赵欣
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：湖南农业大学生物科学技术学院植物激素与生长发育湖南省重点实验室更多>>
- 发文基金：湖南省高校创新平台开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 以pGEX–KG为骨架,运用分子克隆方法构建了生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达载体,通过转化不同表达菌株探索了2种蛋白的诱导表达条件。结果表明:在0.4 mmol/L IPTG诱导下,GST–IAA28融合蛋白在表达菌株Tuner中的表达量最高,其适宜诱导温度为16℃;在0.6 mmol/L IPTG诱导下,BL21(DE3)中GST–IAA28的表达量最高;在各种浓度的IPTG诱导下,Rosetta中的GST–IAA28的产量均不高;在25℃和0.4mmol/L IPTG诱导条件下,Rosetta中的GST–AtTIR1表达总量最高,每克细菌可诱导出约0.2 mg的目标蛋白,但BL21(DE3)菌种中的GST–AtTIR1表达量很低。利用GST SefiroseTM resin亲和树脂对表达的蛋白进行纯化,获得了较纯的AtTIR1和IAA28蛋白。
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- 关键词：生长素结合蛋白原核表达蛋白质纯化
