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河北省奶牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定与系统进化分析被引量：4: 2019年; 为了分离与鉴定河北省牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV),试验对河北省某规模化奶牛场IBRV初检阳性病料进行处理,采用病毒分离培养、分离毒毒价测定、中和试验、PCR扩增、目的基因片段测序、同源性分析及系统进化树构建的方法对病毒进行鉴定和分析。结果表明:筛选出一株病变毒株,其TCID(50)为1×10^(-4.7)/0.1 mL,分离株抗原能够被IBRV阳性血清中和,PCR扩增出大小为314 bp的特异性片段,扩增的gB基因片段共编码316个核苷酸,与GenBank中部分IBRV毒株的同源性为99.3%~100%,该毒株与BH81株(DQ006854)亲源关系较近,将其命名为HBXT-IBRV。; 陈颖彬常丽云李林王紫燕赵越康茜赵月兰秦建华; 关键词：奶牛牛传染性鼻气管炎病毒系统进化分析

微小牛蜱P0基因原核表达及表达产物的免疫原性分析被引量：2: 2017年; 为了研究微小牛蜱P0蛋白的免疫原性,试验采用RT-PCR技术从微小牛蜱中扩增P0基因,将PCR产物克隆连入PET28a(+)载体构建重组表达载体PET28a-P0,再将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中以IPTG诱导表达。结果表明:P0基因获得表达,表达的重组蛋白分子质量为35 ku,表达产物能被微小牛蜱阳性血清所识别。说明P0蛋白具有良好的免疫原性。; 刘立元崔雪霞赵越白云康茜任志军唐欣浩王雪伟包永占赵月兰秦建华; 关键词：微小牛蜱克隆

牛病毒性腹泻病毒感染MDBK细胞和家兔前后炎症因子的表达变化被引量：2: 2020年; 为了解牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染宿主后炎症因子的变化,以Madin-Darby牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney cells,MDBK)和家兔为宿主,选用炎症反应关键酶COX-2和炎症因子如IL-8、MIP-3α、GRO-α作为研究指标。通过设计上述炎症因子的特异性引物,分别从MDBK、家兔脾脏组织和小肠上皮组织中分别扩增目的片段,建立实时荧光相对定量PCR方法检测感染前后COX-2和IL-8、MIP-3α、GRO-αmRNA的相对表达水平。结果表明,在BVDV感染MDBK细胞后,COX-2和IL-8、GRO-αmRNA表达量均显著高于未感染前(P<0.01);当BVDV感染家兔后小肠和脾细胞中COX-2和IL-8、GRO-α表达量均显著高于未感染前(P<0.05);但只有在脾细胞中,MIP-3αmRNA表达量显著高于未感染前(P<0.01)。说明BVDV感染宿主的过程中可引起COX-2和IL-8、GRO-α基因表达量的升高,推测MIP-3α在脾脏抗BVDV感染过程中发挥着重要的作用。; 任志军康茜常丽云陈颖彬王紫燕夏颖秦建华赵月兰; 关键词：BVDV 家兔炎症因子

微小隐孢子虫感染小鼠肠道细胞因子变化及差异表达MicroRNA的筛选: 隐孢子虫（Cryptosporidium）是一种世界性分布的人兽共患寄生性原虫，寄生于宿主消化道上皮细胞刷状缘纳虫空泡，它会引起人和多种动物腹泻，尤其是它可引起免疫缺陷或免疫抑制者致死性腹泻，对人类和牲畜健康造成严重威胁...; 康茜; 关键词：干扰素-Γ 白细胞介素-2

河北省奶牛场犊牛安氏隐孢子虫的分离鉴定: 2019年; 本研究从河北省奶牛场有腹泻症状2月龄左右的犊牛粪便中分离卵囊,进行病原分离与虫株鉴定。采集腹泻犊牛的新鲜粪便24份,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊,观察卵囊形态、大小。提取卵囊基因组DNA,进行18SrRNA基因PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测。对扩增片段进行序列测定及分析,进一步确定分离虫株隐孢子虫的种类/基因型,根据18SrRNA基因核苷酸序列构建系统发育进化树,确定虫株亲缘关系。结果显示,5份样品检出隐孢子虫卵囊,感染率为20.83%。形态学观察卵囊呈长圆形或椭圆形,大小为(5.0~8.2)μm×(4.2~6.3)μm,平均大小为6.6μm×5.3μm,卵囊指数为1.24,鉴定分离虫株为安氏隐孢子虫。PCR扩增出预期大小为1 188bp的特异性片段,序列分析和同源性分析结果表明,分离株与安氏隐孢子虫AB089285.2株、AB513856.1株、AY954885.1株的同源性为98.7%~98.8%,进一步表明分离的隐孢子虫虫株为安氏隐孢子虫。在种系进化关系上,分离株与安氏隐孢子虫AB513856.1株亲缘关系最近。本研究为揭示河北省奶牛隐孢子虫病的流行特征,实施有效防制措施提供了科学依据。; 康茜陈颖彬关一凡李林秦建华赵月兰; 关键词：奶牛隐孢子虫系统进化分析

夏季奶牛热射病的防控技术: 2017年; 目前我国规模化奶牛场及散养户大多引进外国品种，其中大部分为源自北欧的荷斯坦牛，该品种奶牛耐寒怕热，外界环境高于27℃时极易发生热射病。热射病是奶牛在高热、高湿的环境中发生的一种急性、快速致死性疾病；; 康茜秦建华; 关键词：规模化奶牛场热射病防控技术夏季荷斯坦牛散养户

河北省保定地区雏鸡鸡白痢沙门菌的分离鉴定及耐药性检测被引量：3: 2017年; 为了有效防控雏鸡白痢沙门菌病,试验自保定某蛋种鸡场疑似为鸡沙门菌病雏鸡采取肝脏病料进行细菌的分离培养、生化鉴定、鸡白痢沙门菌多价血清学鉴定及沙门菌inv A基因PCR鉴定,并对分离菌进行致病性检测及对7种抗菌药物的耐药性检测。结果表明,10株分离菌的形态特征、生化特性、血清学鉴定结果符合鸡白痢沙门菌的特征,说明从病死雏鸡组织中分离出的细菌为鸡白痢沙门菌。沙门菌inv A基因PCR扩增出373 bp目的片段,进一步证实分离菌为鸡沙门菌。用分离菌株接种雏鸡,其死亡率高达90%,表明该菌株有很高的致病性。10株分离菌株对阿莫西林和青霉素耐药率达100%,对阿齐霉素的耐药率达90%,而对阿米卡星、头孢唑林和庆大霉素耐药性较弱、对氧氟沙星较为敏感。3耐菌株多重耐药比例为42.86%,4耐菌株多重耐药比例为57.14%,5耐菌株多重耐药比例为71.43%,说明雏鸡沙门菌分离株对所试抗菌药物均表现出不同程度的耐药性,且表现出多重耐药现象。本试验为鸡白痢沙门菌病的防治提供参考。; 张梦茜唐欣浩王雪伟康茜任志军陈颖彬刘立元赵月兰秦建华; 关键词：鸡白痢沙门菌耐药性

一种牛口蹄疫抗体的胶体金免疫层析试纸: 本实用新型公开了一种牛口蹄疫抗体的胶体金免疫层析试纸，包括PVC胶板，PVC胶板中间设置有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜两侧的PVC胶板上分别设置有血清样品垫和吸水纸，血清样品垫与所述硝酸纤维素膜之间设置有金标垫，金标垫上涂...; 秦建华唐欣浩张伟李林薄玉琨赵月兰王雪伟康茜任志军孟庆武郝飞; 文献传递

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康茜