赵集帅
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 供职机构：江西师范大学化学学院更多>>
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- 不同保存方法对羊膜生物学性能影响的比较研究被引量：9
- 2010年
- 目的观察不同保存方法对羊膜生物学性能的影响。方法取10例健康剖宫产产妇胎盘,剥离羊膜,将羊膜平铺于无菌滤纸片上,上皮面朝上,剪成20 mm×20 mm小块,随机分为3组,分别采用Hank’s平衡盐/甘油溶液深低温(-80℃)保存、纯甘油4℃保存、冷冻干燥常温保存。分别于保存3、6、12个月取羊膜进行HE染色光镜观察、胶原蛋白酶Ⅳ降解速度测定和细胞因子含量放射免疫测定,并与新鲜羊膜进行对照。结果①新鲜羊膜及3种方法保存的羊膜均可见到羊膜的5层组织结构,自内向外依次为上皮细胞层、基底膜、致密层、纤维母细胞层、海绵层。新鲜羊膜的上皮细胞形态完好、排列较整齐紧密,其下可见厚而连续的基底膜,致密层、纤维母细胞层、海绵层结构紧密。冷冻干燥常温保存3个月,羊膜组织形态特征与新鲜羊膜基本相似,上皮细胞结构完整、排列紧密,连续的基底膜、致密层、纤维母细胞层、海绵层清晰可见;保存6个月,上皮细胞形态基本完好、排列整齐,但基底膜略显模糊,纤维母细胞层、海绵层相对疏松;保存12个月,上皮细胞形态基本完好但核上移,基底膜模糊,纤维母细胞层、海绵层疏松变薄,其内出现空泡。Hank’s平衡盐/甘油溶液深低温保存3个月,羊膜上皮细胞形态基本完好,基底膜略显模糊,致密层、纤维母细胞层、海绵层相对疏松;保存6个月,上皮细胞结构基本完整,连续排列但细胞间隙较为模糊,基底膜更显模糊,致密层、纤维母细胞层、海绵层进一步疏松;保存12个月,上皮细胞皱缩,上皮层连续性中断,基底膜及致密层基本完整,但各层结构模糊不清。纯甘油4℃保存3个月,羊膜上皮细胞皱缩,细胞间隙加大,基底膜及致密层基本完整,各层结构依稀可见;保存6个月,部分上皮细胞破裂,基底膜完整,致密层、纤维母细胞层、海绵层疏松;保存12个月,羊膜上皮细胞部分�
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- 关键词：羊膜生物学性能
- 冷冻干燥对羊膜组织形态与生物活性因子的影响被引量：8
- 2010年
- 目的观察冷冻干燥保存方法对羊膜组织结构及生物活性因子的影响。方法取健康剖宫产产妇胎盘剥离羊膜,-40℃冻干保存,分别进行大体、光镜、扫描电镜、透射电镜观察和免疫组化分析,并与新鲜羊膜对比。结果新鲜及冻干保存的羊膜均可见5层基本组织结构,由内向外依次为上皮细胞层、基底膜、致密层、纤维母细胞和海绵层。新鲜羊膜光镜下见上皮细胞排列紧密,深面是厚而连续的基底膜;扫描电镜下,表面有突出的微绒毛,细胞间连接结构清晰;透射电镜下见上皮细胞核规则、胞质内部分线粒体空泡变性,细胞间见多桥粒连接,基底膜完整,基质中胶原微纤维结构清晰,见明暗相间的横纹。光镜下,冻干羊膜上皮细胞形态基本完好,细胞间隙加大;基底膜及致密层保持完整;纤维母细胞层、海绵层略微疏松。扫描电镜下,冻干羊膜表面略显干缩,无明显突出的微绒毛,上皮细胞完好,形态结构未发生改变。透射电镜观察,冻干羊膜表面可见微绒毛,上皮细胞完整,胞核呈灶性空化,胞浆内可见空泡,线粒体肿胀、嵴不可见;细胞间可见桥粒连接;基底膜基本正常,基质胶原纤维结构清晰。免疫组化分析,b-FGF、HGF主要分布于羊膜上皮层,ColⅣ、LN主要分布于羊膜基底膜;基质层也有b-FGF、ColⅣ、LN分布,纤维母细胞层也有HGF分布。冻干羊膜中HGF含量显著低于新鲜羊膜(P<0.05),b-FGF、ColⅣ、LN3种成分含量在新鲜和冻干羊膜中差异无显著性意义(P>0.05)。结论冷冻干燥对羊膜组织形态与生物活性因子无明显影响。
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- 关键词：羊膜冷冻干燥生物活性因子
- 体内植入羊膜的免疫安全性观察被引量：5
- 2010年
- 目的研究冻干羊膜动物体内移植后的免疫反应,以评价羊膜移植的免疫安全性。方法建立BALB/c小鼠皮下移植实验模型。按不同的移植物分为冻干羊膜组、新鲜羊膜组、绒毛膜组(阳性对照)和单纯手术组(阴性对照);各组再随机分为4个亚组,分别对应术后1、2、4、8周共4个时间点取样。大体观察小鼠的一般情况,流式细胞仪分析外周血CD3+CD25+和CD3+CD71+表达水平,免疫组化法定量监测组织切片中CD3+、CD4+、CD8+、MHCⅡ+表达水平。结果羊膜移植后早期,冻干羊膜组、新鲜羊膜组和阴性对照组小鼠外周血CD3+CD25+和CD3+CD71+表达水平略有增高(P>0.05),但短期内自行回落;绒毛膜组外周血CD3+CD25+和CD3+、CD71+表达水平明显高于其余各组(P<0.05)。阴性对照组、冻干羊膜组、新鲜羊膜组移植区组织CD3+、CD4+、CD8+、MHCⅡ+表达水平,在4个取样时间检测结果均无显著差异(P>0.05);但绒毛膜移植组CD3+、CD4+、CD8+、MHCⅡ+表达水平明显升高,并显著高于其他各组(P<0.05)。结论冻干羊膜和新鲜羊膜在体内移植后均表现出极低的免疫原性,不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,具有良好的组织相容性。
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- 关键词：免疫原性组织相容性
