF-α的影响被引量：7: 2013年; 探讨银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)对于双酚A(Bisphenol A,BPA)活化RBL-2H3(简称:RBL)表达IL-4和TNF-α的影响。利用BPA激活RBL,通过测定β-氨基已糖苷酶和RT-PCR,研究EGB对于活化RBL脱颗粒以及表达IL-4和TNF-α的影响。结果显示,经BPA活化的RBL,加入EGB(浓度为160μg/ml)后,其β-氨基已糖苷酶释放仅为对照的45%,其IL-4mRNA表达量降低到对照的33.5%,TNF-αmRNA表达量降低到对照的26.8%。结果说明EGB极大地抑制了活化RBL的脱颗粒,同时对于活化RBL表达IL-4和TNF-α也具有极大的抑制作用,提示EGB治疗哮喘的作用与其抑制肥大细胞表达IL-4和TNF-α有关。; 张继成吕文利; 关键词：银杏叶提取物肥大细胞

银杏叶提取物对于BPA活化RBL-2H3分泌IL-13的影响被引量：2: 2013年; 目的:探讨银杏叶提取物(Extract of Ginkgo biloba,以下简称EGB)对于BPA(Bisphenol A,双酚A)活化RBL-2H3(简称RBL)分泌白细胞介素13(IL-13)和蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法:利用BPA激活RBL,通过测定β-氨基己糖苷酶了解活化RBL脱颗粒情况,利用ELISA测定IL-13,Western blot检测RBL胞膜与胞浆PKC比值了解PKC活化情况。结果:经BPA活化后,RBL释放的β-氨基己糖苷酶上升到41.6%,IL-13分泌量上升到95.4 pg/ml,加入EGB(浓度为160μg/ml)后,RBL释放的β-氨基己糖苷酶降低到18.7%,分泌的IL-13降低到45.3 pg/ml,同时PKC活化也受到了明显的抑制。结论:EGB通过抑制RBL细胞的PKC活化,进而抑制活化RBL脱颗粒和IL-13分泌,提示EGB治疗哮喘的作用可能与其抑制肥大细胞PKC活化和分泌IL-13有关。; 张继成吕文利; 关键词：银杏叶提取物白细胞介素13 蛋白激酶C

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张继成

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