徐杰 作品数:7 被引量:9 H指数:2 供职机构: 河南科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技厅国际合作项目 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
基于SCARA机器人的螺钉锁付控制系统及轨迹规划研究 随着消费电子行业的不断发展,螺钉锁付工艺作为消费电子产品装配过程中重要的一环,愈发受到重视。消费电子产品逐渐趋于小型化、便捷化,其所使用的螺钉越来越小,且多为小长径比螺钉。而传统人工锁付方式劳动强度大、生产效率低,针对该... 徐杰关键词:SCARA机器人 控制系统 旋量理论 螺纹联接 芍药肌动蛋白基因组DNA的克隆及分析 被引量:2 2014年 目的克隆芍药Paeonia lactiflora肌动蛋白(Actin)基因组DNA序列并解析基因结构,分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况。方法根据本课题组报道的芍药Actin基因cDNA序列(JX310002)设计特异性引物,以芍药栽培品种"桃花飞雪"总DNA为模板,用KOD-Plus高保真DNA聚合酶扩增芍药Actin基因组基因,克隆PCR产物并进行测序。应用生物信息学软件预测芍药Actin基因的外显子及内含子,基于Blastn程序分析芍药Actin基因在核苷酸水平上的同源性,应用MEGA5.0软件构建分子系统进化树;设计跨越内含子的半定量RT-PCR扩增引物,分析芍药Actin基因在芍药根、茎、叶、花中的表达情况。结果测序结果表明芍药Actin基因组DNA序列全长1 405 bp,含4个外显子和3个内含子,3个内含子中共6个剪接位点均遵循高等真核生物5’端供位GU与3’端受位AG模式;共编码377个氨基酸,GenBank登录号为KF363830。设计了一对半定量RT-PCR扩增引物,其中上游引物跨越了芍药Actin基因的第1个内含子,可有效防止由DNA污染而造成RT-PCR扩增的假阳性;半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因在芍药根、茎、叶、花等不同组织中的表达量保持恒定。结论首次克隆了芍药Actin基因组DNA序列并明确了其基因结构,半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因可以作为芍药功能基因表达分析的内标基因。 范丙友 张文婷 徐杰 骞光耀 高水平 郭丽丽 侯小改关键词:芍药 肌动蛋白 基因组DNA 克隆 基因结构 芍药乙烯受体PlETR1基因过表达载体的构建及烟草转化 被引量:1 2020年 芍药是乙烯敏感型花卉,乙烯受体感知并传导乙烯信号,在乙烯信号转导途径中发挥重要作用。芍药PlETR1基因cDNA全长序列已分离,为了鉴定芍药PlETR1基因的功能,本研究基于PlETR1基因和表达载体序列,应用Primer Premier 5.0软件设计了一对特异性PCR引物,采用RT-PCR技术扩增出了PlETR1编码区片段,进一步构建了芍药PlETR1基因过表达载体。基于优化的模式植物烟草的组培体系和筛选出的潮霉素抗性浓度,应用农杆菌介导的叶盘法开展了芍药PlETR1基因转化烟草的研究,对转基因抗性烟草植株进行了PCR检测,结果表明HPT基因和芍药PlETR1基因已导入到烟草基因组中,且芍药PlETR1基因转录表达成功,为下一步鉴定芍药PlETR1基因的功能提供科学依据。 高水平 徐杰 张文婷 张文婷 李芳 史国安 李芳关键词:芍药 烟草 芍药FPPS基因的克隆及生物信息学分析 被引量:4 2016年 目的克隆芍药萜类物质生物合成关键酶法呢基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPPS)c DNA全长序列并对其进行生物信息学分析。方法根据芍药转录组测序数据,设计一对特异性PCR引物,应用RT-PCR技术扩增出芍药FPPS基因目标条带并克隆至p MD18-T载体上,菌落PCR和质粒PCR鉴定出阳性重组子后进行序列测定及序列同源性搜索、分子系统进化树构建、结构域搜索及3D结构预测等生物信息学分析。结果测序结果表明芍药FPPS基因全长1 315bp,含60 bp的5’-UTR、1 050 bp的CDS和205 bp的3’-UTR,共编码349个氨基酸,Gen Bank登录号为KP708571;Blastn和Blastp分析结果显示芍药FPPS(KP708571)及其编码的蛋白(AKJ26301)在核苷酸水平和氨基酸水平上与多种植物的FPPS基因和FPPS蛋白具同源性;分子进化树分析结果表明芍药FPPS蛋白与其他物种FPPS蛋白的亲缘关系相对较远;预测芍药FPPS蛋白相对分子质量为40 200,等电点为5.33,是一个定位于胞液、不含跨膜结构域、不含信号肽分子的亲水性、稳定蛋白;发现芍药FPPS含有底物结合位点、底物-Mg2+结合位点、催化位点、富含天冬氨酸位点1及富含天冬氨酸位点2共7个保守结构域;3D结构中α-螺旋所占比例高且α-螺旋之间由β-转角(loop)相连接;中央腔(central cavity)由大约10个核心α-螺旋排列而成。结论首次从芍药中克隆了FPPS基因并对其进行了初步的生物信息学分析。 徐杰 高水平 史国安 范丙友关键词:芍药 基因克隆 生物信息学分析 芍药泛素和乙烯受体基因的克隆、分析及PlETR1烟草转化 芍药(Paeonia lactifloraPall.)为芍药科芍药属花卉,是我国传统名花。但是,芍药与其它鲜切花一样,会随着花朵的开放迅速衰老。乙烯,作为一种植物激素,在植物生长和发育过程中起着重要作用,并调控花衰老。花... 徐杰关键词:芍药 泛素基因 乙烯受体基因 文献传递 数控搅拌器 本实用新型涉及一种数控搅拌器,包括加热台和设置在加热台上的调节架,所述的加热台上设有加热盘,所述的搅拌器还包括控制面板、电机、连接杆和搅拌棒,控制面板和电机设置在调节架上,且控制面板分别与电机和加热台电连接,所述的控制面... 郭倩 史国安 施江 崔奇新 尹喜梅 张晓伟 徐杰文献传递 芍药Actin基因在大肠杆菌中的高效表达 被引量:2 2015年 目的构建芍药Paeonia lactiflora Actin(Pl Actin)基因原核表达载体,优化Pl Actin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。方法基于Pl Actin基因c DNA序列及原核表达载体p ET-32a(+)多克隆位点序列,设计一对5’末端分别插入Bam H I和Hind III酶切位点的特异性PCR引物,基于RT-PCR技术亚克隆Pl Actin基因;用Bam H I和Hind III双酶切重组质粒p MD18-T-Pl Actin和原核表达载体p ET-32a(+),胶回收纯化目的基因和空载体,连接、转化后应用菌落PCR、质粒PCR和双酶切鉴定出重组子p ET-32a(+)-Pl Actin,转化BL21(DE3)菌株获得基因表达工程菌;分别设置诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度梯度、诱导的菌体起始密度梯度及表达时间梯度,诱导Pl Actin基因在大肠杆菌中表达,SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝R250染色后制备干胶并比较重组Actin蛋白的表达量。结果亚克隆测序结果表明Pl Actin与目的序列完全一致,且其编码区序列(CDS)上下游成功插入了Bam H I和Hind III酶切位点;成功构建了芍药原核表达载体p ET-32a(+)-Pl Actin;诱导剂IPTG的最佳浓度为0.1 mmol/L,诱导的菌体起始密度(A600)为0.4~0.6,最佳表达时间为4 h。结论构建了Pl Actin基因原核表达载体p ET-32a(+)-Pl Actin,建立了Pl Actin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。 徐杰 高水平 张文婷 史国安 范丙友关键词:芍药 ACTIN 大肠杆菌 SDS-PAGE电泳