杨婷
- 作品数：50 被引量：97H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省重点新产品开发计划云南省科技计划项目云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- EV-A71灭活疫苗长期稳定性考察及结果分析被引量：4
- 2017年
- 目的考察肠道病毒A组71型(EV-A71)灭活疫苗的长期稳定性。方法对中国医学科学院医学生物学研究所生产的,在2~8℃条件下保存54个月的Ⅲ期临床样品,进行全面检定以分析各质量指标的变化;用原倍疫苗样品以0、28d两剂腹腔免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行疫苗效力单位(EU)测定;用2倍系列稀释法稀释疫苗,取不同稀释度样品免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行半数有效量ED50测定。结果该样品在2~8℃保存54个月,所有指标均在质量标准的合格要求范围内,仅pH值7.4接近标准上限;抗原含量为180 U/ml,与原检测值相比,下降仅9.1%;半数有效量(ED50)为6.29U,与原检测结果4.90U保持了良好一致;疫苗初次免疫小鼠后28d抗体阳转率为100%,中和抗体效价为1∶16~1∶256,GMT值为1∶52,EU值为6.5;加强免疫后第7天,中和抗体效价为1∶1 024~1∶4 096,几何平均滴度GMT大幅度上升至1∶1 552.1,其EU值为194.0;疫苗样品稀释至45 U/ml的抗原量,仍能使免疫小鼠产生100%的抗体阳转,且GMT值达1∶27.9。结论 EV-A71灭活疫苗于2~8℃条件下保存54个月,其质量指标无明显变化。
- 何鑫谢天宏洪超李华宋霞罗芳宇王微岳磊杨婷熊增平谢忠平
- 关键词：疫苗免疫原性手足口病
- 一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用
- 本发明提供了一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用，本发明使用慢病毒技术，在非洲绿猴肾细胞（Vero）中过表达人KREMEN1基因，构建了稳定表达人源KREMEN1（hKREMEN1）受体的新型Vero...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰高微捷严敏
- 肠道病毒71型抗原检测试剂参考品制备及标定被引量：7
- 2013年
- 目的制备一套EV71抗原检测试剂盒质量控制用参考品。方法用组织培养法制备的一组肠道病毒原液及EV71病毒液,制备成10份阴性参考品、10份阳性参考品、2份灵敏度参考品及1份精密度参考品;以上样品经多人次标定后确定最终结果。结果阴、阳性参考品各10份标定结果分别为10阴及10阳;2份灵敏度参考品标定结果分别为177.97U/mL和1966.86U/mL;精密度参考品平均CV值9.29%。参考品37℃保存5天及反复冻融6次对检测结果没有影响。结论制备的参考品经标定,并通过反复冻融、37℃热稳定性试验,检测结果稳定,可用于EV71抗原检测试剂的质量控制,保证抗原检测试剂检测结果的特异性、灵敏度及稳定性。
- 龙润乡李华杨蓉杨婷岳磊宋晓燕谢忠平
- 关键词：肠道病毒71型参考品
- 柯萨奇病毒A组16型多克隆抗体的制备及其在检定中的应用被引量：3
- 2017年
- 目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病变法进行中和抗体效价检测和对15株不同CV-A16毒株的中和效价检测,并用CV-A16-4V和CV-A16-10R两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗CV-A16血清中和抗体效价可达1∶2 048;该免疫血清对15株CV-A16不同毒株的几何平均滴度(genomic mean titer,GMT)为1∶3 118;完全中和7.5lgCCID50/ml CV-A16病毒所需的最低血清量为128U,当病毒量在4.0~7.0lgCCID50/ml时,完全中和所需的最低血清量为48U,当病毒量低于4.0lgCCID50/ml时,1U的血清即可完全中和本病毒。结论 CV-A16-K168株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价呈负相关。
- 谢天宏杨婷宋霞李华岳磊刘正玲龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 甲肝疫苗感染性滴度检测方法改进的研究
- 谢忠平宋霞李华崔萍芳李文忠杨婷徐琼芳
- 项目主要技术内容、特点及应用推广情况：该研究利用去垢剂对细胞膜的裂解特性，筛选出一种既能较好地裂解细胞释放病毒、又不影响ELISA检测结果的去垢剂(1踚tonX100)，起到超声破碎及超速离心的双重作用，为甲肝减毒活疫苗...
- 关键词：
- 关键词：甲肝疫苗滴度检测去垢剂
- 一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法，本联合疫苗包含灭活的EV71抗原、灭活的CA16抗原和灭活的HAV抗原；通过分别将肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)以及用甲型肝炎病...
- 谢忠平李华龙润乡宋霞谢天宏杨婷罗芳宇岳磊杨蓉洪超王正鑫
- 文献传递
- 小鼠在柯萨奇病毒A组16型活病毒免疫原性评价中的应用被引量：1
- 2016年
- 目的评价小鼠在柯萨奇病毒A组16型（CA16）活病毒感染中免疫原性的应用，为减毒活疫苗研究提供实验数据。方法以不同剂量的CA16活病毒通过皮下、腹腔和肌肉途径接种不同年龄的ICR和BALB／C小鼠，采集初次免疫7d、21d、28d以及加强免疫7d后的血样：通过微量细胞病变中和法检测中和抗体效价，细胞因子ELISA检测试剂盒检测6种细胞因子含量。结果初次免疫后28d，肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率分别为83．33％、40．00％和0．00％，抗体几何平均效价（GMT）分别为1：169、1：32和0；加强免疫后，肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率均达100％，抗体GMT分别为1：813、l：609和1：32，肌肉和腹腔途径免疫的小鼠血清抗体GMT平均增长4．8倍和19．0倍；加强免疫7d的抗体阳转率达100％；明显高于初次免疫28d和21d；BALB／c小鼠与ICR小鼠相比，前者的中和抗体效价和抗体阳转率明显高于后者，而小鼠年龄对中和抗体效价和抗体阳转率的影响不显著（P〉0．05）；免疫剂量对中和抗体效价和抗体阳转率的影响显著（P〈0．05），高剂量病毒免疫小鼠后中和抗体效价和抗体阳转率明显比低剂量高（P〈0．05）；细胞因子检测结果显示加强免疫7d后的白细胞介素100L-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量与初次免疫7d的相比显著增加。结论BALB／c和ICR小鼠可做为CA16活病毒免疫原性评价的动物模型，以4～6周龄的BALB/c小鼠最为敏感。
- 孟华清杨婷谢天宏李华岳磊宋霞张也谢忠平
- 关键词：免疫原性细胞因子减毒活疫苗
- 不同灭活剂对柯萨奇病毒A组16型免疫原性的影响被引量：4
- 2020年
- 目的评价甲醛及β-丙内酯对纯化柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)灭活效果及免疫原性的影响。方法将制备的CV-A16-168病毒液经浓缩、纯化后,用不同浓度甲醛(1∶400、1∶2000、1∶4000、1∶8000)及β-丙内酯(1∶1000、1∶2000、1∶3000、1∶4000)灭活,CV-A16抗原ELISA检测试剂盒检测抗原含量,确定最适灭活浓度。用1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯灭活CV-A16-168,按抗原含量分别制备为640和320 U/mL,加入Al(OH)3佐剂,制备灭活CV-A16-168实验疫苗,免疫BALB/c小鼠2次,间隔28 d,于首次免疫后28、35 d采血分离血清,采用体外微量中和试验检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞术检测血清细胞因子水平。将甲醛灭活和β-丙内酯灭活实验疫苗分别腹腔注射5只BALB/c雌鼠和雄鼠2次,间隔28 d,初免后7 d,雌雄小鼠合笼,怀孕后取出单独饲养,待乳鼠出生48 h内,分别用CV-A16-G10株(原型株,A基因型)、CV-A16-154株(B基因型)及CVA16-G20株(B基因型)进行1000 LD50的病毒株颅内注射,观察21 d乳鼠的临床症状及生存情况。结果1∶4000甲醛37℃3 d及1∶2000β-丙内酯4℃24 h均可完全灭活CV-A16-168。小鼠经灭活CV-A16-168实验疫苗免疫后,血清中和抗体阳转率均达到100%,甲醛灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶7131.55和1∶5042.77,平均增长42.2和45.3倍;β-丙内酯灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶10085.54和1∶6208.38,平均增长42.2和48.5倍;不同灭活剂处理的相同抗原含量间抗体GMT差异无统计学意义(P均>0.05),但组内二次免疫间的抗体GMT差异有统计学意义(P<0.001);甲醛和β-丙内酯灭活实验疫苗免疫小鼠后均诱导产生IFNγ,抗原含量640与320 U/mL组比较,有显著升高(P<0.001)。乳鼠经CV-A16不同基因型毒株攻毒,观察21 d后,全部存活,母传抗体可对不同基因型毒株颅内注射攻毒的乳鼠产生100%的保护。结论1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯均可完全�
- 李华岳磊张也杨婷谢天宏何鑫高微捷卫星辰龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型甲醛灭活免疫原性
- 一种适用于柯萨奇病毒A6培养的新型稳转细胞系及其应用
- 本发明提供了一种适用于柯萨奇病毒A6培养的新型稳转细胞系及其应用，构建所述新型稳转细胞系包括构建hKREMEN1慢病毒过表达载体、病毒包装和稳转细胞筛选。本发明克服了CVA6病毒在Vero细胞增殖不理想的问题，利用慢病毒...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰何鑫严敏
- 免疫复合物解离剂的研究及在HCV抗原检测中的应用效果分析被引量：2
- 2012年
- 目的探索一种可以使免疫复合物发生解离的方法,并进行应用效果分析。方法通过对HAV抗原抗体复合物的解离,进行酸化剂、去垢剂的组合及解离时间、温度等相关条件筛选,优化出最佳的解离方法,应用于1 370份HCV血清样品,对解离前后的抗原阳性率进行统计分析。结果 160 EU/ml的HAV抗原能被效价为20 U/ml的HAV抗血清完全中和;只单独使用去垢剂对免疫复合物无解离效果;0.1 mol/LGly-HCL能解离抗原抗体复合物,加入1种或几种去垢剂后则其解离效果有不同程度的提高,其中以Gly-HCl+7%TritonX-100+5%CHAP的效果最好(q=27.177,P<0.01);免疫复合物在加入解离剂后在室温60 min、37℃30 min、60℃10 min为本试验较好的解离条件,其中以37℃30 min效果最佳;应用Gly-HCl+5%CHAPS+7%TritonX-100在37℃对样品进行预处理30 min后,可使HCV抗原阳性检出率由解离前的33.3%提升至75.56%,解离前后之间的阳性率差异具有显著地统计学意义(χ2=32.34,P<0.01)。结论酸化剂能将HAV及HCV抗原抗体免疫复合物解离,添加去垢剂后,解离效果好于单独使用酸化剂,且联合添加好于单独添加。
- 杨蓉龙润乡李华谭振国白惠珠杨婷蒋蕊鞠谢忠平
- 关键词：甲型肝炎病毒丙型肝炎病毒抗原抗体复合物解离抗原检测
