杜元元
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划大连市科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 一种新型黄原胶裂解酶的异源表达及酶学性质表征被引量：2
- 2017年
- 黄原胶裂解酶是一种黄原胶修饰酶,对黄原胶的改性及新型黄原胶寡糖的制备具有十分重要的意义。本实验从一株性能优良的黄原胶降解菌Microbacterium sp.XT11中首次克隆出黄原胶降解酶编码基因xly。该基因编码理论分子量为122027 u的蛋白质,其N端含有一条35 aa的分泌信号肽,C端含有一段392 aa的碳水化合物结合域CBM。随后,在去除分泌信号肽及CBM的截短酶的N端融合了谷胱甘肽巯基转移酶亲和纯化标签(GST),所形成的融合蛋白XLY-GST能够在大肠杆菌BL21(DE3)中高水平可溶表达。纯化的XLY-GST表现出与天然黄原胶裂解酶一致的酶学性质,其最适作用温度为40℃,最适p H为6.0,对碱性环境具有一定的耐受力(最高耐受p H10.5)。Ca2+和Mn2+对该裂解酶有显著地激活作用,而Cu2+则对该酶有一定的抑制作用。XLY-GST对黄原胶侧链的乙酰基和丙酮酸基团修饰程度表现出较高的特异性。本实验所取得的研究结果对黄原胶裂解酶的制备及黄原胶侧链修饰的研究奠定了基础。
- 杜元元郭小宇李鹤王亚芳杨帆李宪臻
- 关键词：酶学性质
- 蔗糖转化酶SUC2在商品化酿酒酵母中的高水平表面展示被引量：1
- 2020年
- 蔗糖转化酶SUC2是酿酒酵母水解菊糖的关键酶,但SUC2在酿酒酵母中的低水平表达限制了其理性改造酿酒酵母以获得高效生产菊糖基乙醇工程菌的进程。本实验通过克隆获得蔗糖转化酶SUC2的编码基因,并利用AGA1-AGA2锚定蛋白复合体将SUC2表面展示于商品化酿酒酵母菌株EBY100中。酶活力测定结果表明,表面展示有SUC2的重组菌EBY-S蔗糖酶活及菊糖酶活分别达到241.6和9.4 U/mL,较之前报道的过表达SUC2的酿酒酵母重组菌酶活力有显著提高。该结果表明,AGA1-AGA2锚定蛋白复合体能够成功地将SUC2表面展示于酿酒酵母细胞壁上。
- 孙大禹周海龙杜元元李宪臻杨帆
- 关键词：蔗糖转化酶酿酒酵母菊糖
