李华
- 作品数:134 被引量:275H指数:7
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省重点新产品开发计划国家高技术研究发展计划云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 一株引起无菌性脑膜脑炎柯萨奇B组3型病毒的分离和VP1基因分析被引量:1
- 2011年
- 摘要目的对一株从无菌性脑膜脑炎患者中分离到的柯萨奇B组3型病毒(coxsackievirusB3,CVB3)分离株KMA103-09进行VP1区的基因特征分析。方法采用Hep-2、RD细胞对患者粪便标本进行病毒分离,肠道病毒组合血清进行鉴别,反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)扩增病毒目的片段,测序后进行VP1基因分析,用Mega4.1等软件分析处理。结果肠道病毒组合血清鉴别为柯萨奇病毒B组3型(Cox.B3),从病毒性脑膜脑炎患者粪便标本中,分离到CVB3,其VPl区的核苷酸长度为849bp,未发现核苷酸插入与丢失。与山东04433/SD/CHN/2004/CB3株、山东05280/SD/CHN/2005/CB3株及山东YZ127/SD/CHN/2005/CB3株氨基酸同源,与其余国内分离株同源性高于为99.29%,与国外毒株的同源性为95.41%-96.47%。在进化树上与AM06HZ/SD/CHN/2006/CB3株显示在同一个分支上。结论分离的肠道病毒为柯萨奇病毒B组3型(Cox.B3),分离株(KMA103—09)VP1区变异较小。
- 李华杨卉娟柯华昕陈俊英施海晶孙强明马绍辉
- 关键词:无菌性脑膜脑炎VP1基因
- EV-A71灭活疫苗长期稳定性考察及结果分析被引量:4
- 2017年
- 目的考察肠道病毒A组71型(EV-A71)灭活疫苗的长期稳定性。方法对中国医学科学院医学生物学研究所生产的,在2~8℃条件下保存54个月的Ⅲ期临床样品,进行全面检定以分析各质量指标的变化;用原倍疫苗样品以0、28d两剂腹腔免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行疫苗效力单位(EU)测定;用2倍系列稀释法稀释疫苗,取不同稀释度样品免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行半数有效量ED50测定。结果该样品在2~8℃保存54个月,所有指标均在质量标准的合格要求范围内,仅pH值7.4接近标准上限;抗原含量为180 U/ml,与原检测值相比,下降仅9.1%;半数有效量(ED50)为6.29U,与原检测结果4.90U保持了良好一致;疫苗初次免疫小鼠后28d抗体阳转率为100%,中和抗体效价为1∶16~1∶256,GMT值为1∶52,EU值为6.5;加强免疫后第7天,中和抗体效价为1∶1 024~1∶4 096,几何平均滴度GMT大幅度上升至1∶1 552.1,其EU值为194.0;疫苗样品稀释至45 U/ml的抗原量,仍能使免疫小鼠产生100%的抗体阳转,且GMT值达1∶27.9。结论 EV-A71灭活疫苗于2~8℃条件下保存54个月,其质量指标无明显变化。
- 何鑫谢天宏洪超李华宋霞罗芳宇王微岳磊杨婷熊增平谢忠平
- 关键词:疫苗免疫原性手足口病
- 一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用
- 本发明提供了一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用,本发明使用慢病毒技术,在非洲绿猴肾细胞(Vero)中过表达人KREMEN1基因,构建了稳定表达人源KREMEN1(hKREMEN1)受体的新型Vero...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰高微捷严敏
- 甲型肝炎减毒活疫苗的研究Ⅱ.实验性疫苗的研制被引量:6
- 1989年
- 用H_2M_(20)K_5(32℃)甲型肝炎减毒株在KMB_(17)人胚肺二倍体细胞上制备一批实验性甲型肝炎减毒活疫苗。经暂定的生物制品检定项目检测,疫苗内不含外源因子,感染性滴度为10^(6.5)TCID_50/ml,疫苗病毒为HAV。12只猕猴体内试验表明,疫苗接种后不引起具临床重要意义的肝炎指征,但可使全部猕猴产生抗HAV抗体。本批疫苗的安全性和免疫原性在猕猴体内得到证实,有必要在少量人群中作进一步试用观察。
- 董德祥毛江森陈统球练幼辉陈念良李靖柴少爱李华任丽萍黄海英谢汝英阳选祥余哲余佩华曹逸云
- 关键词:甲型肝炎疫苗减毒活疫苗
- 创新药OPH对心肌缺血—再灌注损伤的保护作用
- 2002年
- 范礼理李华等
- 关键词:心肌缺血再灌注损伤心血管系统药物
- 甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法的研究及应用被引量:10
- 2010年
- 目的建立甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法。方法用双抗体夹心ELISA法检测试剂对甲型肝炎灭活疫苗及效力试验参比进行检测,以检测OD值为反应指标,用生物检定双平行线法的基本原理进行统计分析,计算待检疫苗对应于效力参比品的相对效力(R值)。结果样品HAAg含量与检测OD值之间具有高度的相关性,R2≥0.97,适用于建立双平行线检定方法;通过对3批样品3人次检测结果分析,验证了所建立方法的可靠性,回归、偏离平行、二次曲线、反二次曲线4个指标全部通过了验证;用所建立的体外相对效力试验检测法对32批次甲肝灭活疫苗进行检测,结果与小鼠体内效力检测结果具有良好一致性,均能反映疫苗相对效力,两种方法检测相对效力(R值)之间无明显差别(t=1.0354,P=0.3045)。结论所建立的甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力试验是一种灵敏、特异、方便、快捷的效力测定方法,可应用于甲型肝炎灭活疫苗效力检测。
- 谢忠平龙润乡李华陈洪波宋霞黄铠洪超杨蓉白惠珠
- 关键词:甲型肝炎病毒甲型肝炎灭活疫苗效力抗原
- 肠道病毒71型抗原检测试剂参考品制备及标定被引量:7
- 2013年
- 目的制备一套EV71抗原检测试剂盒质量控制用参考品。方法用组织培养法制备的一组肠道病毒原液及EV71病毒液,制备成10份阴性参考品、10份阳性参考品、2份灵敏度参考品及1份精密度参考品;以上样品经多人次标定后确定最终结果。结果阴、阳性参考品各10份标定结果分别为10阴及10阳;2份灵敏度参考品标定结果分别为177.97U/mL和1966.86U/mL;精密度参考品平均CV值9.29%。参考品37℃保存5天及反复冻融6次对检测结果没有影响。结论制备的参考品经标定,并通过反复冻融、37℃热稳定性试验,检测结果稳定,可用于EV71抗原检测试剂的质量控制,保证抗原检测试剂检测结果的特异性、灵敏度及稳定性。
- 龙润乡李华杨蓉杨婷岳磊宋晓燕谢忠平
- 关键词:肠道病毒71型参考品
- 三价脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸质量分析被引量:1
- 2005年
- 目的对我国三价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)糖丸质量进行分析,掌握质量变化趋势。方法用统计学方法,对1997~2003年中国药品生物制品检定所抽检的229批OPV疫前检测数据进行整理分析,结果连续7年抽检229批的OPV疫苗三价混合平均滴度为6.10~6.781gCCID20/粒,Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型分别平均滴度分别为5.81~60481gCID50/粒、4.78~5.631gCCID50/粒、5.37~5.971gCCID50/粒。结论中国医学科学院医学等望学研享所生产的OPV疫苗糖丸质量是稳定的、可靠的,符合《中国生物制品规程》的质量标准要求。
- 谢忠平李华全文琦宋霞陈巍陆彩霞邹静如
- 关键词:脊髓灰质炎减毒活疫苗滴度
- 柯萨奇病毒A组16型多克隆抗体的制备及其在检定中的应用被引量:3
- 2017年
- 目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病变法进行中和抗体效价检测和对15株不同CV-A16毒株的中和效价检测,并用CV-A16-4V和CV-A16-10R两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗CV-A16血清中和抗体效价可达1∶2 048;该免疫血清对15株CV-A16不同毒株的几何平均滴度(genomic mean titer,GMT)为1∶3 118;完全中和7.5lgCCID50/ml CV-A16病毒所需的最低血清量为128U,当病毒量在4.0~7.0lgCCID50/ml时,完全中和所需的最低血清量为48U,当病毒量低于4.0lgCCID50/ml时,1U的血清即可完全中和本病毒。结论 CV-A16-K168株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价呈负相关。
- 谢天宏杨婷宋霞李华岳磊刘正玲龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽谢忠平
- 关键词:柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 两种甲型肝炎病毒抗原检测方法的建立及应用效果
- 目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)ELISA检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使...
- 龙润乡谢忠平杨蓉李华白慧珠
- 关键词:甲型肝炎病毒ELISA检测BA-ELISA
- 文献传递