刘明
- 作品数：199 被引量：616H指数：13
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- H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立
- 根据 GenBank 发表的 H1亚型猪流感 HA 基因序列设计引物,扩增出 HA 基因片段,将其克隆到 pFastBacGP67B 杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体 pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病...
- 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛张云郭东春
- 文献传递
- 表达H5亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶双基因重组禽痘病毒的构建被引量：10
- 2000年
- 血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）是禽流感病毒（ＡＩＶ）的两种表面糖蛋白，主要诱导机体产生体液免疫应答。本研究采用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取禽流感病毒分离株Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／３／９６（Ｈ５Ｎ１）的ＳＰＦ鸡胚尿囊毒ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ扩增完整的ＮＡ ｃＤＮＡ基因，将其克隆到载体ｐＳＹ５３８中的禽痘病毒早晚期启动子 ＬＰ２ＥＰ２的下游，然后再将含有启动子的 ＮＡ基因片段亚克隆到已有的ＡＩＶＨＡ基因重组禽痘病毒转移载体ｐＳＹ（ＨＡ＋ＬａｃＺ）中，构建了ＨＡ、ＮＡ双重组禽痘病毒转移载体ｐＳＹ（ＨＡ＋ＮＡ＋ＬａｃＺ），将它与禽痘病毒疫苗株Ｓ－ＦＰＶ－０１７共转染鸡胚成纤维细胞，在Ｘ－ｇａｌ存在的条件下，经蓝斑筛选、六选蚀斑纯化、ＰＣＲ鉴定等，结果表明已获得一株能同时稳定表达ＨＡ和ＮＡ蛋白的重组禽痘病毒，为禽流感基因工程病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。
- 乔传玲于康震贾永清刘明孟庆文田国彬唐秀英孟庆文
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因神经氨酸酶基因重组禽痘病毒
- 抗水禽细小病毒VP3蛋白单克隆抗体
- 本发明涉及一种抗水禽细小病毒VP3蛋白单克隆抗体细胞株2D5，其保藏号是CGMCC No.3671。本发明还涉及所述细胞株分泌的单克隆抗体，及其应用。
- 张云刘明王笑梅李娜
- 抗新I型鸭肝炎病毒3D蛋白单克隆抗体
- 本发明是一种新I型鸭肝炎病毒3D蛋白单克隆抗体，属于分子生物学技术领域，涉及基因工程和免疫学技术。将新I型鸭肝炎病毒3D蛋白抗原纯化。用纯化抗原免疫BALB/c小鼠，经融合、间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞和有限稀释法克...
- 张云孟凡依刘明冯新畅
- 文献传递
- 鹅源H5N1亚型禽流感病毒株HA基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2006年
- 本研究对1株鹅源H5N1亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因进行了扩增、克隆及序列测定。结果表明：所扩增的片段长1707bp，包含完整的开放阅读框架，编码568个氨基酸。该毒株裂解位点的氨基酸序列为RRRKKR，具有高致病性的分子特征；该毒株有6个潜在糖基化位点；受体结合位点的氨基酸分别为YWIHELY，其左侧壁氨基酸为SGVSSA，右侧壁为NGQSGR。该毒株与国内外一些参考毒株的HA基因序列比较，核苷酸同源率为76.8％～98．1％，氨基酸同源率为85．7％～97．4％，属于欧亚种系。
- 王伟利周宇孟庆锋刘明钱爱东
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因
- 重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救
- 为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,本研究利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8毒株的PB2基因作...
- 杨涛刘明刘春国张云王笑梅童光志
- 关键词：猪流感H3N2亚型反向遗传技术流感疫苗重组细胞
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒的鸭致病性研究被引量：30
- 2006年
- 【目的】为了验证H5N1亚型禽流感病毒对鸭是否具有致病作用。【方法】对2003年某地方养鹅场发病鹅群分离的一株H5N1亚型流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/2003的生物学特性和致病性进行研究。【结果】动物实验表明该病毒对不仅对鸡具有高致病性(IVPI=3),而且对鸭也具有高致病性。雏鸭人工感染该病毒后临床表现典型的神经症状,剖检可见脑膜点状出血,肝脾肿大并见有坏死灶,肺脏严重充血、出血,消化道粘膜弥散性出血。病理组织学检查发现全身各脏器以出血、充血、细胞变性坏死和炎性细胞浸润为主要特征,并表现为不同程度的损伤。感染鸭死亡集中在感染后的4～6d,致死率75%。雏鸭在病毒感染后2～4d的气管、泄殖腔及全身各主要器官均可分离到病毒。虽然攻毒后14d耐过鸭血清中可检测到1∶16的HI抗体;但是此时胰腺中仍然可分离到低水平的病毒。【结论】本研究继从野鸟分离到对鸭具有高致病性禽流感病毒之后,首次证实家禽中也存在对鸭具有高致病性的禽流感病毒流行。
- 刘超男刘明张云刘春国高雪丽
- 关键词：禽流感病毒鸭流感H5N1亚型
- 流感病毒反向遗传学技术研究进展
- 2008年
- 流感病毒亚型众多,且极易发生变异,给防控带来很大困难,所以当务之急应加强其在致病机理、传播机制等方面的研究和加快新型流感疫苗的开发.近年来,反向遗传学技术的发展为流感病毒基因功能研究和疫苗制备方面开辟了新思路.
- 刘大飞刘春国刘明刘大程
- 关键词：流感病毒标记疫苗
- 以番鸭呼肠孤病毒σC表达蛋白为抗原的ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2006年
- 将鸭呼肠孤病毒小外壳σC蛋白编码基因克隆于原核表达载体pET32a上,经EcoRⅠ和SacⅠ双酶切鉴定及序列分析,获得了重组质粒pET32a-σC,转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞后,经SDS-PAGE和Western-blotting分析,融合蛋白能够与番鸭呼肠孤病毒感染康复鸭血清发生特异反应;以0.15 mmol/L IPTG诱导,5 h后融合蛋白σC表达量可达高峰,分子质量为50ku;融合蛋白纯化后被用作包被抗原,建立了检测鸭血清中呼肠孤病毒抗体的间接ELISA,经对检测条件优化,最佳包被浓度为5μg/mL,标准阳性血清的最适稀释倍数为1∶40。用该方法对50份鸭血清样品进行了检测,与琼脂扩散抗体检测法相比,ELISA具有良好的特异性和敏感性。
- 耿宏伟郭东春张云胡奇林刘明张序王立群
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒原核表达酶联免疫吸附试验
- H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因的序列分析被引量：2
- 2012年
- 禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）是正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒。禽流感又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,被国际兽医局（OIE）列为A类传染病。H9N2亚型AIV为低致病性禽流感病毒,虽然毒力较H5N1亚型AIV弱,
- 王寿山张超林刘春国石薇琳刘彦云王伟王伟
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒NA基因低致病性禽流感病毒A型流感病毒H5N1亚型
