吴正强
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划贵州省农业攻关项目贵阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2017年
- 采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物(CyMV-GZ)的依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列。测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-RdRp,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃以0.3 mmol·L^(-1) IPTG诱导表达分子量约49 kDa重组蛋白。以该重组蛋白为抗原免疫小鼠,制备的抗体效价达1∶204 800。间接ELISA检测显示该多抗与CyMV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他6种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究RdRp的功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定了基础。
- 万晴姣吴正强李欲轲乙引龚记熠刘倩洪鲲
- 关键词：建兰花叶病毒RDRP原核表达多克隆抗体
- 贵阳市食源性金黄色葡萄球菌的单酶切扩增片段长度多态性基因分型
- 2015年
- 目的建立金黄色葡萄球菌的单酶切扩增片段长度多态性(SE-AFLP)基因分型方法,并对贵阳市食源性金黄色葡萄球菌菌株基因型进行分析。方法于2013年7—8月,采集贵阳市124份食品样品进行金黄色葡萄球菌的分离和鉴定,并利用PCR技术进一步验证。筛选HindⅢ单酶切AFLP扩增引物,对分离菌株进行SE-AFLP扩增分析,并根据扩增后的多态性条带进行聚类分析。结果共检出32株金黄色葡萄球菌,通过筛选扩增H-C引物可将其分为31个AFLP基因型。以Dice系数≥0.69作为分群依据,共分为A^E 5个群,其中A群为优势群,包括15个基因型,占总基因型48.39%,B群占16.13%,C群和D群各占12.90%,E群占9.68%。结论该方法能较好地对金黄色葡萄球菌进行分型,耗时短(1~2 d)且不需特殊的限制性内切酶和仪器设备。贵阳市食源性金黄色葡萄球菌具有丰富的遗传多样性。
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- 关键词：金黄色葡萄球菌基因分型
