徐婷婷
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人β-防御素3基因的克隆分析及其真核表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 根据Genebank上公布的人β-防御素3基因序列设计引物,以提取的人DNA为模板进行PCR扩增,得到全长为1391bp的人β-防御素3完整基因组序列,包括起始序列、信号肽序列、2个外显子、1个内含子以及上下游酶切位点和终止密码子等。与NCBI上公布的DNA序列的同源性达到99.93%,在内含子上有1个A的缺失,其编码氨基酸序列与公布序列的同源性达100%。将其克隆到pMD18-T载体中,进一步构建了其真核表达载体pcDNA-hBD3,为其表达和功能研究奠定基础。
- 黄仙仙徐婷婷徐雪丽赵卫东郑振宇李春丽
- 关键词：克隆真核表达载体
- 植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因在乙醇氧化酶缺陷型甲醇酵母中的表达及其活性分析
- 2012年
- 采用BglⅡ酶切重组表达载体pPIC9K-Bra,纯化后电击转化甲醇酵母菌GS115,构建乙醇氧化酶缺陷型表达菌株GS115-pPIC9K-Bra,筛选鉴定后,以0.5%的甲醇进行诱导,表达的目的蛋白约占上清总蛋白的95%,纯度较高,并具有一定的甜度。成功构建了乙醇氧化酶缺陷型的甲醇酵母表达菌株,为深入研究其应用奠定了基础。
- 徐婷婷陈锐博暴元元赵卫东郑振宇李春丽
- 关键词：甜蛋白甲醇酵母克隆表达活性检测
- 人β防御素3与植物巴西甜蛋白基因密码子的优化及其在毕氏酵母中的表达被引量：2
- 2013年
- 根据人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的氨基酸序列,按照酵母密码子的偏爱性,合成了14段末端具有粘合位点的核苷酸序列,经连接、PCR扩增,使人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的编码序列通过1段序列(含凝血酶切割位点)连接成为嵌合基因,将其插入到pPIC9K载体中,构建重组表达载体pPIC9K-hBD3-Bra.SalⅠ,BglⅡ单酶切后,分别电击转化到毕赤酵母GS115中,构建野生型和乙醇氧化酶缺陷型酵母工程菌株GS115-pPIC9K-hBD3-Bra.筛选鉴定后,以体积分数为0.5%的甲醇进行诱导,缺陷型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的90%,纯度较高,野生型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的57.8%.
- 暴元元赵青君徐婷婷陈锐博赵卫东郑振宇李春丽
- 关键词：防御素甜蛋白基因合成克隆表达
