孙东阳
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：辽宁省高校创新团队支持计划国家自然科技资源平台项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 以右旋磷霉素为底物筛选生物转化产生左旋磷霉素的菌种
- 目的：筛选以右旋磷霉素为底物，转化产生左旋磷霉素的菌株。<br> 方法：通过固体琼脂块初筛和液体摇瓶复筛对本实验室保存真菌进行筛选，分别通过生物鉴定、生物显影、毛细管电泳相结合的方法对产物进行鉴定。<...
- 孙杨孙东阳姜平张怡轩
- 关键词：生物转化真菌菌株菌种筛选
- 一株转化井冈霉素产生井冈霉胺细菌的筛选与鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的筛选以井冈霉素为底物,转化产生井冈霉胺的菌株。方法通过以井冈霉素为碳源,富集培养能够利用井冈霉素的菌株,划线分离出单菌落。各种菌株转化井冈霉素后的产物经衍生化反应后以H PLC法分析。结果经过对225株细菌、真菌和放线菌的筛选,最终得到一株以井冈霉素为底物裂解产生井冈霉胺的菌株Y07B-0134。结论经形态学、生理生化鉴定和16S rDNA基因序列对比分析,确定该菌株为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum)。
- 董至恒孙东阳高焕张怡轩
- 关键词：井冈霉素生物转化
- 固定化酶法手性转化右旋磷霉素的初步研究被引量：2
- 2011年
- 研究确定沙门柏干酪青霉菌(Penicillium camemberti)2221能够产生手性转化右旋磷霉素的酶,以及以海藻酸钠为载体固定化酶转化的最适条件。以海藻酸钠为载体,分别考察了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、海藻酸钠和酶用量的体积比、固定化时间等条件,以及固定化酶的最适反应pH、最适反应温度和反复利用的稳定性等。结果表明,最优固定化条件是3.0%(质量与体积比)海藻酸钠、3.0%(质量与体积比)氯化钙、酶液(浓缩20倍)和3.0%(质量与体积比)海藻酸钠溶液的体积比为1 2、固定化时间为6 h。固定化酶的最适温度为37℃,最适pH为6.2,转化率为14.3%,连续反应4次后转化率为最初的57.57%。利用海藻酸钠包埋固定化沙门柏干酪青霉菌产生的手性转化右旋磷霉素的酶,能够连续转化生成左旋磷霉素,提高酶的利用效率,延长使用时间,具有进一步研究开发的价值。
- 姜平孙杨孙东阳张怡轩
- 关键词：生物转化固定化海藻酸钠
- 右旋磷霉素手性转化产物检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 建立以右旋磷霉素为底物生物转化产生左旋磷霉素的检测方法。通过考察藤黄微球菌与大肠埃希菌对左旋磷霉素的最小抑菌浓度，确定检定菌种类；优化薄层色谱展开剂系统，将薄层色谱与生物显影相结合对转化产物进行定性；利用含量标准曲线，使用生物活性检测法对转化产物进行定量。藤黄微球菌对左旋磷霉素的最小抑菌浓度比大肠埃希菌小100倍，因此作为本实验的检定菌；薄层色谱的最佳展开剂确定为正丁醇／甲醇／水（4：3：2，体积比），此时左旋磷霉素在生物栓定板上呈现边缘清晰的抑菌圈，且Rf值为0．5l；在1．43～5．0mg／mL范围内。抑菌圈直径与磷霉素浓度的对数值成正比。以藤黄微球菌作为检定菌，不需要对转化产物进行分离纯化和精制，可利用薄层色谱与生物显影相结合的方法对产物进行定性，利用生物活性检测法对产物进行定量，达到简便快速地对转化产物进行定性和定量的目的。
- 孙东阳孙杨姜平张怡轩
- 右旋磷霉素手性转化菌株的筛选与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的筛选以右旋磷霉素为唯一碳源转化产生左旋磷霉素的菌株并进行种属鉴定。方法采用固体琼脂块法对微生物菌种资源库中的真菌进行初步筛选;再利用液体摇瓶法对初筛阳性菌株进行复筛。利用薄层生物自显影的方法和质谱分析法对转化产物进行鉴定。采用形态学分类法及ITS-5.8S rDNA序列分析法对阳性菌株进行菌种鉴定。结果初筛了2856株真菌,获得138株阳性菌株;对其中转化能力比较强的15株阳性菌株进行液体摇瓶复筛,发现菌株2221的转化率最高,当底物投料量为0.05%时,转化率达到36.8%。根据菌株2221的形态特征以及ITS-5.8S rDNA序列比对,菌株2221被鉴定为沙门柏干酪青霉。结论沙门柏干酪青霉2221可手性转化右旋磷霉素为左旋磷霉素。
- 孙杨姜平孙东阳张怡轩
- 关键词：生物转化菌种筛选
