暴元元
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因在乙醇氧化酶缺陷型甲醇酵母中的表达及其活性分析
- 2012年
- 采用BglⅡ酶切重组表达载体pPIC9K-Bra,纯化后电击转化甲醇酵母菌GS115,构建乙醇氧化酶缺陷型表达菌株GS115-pPIC9K-Bra,筛选鉴定后,以0.5%的甲醇进行诱导,表达的目的蛋白约占上清总蛋白的95%,纯度较高,并具有一定的甜度。成功构建了乙醇氧化酶缺陷型的甲醇酵母表达菌株,为深入研究其应用奠定了基础。
- 徐婷婷陈锐博暴元元赵卫东郑振宇李春丽
- 关键词：甜蛋白甲醇酵母克隆表达活性检测
- 人β防御素3与植物巴西甜蛋白基因密码子的优化及其在毕氏酵母中的表达被引量：2
- 2013年
- 根据人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的氨基酸序列,按照酵母密码子的偏爱性,合成了14段末端具有粘合位点的核苷酸序列,经连接、PCR扩增,使人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的编码序列通过1段序列(含凝血酶切割位点)连接成为嵌合基因,将其插入到pPIC9K载体中,构建重组表达载体pPIC9K-hBD3-Bra.SalⅠ,BglⅡ单酶切后,分别电击转化到毕赤酵母GS115中,构建野生型和乙醇氧化酶缺陷型酵母工程菌株GS115-pPIC9K-hBD3-Bra.筛选鉴定后,以体积分数为0.5%的甲醇进行诱导,缺陷型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的90%,纯度较高,野生型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的57.8%.
- 暴元元赵青君徐婷婷陈锐博赵卫东郑振宇李春丽
- 关键词：防御素甜蛋白基因合成克隆表达
