刘会珍 作品数:4 被引量:7 H指数:2 供职机构: 湖南农业大学生物科学技术学院植物激素与生长发育湖南省重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省高校创新平台开放基金 更多>> 相关领域: 生物学 环境科学与工程 更多>>
小球藻和莱茵衣藻原生质体的电转化研究 被引量:3 2015年 以小球藻及莱茵衣藻原生质体为受体细胞,利用电击法将质粒p CAMBIA1301转入小球藻和莱茵衣藻,摸索电击转化条件并进行分子检测。结果表明:两类藻都对潮霉素敏感,小球藻及莱茵衣藻分别在含25 mg/L和100 mg/L潮霉素的固体培养基上的生长被完全抑制;小球藻和莱茵衣藻原生质体电击转化的最佳电击场强分别为0.8 k V/cm和0.6 k V/cm,最佳脉冲时间均为10 ms;制备原生质体和通过2-脱氧-D-葡萄糖处理可明显提高转化效率;分子检测说明GUS报告基因成功转入两种藻并可稳定遗传。 谢伟民 李合松 刘会珍 罗为桂 刘晓鹏 苏益关键词:小球藻 莱茵衣藻 原生质体 电击转化 拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析 2015年 以p GEX–KG为基本骨架,构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体,用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达,利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白,并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明:GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好;蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间,最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质。 刘会珍 罗为桂 谢伟民 胡月清 苏益 萧浪涛 蔺万煌关键词:原核表达 蛋白质纯化 普通商陆耐锰特性研究及除锰能力评估 被引量:3 2012年 以采自普通土壤生长的商陆为研究对象,对商陆的耐锰特性和锰在商陆体内的积累特征进行了研究。结果表明:(1)普通商陆对锰亦具有较强的耐受性。当土壤中锰离子含量低于24mmol/L时,锰离子对商陆的生长都具有促进作用,在18mmol/L左右达到最大促进效果;当土壤中锰离子含量超过24mmol/L时,商陆的生长受到明显的抑制。(2)锰主要在商陆叶中积累,商陆的除锰能力约为3400~85600g/hm2。 罗为桂 刘四喜 段海风 刘会珍 苏益关键词:商陆 锰 超积累 生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达及纯化 被引量:1 2013年 以pGEX–KG为骨架,运用分子克隆方法构建了生长素结合蛋白AtTIR1和IAA28的原核表达载体,通过转化不同表达菌株探索了2种蛋白的诱导表达条件。结果表明:在0.4 mmol/L IPTG诱导下,GST–IAA28融合蛋白在表达菌株Tuner中的表达量最高,其适宜诱导温度为16℃;在0.6 mmol/L IPTG诱导下,BL21(DE3)中GST–IAA28的表达量最高;在各种浓度的IPTG诱导下,Rosetta中的GST–IAA28的产量均不高;在25℃和0.4mmol/L IPTG诱导条件下,Rosetta中的GST–AtTIR1表达总量最高,每克细菌可诱导出约0.2 mg的目标蛋白,但BL21(DE3)菌种中的GST–AtTIR1表达量很低。利用GST SefiroseTM resin亲和树脂对表达的蛋白进行纯化,获得了较纯的AtTIR1和IAA28蛋白。 赵欣 刘会珍 罗为桂 苏益 蔺万煌关键词:生长素结合蛋白 原核表达 蛋白质纯化