刘丽霞
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：南京农业大学食品科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- Surfactin 合成酶相关基因结构修饰研究
- 刘丽霞
- 关键词：克隆表达SFP
- 枯草芽胞杆菌fmbj SrfAC-A结构域的活性测定
- 2013年
- 【目的】在体外研究surfactin合成酶的A结构域,为获得新的surfactin类似物奠定基础。【方法】本文从枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)fmbj中克隆出surfactin合成酶第7个模块的A结构域基因(SrfAC-A),与表达质粒pET-23a相连后在大肠杆菌表达系统中表达,用Ni-NTA亲和柱对重组蛋白SrfAC-A进行分离纯化后测定其活性。【结果】克隆所得的A结构域对Ile有选择活性,而对其他氨基酸基本无活性。【结论】Surfactin合成酶中的A结构域能在体外独立行使其选择底物氨基酸的功能。
- 刘丽霞陆兆新吕凤霞张充别小妹
- 关键词：克隆表达活性测定
- Bacillus subtilis 168菌株产surfactin改造被引量：8
- 2014年
- 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株基因组中含有编码surfactin合成酶系的srfA操纵子,却不产抗菌肽surfactin。运用同源重组的方法将外源的有活性的sfp基因(编码4'-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶)整合入B.subtilis 168中,将其改造为产surfactin的菌株。通过分析多株枯草芽孢杆菌和解淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的sfp基因,从基因的上、下游找出较为保守的区域,设计引物,从枯草芽孢杆菌Nja-9中扩增sfp基因,将获得的sfp基因与P43启动子和终止子相连,构建了sfp基因表达框,并连接于枯草整合质粒pDG1730上,最终构建了枯草芽孢杆菌整合质粒pST-1730,利用pST-1730本身的淀粉酶E基因与B.subtilis 168菌株的基因组DNA进行同源重组整合,获得了产surfactin的重组菌株B.subtilis121。本研究为surfactin合成酶基因的改造和分析奠定了基础。
- 刘丽霞高玲别小妹陆兆新张充吕凤霞
- 关键词：同源重组BACILLUSSUBTILISSURFACTIN
- Surfactin合成酶相关基因研究
- 芽孢杆菌属中的一些成员能产生大量的生物活性分子,可以抑制病原菌的生长。枯草芽孢杆菌,作为普遍使用和充分研究的生物之一,其基因组中有4-5%用于合成抗菌物质,可以产生二十多种结构不同的抗菌化合物。其中,环状脂肽surfac...
- 刘丽霞
- 关键词：克隆表达SFP
- 文献传递
