金茜
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种新型重组人复合α干扰素的表达、分离纯化及活性测定被引量:1
- 2011年
- 为提高重组复合α干扰素的活性和半衰期,在现有复合α干扰素结构基础上进行氨基酸替换,合成了新型干扰素(N-cIFN)基因,将该基因克隆到温控表达质粒pBV220,转化大肠杆菌BL21获得工程菌BL21/pBV220-cIFN,经过诱导表达、包涵体变性、DEAE Sephadex A-25柱层析、Sephadex G-50柱层析以及离心超滤等分离纯化过程,获得纯度为92%的重组人复合α干扰素,对其效价测定结果显示其体外活性为9×108IU/mg。
- 金茜陈紫娟徐旭东
- 关键词:分离纯化活性
- 乳铁素的融合表达及其体外抗菌活性鉴定被引量:1
- 2010年
- 为降低乳铁素Lf-cinB表达时对宿主细胞的毒害,提高乳铁素的表达量及纯化效果,合成了牛乳铁蛋白肽基因,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与蛋白质内含子(intein)的C端融合的表达载体pTYB11-cinB。重组质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,融合蛋白intein-cinB主要以可溶形式存在于胞内。利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导in-tein的自我切割活性,实现Lf-cinB在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度94%的重组Lf-cinB。活性检测结果显示,重组Lf-cinB对多种检测菌均有抗菌活性。研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中具有重要的应用前景。
- 陈紫娟金茜徐旭东
- 关键词:抗菌活性