胡艳华
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 胞外脂肪酶在枯草芽孢杆菌中的表达及其性质被引量：2
- 2009年
- 枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis是一种高产的外源基因表达菌株，外源蛋白能大量分泌到细胞外培养基中。从地衣芽孢杆菌ATCC14580基因组中克隆胞外脂肪酶全基因序列，并构建枯草芽孢杆菌表达载体pACC-pUB110，得到脂肪酶基因重组载体。该表达载体有一个强启动子，经淀粉诱导能高效表达外源蛋白，以枯草芽孢杆菌胞外蛋白酶缺失型菌株WB700和野生型菌株B．subtilis168为宿主菌，得到的脂肪酶以对硝基苯棕榈酸酯为底物，测得培养基上清总活力达到76．8μ／mL。该脂肪酶在pH10-10．5表现最大水解活力，最适反应温度为37℃，在强碱条件下稳定性很好。
- 胡艳华李敏石爱琴胡海红丁明赵辅昆
- 关键词：枯草芽孢杆菌
- 青霉素酰化酶(PGA)在枯草芽孢杆菌基因组上的整合表达被引量：3
- 2009年
- 将巨大芽孢杆菌的青霉素酰化酶(PGA)基因整合进枯草芽孢杆菌的基因组,筛选获得可以使PGA稳定表达的枯草芽孢杆菌菌株,克服了枯草芽孢杆菌中质粒表达不稳定的缺点。分别构建了含不同PGA基因拷贝数的3种枯草芽孢杆菌菌株,同时分析了这些菌株中PGA表达量的差异。37℃试管培养36 h菌株B.subtilis/xhoI-,aprE-,vpr--的酶活力为3 U/L,菌株B.subtilis/xhoI::pga为6 U/L,菌株B.subtilis/xhoI::pga,aprE::pga为14 U/L,菌株B.subtilis/xhoI::pga,aprE::pga,vpr::pga为23 U/L。结果表明,整合的拷贝数越多,PGA的表达量越高。
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- 关键词：枯草芽孢杆菌PGA
- 枯草芽孢杆菌整合载体的构建及基因组的改造被引量：4
- 2010年
- 构建了两种整合载体,分别为单交换整合载体pACC-BdbDC和双交换整合载体pDsbE,pDGC,转化野生型枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis168,目的基因整合到基因组上,同时引入氯霉素抗性基因。利用FLP/frt重组系统将氯霉素抗性基因敲除,便于宿主菌的进一步改造。PCR结果表明共重新构建了6种宿主菌。复杂双交换整合载体pDGC成功将3个目的基因整合到基因组上,为多个基因同时整合提供了一种方便可行的方法。
- 胡海红石爱琴胡艳华李敏丁明赵辅昆
- 关键词：枯草芽孢杆菌
