孔雪
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 细胞工厂培养甲型肝炎病毒L-A-1减毒株的增殖规律
- 2014年
- 目的探讨细胞工厂培养甲型肝炎病毒（Hepatitis A virus,HAV）L-A-1减毒株的增殖规律,寻找最佳增殖周期。方法采用10层细胞工厂培养人胚肺二倍体细胞（2BS株）,同时感染HAV L-A-1减毒株,分别于感染后的7、14、17、21、24和28d,收获含病毒的细胞,进行细胞计数,并检测抗原滴度和病毒滴度。选择病毒收获的一个最佳时间点,连续试验5批,检测HAV病毒滴度,并与培养28d结果进行比较。结果细胞感染HAV 14~21d,活细胞数量基本达平台期,随培养时间延长,细胞数量略有降低;随着培养时间的延长,抗原和病毒感染性滴度逐渐增高,培养17d时已达病毒增殖高峰,17~28d抗原和病毒滴度分别维持在1∶64~1∶128和7.00~7.50lgCCID50/ml。连续5批培养21d的病毒液病毒滴度的均值与培养28d相近,且差异无统计学意义。结论细胞工厂培养HAV L-A-1减毒株增殖高峰可缩短为21d左右。
- 徐艳玲李丽莉孔雪赵川纪元曹玉婷李娜王桂荣段雪峰刘令九
- 关键词：细胞工厂病毒增殖
- 一种甲型肝炎灭活疫苗灭活验证试验方法的建立被引量：2
- 2015年
- 目的探讨细胞培养/链特异性RT-PCR方法可否作为甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗(L-A-1减毒株)的病毒灭活验证试验方法。方法根据甲肝病毒(HAV)L-A-1株基因组序列,设计5条基因特异性引物,提取HAV基因组RNA,应用设计的正向引物进行反转录,再进行两轮PCR扩增,通过检测HAV复制过程中的负链中间体,对甲肝灭活疫苗灭活验证试验方法进行探讨,并与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验方法进行比较。结果细胞培养/链特异性RT-PCR方法对HAV负链RNA特异、敏感。通过方法学验证试验表明,该方法的特异性、敏感性和重复性均良好。利用此方法对5批甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)进行检测,结果全为阴性,与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验测定结果相同。结论细胞培养/链特异性RT-PCR方法快速、灵敏可靠,可作为检测甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)HAV灭活验证试验的方法。
- 刘令九徐晓霞王桂荣李娜孔雪段雪峰邵燕尚瑞琴于海龙夏青娟
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗
