陈小微
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 犬副流感病毒分子克隆的构建及全基因组序列分析被引量：2
- 2015年
- 为了解犬副流感病毒（CPIV）的基因组结构与遗传进化特征，应用RT—PCR分段扩增HRB—V毒株的5个片段，f1、f2、f3以及5′-末端和3′-末端，克隆到pHW2000栽体中并进行测序。经序列拼接获得全基因组序列，与OenBank登录的副流感病毒代表毒株进行对比分析。基因序列分析表明，HRB-V株基因组全长15246nt，含5′-末端、3′-末端和7个ORF具有副流感病毒基因组结构的典型特征；将结构蛋白F、HN以及全基因序列与参考毒株进行比较分析并做遗传进化树，结果表明，HRB—V与CPI一和CPI＋属同一分支，亲缘性相近。核苷酸以及氨基酸序列同源性分析结果表明，HRB-V与各病毒株的F基因的核苷酸同源性在96．5％～98．8％之间，氨基酸同源性为94．2％～98％；HN基因的核苷酸同源性在98．1％～99．5％之间，氨基酸同源性为97％～99．3％。以上试验证明副流感病毒人、猴、猪和犬sV5分离株基因差异较小，具有高度同源性。研究副流感病毒分子克隆的结构，为研究犬副流感病毒反向遗传操作技术平台奠定基础。
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- 关键词：犬副流感病毒分子克隆基因组测序系统进化分析
- 犬副流感病毒HN基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2015年
- 为建立检测犬副流感病毒(CPIV)抗体的方法,本研究利用杆状病毒表达系统表达CPIV的HN蛋白,以其为包被抗原,采用方阵法确定包被抗原和血清最佳工作浓度,对各种反应条件进行优化,建立了CPIV血清抗体的间接ELISA检测方法。该方法仅与CPIV阳性血清发生特异性反应,与犬细小病毒(CPV)和犬腺病毒(CAV)的阳性血清无交叉反应;批内和批间变异系数小于10%。利用建立的ELISA方法与血凝抑制试验分别对48份送检犬血清样品进行检测,符合率为92%。本研究为建立快速、准确、简便的犬副流感鉴别诊断试剂盒奠定了基础。
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- 关键词：犬副流感病毒HN蛋白间接ELISA
- 犬副流感病毒HN基因在昆虫细胞中的表达
- 引言犬副流感病毒感染是由副流感病毒5型引起的犬的一种呼吸道传染病,是犬类的常见疾病之一,常引起犬的支气管炎和支气管肺炎。犬副流感病毒（CPIV）为单链、不分节的RNA病毒,包括编码8个结构蛋白（NP、P、V、M、F、SH...
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