沈涛
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 简便快捷的小鼠胰岛分离纯化方法研究
- 2012年
- 目的探讨小鼠胰岛分离与纯化的方法.方法采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化胰岛.双硫腙特异性染色后计算胰岛产量及纯度.葡萄糖刺激后测定培养上清液胰岛素水平检测胰岛功能.结果 (1)每只小鼠采用上述分离、纯化法平均得到(114±15)个胰岛,平均纯度为(77.12±3.23)%,胰岛细胞存活率>90%;(2)分离、纯化的胰岛培养上清液中胰岛素水平在无糖、低糖(2.8 mmol/L)和高糖(22.2 mmol/L)刺激下分别为(23.80±3.52)mIU/L、(67.57±4.04)mIU/L和(164.32±10.75)mIU/L,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).两两比较,低糖组的胰岛素水平为无糖组的2.84倍(P<0.05),高糖组的胰岛素水平为低糖组的2.43倍(P<0.05),高糖组的胰岛素水平为无糖组的6.90倍(P<0.05).结论采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化的小鼠胰岛产量及纯度较高,形态完整,不同浓度葡萄糖刺激后胰岛素分泌反应良好,是一种简便、快捷的小鼠胰岛分离方法.
- 合湫苏恒李超沈涛严新民薛元明
- 关键词：多点注射分离纯化
