孙杨
- 作品数:8 被引量:7H指数:2
- 供职机构:沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金:辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 生物转化法生产左旋磷霉素的菌种的筛选及产物鉴定
- 目的:磷霉素是一种临床常用的重要广谱抗生素,国内外均采用化学法生产,但是合成的磷霉素消旋体需要进行化学拆分,且左旋磷霉素收率不足35%,右旋磷霉素作为废弃物排放掉形成严重的环境污染。因此,实现右旋磷霉素的再利用,是降低磷...
- 孙杨张怡轩
- 文献传递
- 固定化酶法手性转化右旋磷霉素的初步研究被引量:2
- 2011年
- 研究确定沙门柏干酪青霉菌(Penicillium camemberti)2221能够产生手性转化右旋磷霉素的酶,以及以海藻酸钠为载体固定化酶转化的最适条件。以海藻酸钠为载体,分别考察了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、海藻酸钠和酶用量的体积比、固定化时间等条件,以及固定化酶的最适反应pH、最适反应温度和反复利用的稳定性等。结果表明,最优固定化条件是3.0%(质量与体积比)海藻酸钠、3.0%(质量与体积比)氯化钙、酶液(浓缩20倍)和3.0%(质量与体积比)海藻酸钠溶液的体积比为1 2、固定化时间为6 h。固定化酶的最适温度为37℃,最适pH为6.2,转化率为14.3%,连续反应4次后转化率为最初的57.57%。利用海藻酸钠包埋固定化沙门柏干酪青霉菌产生的手性转化右旋磷霉素的酶,能够连续转化生成左旋磷霉素,提高酶的利用效率,延长使用时间,具有进一步研究开发的价值。
- 姜平孙杨孙东阳张怡轩
- 关键词:生物转化固定化海藻酸钠
- 一株具有抗肿瘤活性的土壤放线菌的筛选与菌种鉴定被引量:3
- 2008年
- 目的快速高效的筛选到有抗肿瘤活性的土壤放线菌。方法初筛采用MTT法检测样品作用后A549细胞、HGC-27细胞和正常对照细胞N9的成活率,PI染色流式细胞检测技术复筛可能致细胞凋亡的菌株,以及对活性菌株进行种属鉴定。结果与结论从350株土壤放线菌中初筛得到16株菌种,它们的代谢产物对A549及HGC-27细胞有抑制作用,但对N9细胞生长无影响;复筛得到1株编号为1070的菌株的代谢产物能使A549细胞经过处理后,经流式细胞仪检测到亚二倍体峰,峰高为32.07%。从菌株菌落形态、孢子丝形态、生理生化特性及16SrDNA序列、系统进化分析鉴定该菌种为Streptomyces capillispiralis。
- 彭珧曹晓宇田威孙杨吴春福张怡轩
- 关键词:抗肿瘤流式细胞仪菌种鉴定
- 一种新的以右旋磷霉素为底物转化左旋磷霉素菌株的筛选方法
- 本发明涉及生物转化/生物催化技术领域,涉及一种新的以右旋磷霉素为底物的左旋磷霉素生物转化菌株的筛选方法。利用含有右旋磷霉素的固体培养基培养待测菌株,利用超敏感藤黄微球菌和超耐受大肠杆菌为生物鉴定指示菌,将琼脂块置于生物鉴...
- 张怡轩张景海吴春福孙杨
- 文献传递
- 以右旋磷霉素为底物筛选生物转化产生左旋磷霉素的菌种
- 目的:筛选以右旋磷霉素为底物,转化产生左旋磷霉素的菌株。<br> 方法:通过固体琼脂块初筛和液体摇瓶复筛对本实验室保存真菌进行筛选,分别通过生物鉴定、生物显影、毛细管电泳相结合的方法对产物进行鉴定。<...
- 孙杨孙东阳姜平张怡轩
- 关键词:生物转化真菌菌株菌种筛选
- 右旋磷霉素手性转化菌株的筛选与鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的筛选以右旋磷霉素为唯一碳源转化产生左旋磷霉素的菌株并进行种属鉴定。方法采用固体琼脂块法对微生物菌种资源库中的真菌进行初步筛选;再利用液体摇瓶法对初筛阳性菌株进行复筛。利用薄层生物自显影的方法和质谱分析法对转化产物进行鉴定。采用形态学分类法及ITS-5.8S rDNA序列分析法对阳性菌株进行菌种鉴定。结果初筛了2856株真菌,获得138株阳性菌株;对其中转化能力比较强的15株阳性菌株进行液体摇瓶复筛,发现菌株2221的转化率最高,当底物投料量为0.05%时,转化率达到36.8%。根据菌株2221的形态特征以及ITS-5.8S rDNA序列比对,菌株2221被鉴定为沙门柏干酪青霉。结论沙门柏干酪青霉2221可手性转化右旋磷霉素为左旋磷霉素。
- 孙杨姜平孙东阳张怡轩
- 关键词:生物转化菌种筛选
- 以右旋磷霉素为底物微生物转化法制备左旋磷霉素的初步研究
- 磷霉素是一种小分子的广谱抗生素,对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有杀灭作用,随着近年来药理研究的不断深入,其应用范围越来越广泛。由于磷霉素结构简单,目前工业生产仍使用早期发明的化学合成法,但该方法生产的总收率不足35%,且产物...
- 孙杨
- 关键词:生物转化菌种筛选
- 文献传递
- 右旋磷霉素手性转化产物检测方法的建立被引量:1
- 2010年
- 建立以右旋磷霉素为底物生物转化产生左旋磷霉素的检测方法。通过考察藤黄微球菌与大肠埃希菌对左旋磷霉素的最小抑菌浓度,确定检定菌种类;优化薄层色谱展开剂系统,将薄层色谱与生物显影相结合对转化产物进行定性;利用含量标准曲线,使用生物活性检测法对转化产物进行定量。藤黄微球菌对左旋磷霉素的最小抑菌浓度比大肠埃希菌小100倍,因此作为本实验的检定菌;薄层色谱的最佳展开剂确定为正丁醇/甲醇/水(4:3:2,体积比),此时左旋磷霉素在生物栓定板上呈现边缘清晰的抑菌圈,且Rf值为0.5l;在1.43~5.0mg/mL范围内。抑菌圈直径与磷霉素浓度的对数值成正比。以藤黄微球菌作为检定菌,不需要对转化产物进行分离纯化和精制,可利用薄层色谱与生物显影相结合的方法对产物进行定性,利用生物活性检测法对产物进行定量,达到简便快速地对转化产物进行定性和定量的目的。
- 孙东阳孙杨姜平张怡轩