李崇阳
- 作品数:9 被引量:14H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 不同单细胞全基因组扩增体系扩增牛微量血液DNA效果评价
- 2024年
- 旨在通过二代测序技术评估不同单细胞全基因组扩增(single cell whole genome amplification,scWGA)体系对牛微量血液基因组DNA的扩增效果,建立微量DNA全基因组扩增体系。本研究分别采用MDA(multiple displacement amplification)和MALBAC(multiple annealing and looping-based amplification cycles)两种scWGA体系对华西牛1 ng血液基因组DNA进行全基因组扩增,随后基于两种体系的扩增产物以及原始未稀释血液DNA构建测序文库,利用DNBSEQ-T7RS测序平台进行全基因组测序(whole genome sequencing,WGS),通过比较扩增产物片段大小、浓度、总质量评估扩增效率,通过分析GC含量、测序覆盖度、基因分型一致率、基因型检出率等评估两种体系的扩增效果。结果显示,MDA体系的扩增产物片段大于MALBAC体系(8 kb vs.0.2~2 kb),产物浓度和总质量显著高于MALBAC体系(P<0.05)。基于测序数据,1×和5×测序深度下,MDA体系的基因组覆盖度显著高于MALBAC体系(P<0.05),此外,MDA体系的分型一致率、检出率显著高于MALBAC体系,而等位基因缺失率、假阳性率显著低于MALBAC体系(P<0.05)。综上,本研究揭示了MDA和MALBAC两种扩增体系基于华西牛1 ng血液基因组DNA扩增的体系特点,为改进现有华西牛胚胎基因组选择中的关键扩增技术提供理论依据,促进华西牛遗传育种进展。
- 牛一凡李崇阳杨柏高张培培张航冯肖艺曹建华余洲马友记赵学明
- 关键词:全基因组扩增MDA
- 不同发情阶段水牛唾液的DIA定量蛋白组学分析
- 2024年
- 旨在利用高通量DIA定量蛋白组学分析不同发情阶段水牛唾液中蛋白的差异。本研究将15头体况相近(平均体重为650~750 kg),发情正常,健康状态良好的2~5胎次的尼里-拉菲母水牛作为研究对象,在相同的管理条件下,对其注射氯前列醇并计为第0天,分别在发情前期(第1天)、发情期(第3天)、发情后期(第6天)早上饲喂之前(08:00-11:00)进行唾液的采集,唾液样本每个发情时期分组相同,每3头牛分为一组,共分为5组,样品处理后进行DIA定量蛋白组学检测。结果显示,不同发情阶段水牛的唾液中共定量到1982个蛋白质,分别在发情期/发情前期和发情期/发情后期比较组中鉴定到59和38个差异丰度蛋白。功能分析发现,CBL、SOD1、SPP1和ARPC1B等蛋白质可能在细胞调控和抗氧化、维持细胞间相互作用等方面发挥作用。KEGG通路分析显示,发情前期、发情期和发情后期水牛唾液差异丰度蛋白被富集到mTOR信号通路、孕酮介导的卵母细胞成熟等通路上。综上,通过不同发情阶段的对比,获得与繁殖相关的差异蛋白4个,CBL、ARPC1B、SOD1和SPP1。这些唾液中的差异丰度蛋白可能作为水牛发情生物标志物的关键蛋白,进而为开发水牛发情检测诊断试剂盒提供数据支撑。
- 余洲杨柏高李崇阳张培培曹建华牛一凡覃广胜赵学明
- 关键词:水牛发情鉴定唾液蛋白组学
- 基于非靶向代谢组学探究水牛唾液和血清中的发情标志物
- 2024年
- 在现代化规模养殖中,水牛发情不明显的问题日益突出。研究旨在利用高通量非靶向代谢组学分析不同发情阶段水牛唾液和血清中代谢物的差异。在相同的饲养管理条件下,选择15头尼里-拉菲水牛,每头注射氯前列醇4 mL,注射当天计为第0天。分别在水牛发情前期(第1天)、发情期(第3天)、发情后期(第6天)早上饲喂之前(08:00-11:00)采集唾液和血清,样品处理后采用非靶向代谢组学检测。结果显示,不同发情阶段水牛的唾液和血清中均存在差异代谢物,发情期/发情前期水牛唾液中共鉴定出30种显著差异代谢物,血清中共鉴定出85种显著差异代谢物;发情期/发情后期水牛唾液中共鉴定出8种显著差异代谢物,血清中共鉴定出66种显著差异代谢物。这些差异代谢物主要富集在胰高血糖素信号通路、磷酸戊糖途径、甘油酯代谢等通路上。唾液代谢物与血清代谢物之间存在相关性。唾液中的差异代谢物D-2-磷酸甘油酸、L-丙酰肉碱、白三烯d4和8-异前列腺素a1可能作为水牛发情生物标志物的关键代谢物。
- 余洲杨柏高李崇阳曹建华牛一凡覃广胜王旭光万鹏程梁淦赵学明阿布力孜·吾斯曼
- 关键词:水牛发情鉴定血清唾液代谢组学
- 白藜芦醇对奶牛性控冻精品质和体外受精能力的影响被引量:5
- 2018年
- 本研究旨在探究不同浓度白藜芦醇处理对奶牛性控冻精品质和体外受精能力的影响。在解冻后的奶牛性控冻精中分别添加0、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5) mol/L的白藜芦醇,各组精子在受精液中获能孵育1.5 h后,测定精子质量和体外受精能力。结果表明:添加白藜芦醇均可有效降低性控冻精中活性氧(ROS)含量、提高顶体完整活精子比例(P<0.05),其中10^(-3)、10^(-4) mol/L的白藜芦醇处理对降低ROS含量最为显著;10-4 mol/L的白藜芦醇处理可显著降低丙二醛(MDA)含量并提高性控冻精的卵裂率和囊胚率(P<0.05)。综上所述,白藜芦醇作为一种外源性天然抗氧化剂,通过降低性控精液中过量的ROS水平、抑制精子脂质过氧化反应、保护顶体完整性,从而提高性控精子质量和体外受精能力。
- 李崇阳赵亚涵郝海生杜卫华刘岩庞云渭朱化彬赵学明
- 关键词:奶牛性控冻精白藜芦醇活性氧体外受精
- 一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法
- 本发明提供一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法,其是将体外成熟22h的牛卵母细胞置于含BAPTA‑AM的体外成熟液中孵育2h,然后采用OPS技术,用含10μM BAPTA‑AM和1μM RR的玻璃化冷冻液进行冷...
- 赵学明王娜朱化彬李崇阳赵亚涵郝海生
- 文献传递
- 抗氧化物质对提高家畜冻精受精能力的研究进展被引量:5
- 2017年
- 超低温冻存技术将低温生物学与生殖生物学紧密结合在一起,并在生命科学领域得到了广泛应用。在生殖生物学领域,配子与胚胎的超低温冻存有着广阔的研究前景。目前,常用于家畜繁殖育种的冷冻精液包括常规冻精液和性控冻精,精液经冷冻解冻,尤其是性控冻精在制备时经稀释、染料、激光、分离加压、冷冻以及受精时精液解冻等过程,均会产生大量活性氧(ROS)。ROS破坏精子内部抗氧化防御体系平衡,精子发生氧化应激损伤,造成精子质膜脂质过氧化(LPO)、DNA损伤、凋亡等,影响精子受精能力及受精卵的发育。内源性抗氧化剂不足,补充外源性抗氧化剂成为必然选择。近年来,抗氧化物质在家畜常规冻精中的研究日益增多,但在性控精液中研究很少。本文综述了番茄红素、抗坏血酸、白藜芦醇、褪黑素这几类抗氧化物质对降低家畜常规冻精及性控冻精氧化应激损伤作用机理的研究进展,以期筛选出高效的抗氧化剂以提高冻精质量。
- 李崇阳朱化彬郝海生杜卫华王栋刘岩庞云渭赵学明
- 关键词:冻精氧化应激损伤脂质过氧化
- 钌红对玻璃化冷冻牛卵母细胞线粒体Ca^(2+)的调控研究被引量:4
- 2017年
- 玻璃化冷冻会严重损伤哺乳动物卵母细胞的线粒体功能,进而极大地限制了其解冻后的发育能力。为此,本试验设置3个钌红(RR)处理组,即牛卵母细胞用含0.5、1、2μmol/L RR的玻璃化冷冻液进行冷冻,解冻后放入含0.5、1、2μmol/L RR的体外成熟液中继续培养0.5h,同时,新鲜卵母细胞一部分不进行冷冻,一部分用不含RR的冷冻液进行玻璃化冷冻,分别作为新鲜对照组和玻璃化冷冻对照组,然后共检测5组牛卵母细胞线粒体Ca^(2+)水平、ATP含量及孤雌激活后胚胎的发育能力,进而研究RR对玻璃化冷冻牛卵母细胞线粒体Ca^(2+)水平的调控作用。结果显示:(1)玻璃化冷冻显著提高了牛卵母细胞中线粒体Ca^(2+)水平(P<0.05),而2μmol/L RR处理组线粒体Ca^(2+)水平显著低于冷冻对照组(P<0.05),但与新鲜组相比无显著差异(P>0.05);(2)玻璃化冷冻显著降低了牛卵母细胞中ATP含量(P<0.05),2μmol/L RR处理组卵母细胞中ATP含量显著高于冷冻对照组及0.5、1μmol/L RR处理组(P<0.05);(3)玻璃化冷冻对照组卵裂率、囊胚率显著低于新鲜对照组(P<0.05),1μmol/L处理组卵裂率、囊胚率与新鲜对照组相比无显著差异(P>0.05)。综上所述,RR处理能显著抑制解冻后牛卵母细胞线粒体Ca^(2+)流入,保护线粒体功能,提高其发育能力。本试验结果为正向调控玻璃化冷冻卵母细胞线粒体Ca^(2+)水平,进而提高其发育能力,促进玻璃化冷冻卵母细胞的广泛应用提供了参考依据。
- 王娜李崇阳朱化彬郝海生王皓宇闫长亮杜卫华王栋刘岩庞云渭赵学明
- 关键词:卵母细胞玻璃化冷冻钌红
- 一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法
- 本发明提供一种调控玻璃化冷冻牛卵母细胞中钙离子浓度的方法,其是将体外成熟22h的牛卵母细胞置于含BAPTA‑AM的体外成熟液中孵育2h,然后采用OPS技术,用含10μM BAPTA‑AM和1μM RR的玻璃化冷冻液进行冷...
- 赵学明王娜朱化彬李崇阳赵亚涵郝海生
- 猪胚胎冷冻保存的研究进展
- 2024年
- 胚胎冷冻保存对于胚胎的远距离移植和遗传资源的保护具有重要意义。然而,猪胚胎由于其胞质脂肪含量高,对低温敏感,增加了其保存难度。研究表明,通过降低脂质含量、优化培养基成分、保护细胞骨架以及恢复线粒体功能等方式,能够提高猪胚胎冷冻保存技术的效率,从而促进其广泛应用。因此,本文介绍了胚胎冷冻保存技术,总结了提高胚胎冷冻效率的多种方法和措施。同时,笔者团队将通过讨论猪胚胎的内在特性以及低温保存对转录组改变的影响,进一步关注猪胚胎低温保存的机制,从而更好地了解和推进猪胚胎低温保存的研究。
- 董建华冯肖艺杨柏高李崇阳潘红梅吕丽华赵学明
- 关键词:胚胎冷冻保存玻璃化冷冻