康怀兴
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于裂解酶与ATP生物发光法特异定量检测炭疽杆菌方法的研究被引量：2
- 2014年
- 目的:原核表达炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶(PlyG)和萤光素酶(Luc),结合这2种酶建立特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法:PCR扩增得到带有His标签的裂解酶基因和萤光素酶基因,构建重组表达载体pET22b-plyG和pET22b-luc,转化至大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,过镍柱纯化得到目的蛋白;利用裂解酶裂解和ATP生物发光定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1,与平板计数法对比建立线性关系。结果:表达了炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶和萤光素酶,并建立了特异定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1的方法,与平板计数方法具有显著的线性相关。结论:因炭疽杆菌与蜡样芽孢杆菌RSVF1均对PlyG具有较强的敏感性,故本研究所建立的将炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶与萤光素-萤光素酶系统相结合的检测方法对现场或临床定性定量检测炭疽杆菌提供了理论支持,具有良好的应用前景。
- 张博康怀兴米志强安小平张飞雄童贻刚
- 关键词：萤光素酶ATP生物发光法
- 一株新的沙门菌烈性噬菌体IME-SAL1的分离、全基因组测序和比较基因组分析被引量：3
- 2015年
- 目的:分离鉴定一株沙门菌的烈性噬菌体,观察其形态大小,完成全基因组测序,分析其基因组结构和进化关系,为治疗沙门菌感染提供新的策略和实验依据。方法:以沙门菌SAL95作为指示菌从医院废水中分离噬菌体,分离到的噬菌体经浓缩和纯化后采用透射电镜观察其形态大小,提取噬菌体的基因核酸并完成全基因组高通量测序,分析其全基因组的结构特征,通过比较基因组分析研究其进化关系。结果:从解放军307医院未经消毒处理的废水中分离到一株烈性沙门菌噬菌体。电镜观察显示,该噬菌体头部呈立体对称,有一不收缩的长尾。其基因组全长113 183 bp,比较基因组分析确定该噬菌体为一株新的沙门菌噬菌体,命名为IME-SAL1。结论:从医院废水中分离到一株烈性沙门菌噬菌体IME-SAL1,研究了该噬菌体的分类、基因组结构、进化关系,可为其实际应用提供参考。
- 康怀兴徐晓蒙张湘莉兰王亚慧米志强童贻刚
- 关键词：沙门菌全基因组测序
- 脆性X综合征特殊病例的CGG重复序列组织异质性分析及遗传咨询
- 目的本研究拟通过检测脆性X综合征特殊病例不同组织CGG重复数目和甲基化情况,分析CGG重复模式的组织异质性,为我国脆性X综合征遗传咨询提供依据。方法联合高GC含量PCR和甲基化敏感Southern blot分析患者不同组...
- 段然慧黄文罗仕玉康怀兴邬玲仟
- 文献传递
- 脆性X综合征特殊病例的CGG重复序列组织异质性分析及遗传咨询
- 段然慧黄文罗仕玉康怀兴邬玲仟
- 用实时定量PCR解决基因组序列组装中的重复序列问题
- 2015年
- 目的:探寻一种简单、经济的方法,解决基因组序列拼接中的重复序列问题。方法:选取序列拼接中遇到重复序列问题的质粒NDM-BTR,在其与重复序列相关的contigs两端设计引物,进行实时定量PCR,通过观察临界循环数来判断contig之间的位置关系。结果:成功判断出质粒contig之间的位置关系,得到了质粒基因组完成图。结论:实时定量PCR法可用于解决基因组序列拼接中的重复序列问题,相比较传统建立大片段文库更加简单、快速、经济。
- 徐晓蒙康怀兴张志毅童贻刚
- 关键词：高通量测序实时定量PCR
- 30例脆性X携带者的产前诊断被引量：3
- 2019年
- 目的 对脆性X携带者孕妇及胎儿CGG重复数目和甲基化进行检测,为遗传咨询和产前诊断提供依据.方法 应用高GC含量PCR对30例行产前诊断的脆性X携带者孕妇绒毛膜、羊水、脐血的CGG重复数目进行检测,再行Southern印迹甲基化测定和重复数目验证.结果 在29例脆性X携带者(1例双胎妊娠)和1例FMR1基因嵌合缺失的产前诊断病例中,检出前突变3例、全突变9例、前突变/全突变嵌合1例,正常18例.结论 脆性X患者分型复杂,单一技术无法准确诊断,不同类型患者检测项目均会有所差异,需根据患者实际情况谨慎确定检测方案,进行规范的产前诊断.
- 黄文薛瑾康怀兴关新新滕炎玲邬玲仟段然慧
- 关键词：脆性X综合征产前诊断
- 疑似脆性X综合征患者家系基因筛查和产前诊断被引量：1
- 2018年
- 目的探索脆性x综合征基因筛查在临床的应用价值。方法对6个病因不明智力低下家系采用基于三引物PCR检测方法的国产试剂盒进行脆性X综合征筛查，同时采用甲基化PCR＋Southern印迹杂交校验检测结果。结果家系1和家系6筛查结果阳性。家系1中先证者和母亲均存在一条甲基化的全突变等位基因。胎儿遗传了母亲的全突变等位基因；家系6先证者为部分甲基化的前突变和全突变的嵌合体，其姐姐携带甲基化全突变等位基因，母亲为前突变等位基因携带者，父亲和胎儿均正常。家系2-5筛查结果阴性并与甲基化PCR结果一致。结论通过对疑似患者进行脆性X综合征的基因筛查，进而进行基因诊断和产前诊断，不仅结果准确可靠而且有效的降低了检测成本，是预防该病经济高效的方法。
- 席惠张亚南卿礼艳康怀兴段然慧贾政军王华
- 关键词：脆性X综合征智力低下FMR1基因基因筛查
