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张文婷

作品数：6 被引量：15H指数：2
供职机构：河南科技大学农学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金河南省科技厅国际合作项目河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文
  • 1篇会议论文

领域

  • 4篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇自动化与计算...
  • 1篇农业科学

主题

  • 6篇芍药
  • 5篇基因
  • 3篇蛋白
  • 3篇动蛋白
  • 3篇克隆
  • 3篇肌动蛋白
  • 2篇基因克隆
  • 2篇杆菌
  • 2篇大肠杆菌
  • 1篇电泳
  • 1篇烟草
  • 1篇烟草转化
  • 1篇乙烯受体
  • 1篇原核表达
  • 1篇基因过表达
  • 1篇基因结构
  • 1篇基因组
  • 1篇基因组DNA
  • 1篇过表达
  • 1篇RT-PCR

机构

  • 6篇河南科技大学
  • 1篇北京林业大学
  • 1篇洛阳农林科学...

作者

  • 6篇张文婷
  • 5篇范丙友
  • 4篇高水平
  • 4篇史国安
  • 3篇李芳
  • 3篇徐杰
  • 1篇郭丽丽
  • 1篇侯小改

传媒

  • 3篇中草药
  • 1篇基因组学与应...

年份

  • 1篇2020
  • 1篇2015
  • 2篇2014
  • 2篇2013
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
芍药ACO和ACS基因在大肠杆菌中的高效表达
芍药是中国的传统名花，适宜做切花应用。由于芍药花期短且集中，影响了它的应用价值。乙烯在切花衰老进程中起着重要作用。ACO和ACS是乙烯生物合成中两个关键酶。为了更深入地研究芍药 ACO和 ACS的酶学性质以及 ACO和 ...
张文婷
关键词：芍药大肠杆菌原核表达
文献传递
芍药肌动蛋白基因的克隆及表达分析被引量：11
2013年
目的克隆芍药肌动蛋白(Actin)基因并应用RT-PCR技术分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况。方法根据近缘物种Actin基因的保守序列设计一对PCR扩增引物,以"桃花飞雪"芍药根部总RNA反转录而成的cDNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出芍药Actin cDNA全长并克隆至pMD18-T载体上,阳性克隆经菌落PCR、质粒PCR及酶切鉴定后进行测序。基于测序结果设计特异性PCR引物,应用RT-PCR技术分析Actin基因在芍药根、茎、花、叶不同组织中的表达情况。结果测序结果表明芍药Actin基因全长1 134 bp序列,共编码377个氨基酸,GenBank登录号为JX310002;序列分析表明芍药Actin蛋白中存在3种肌动蛋白特征信号序列,与其他植物肌动蛋白氨基酸同源性达99%;基于同源模建预测的3D结构中含有4个结构域;生物信息学软件预测芍药肌动蛋白的相对分子质量为4.17×104,等电点(pI)为5.31,是一个定位于胞液、不含跨膜域、不含信号肽分子的亲水性、稳定蛋白;半定量RT-PCR技术分析表明Actin基因在芍药根、茎、叶、花组织中的表达量保持恒定。结论首次从芍药中克隆了Actin基因,半定量RT-PCR表达分析结果表明Actin基因适合作为芍药功能基因表达分析的内标基因,为有效利用该基因奠定了基础。
范丙友李芳张文婷史国安
关键词：芍药肌动蛋白基因克隆RT-PCR
芍药肌动蛋白基因组DNA的克隆及分析被引量：2
2014年
目的克隆芍药Paeonia lactiflora肌动蛋白(Actin)基因组DNA序列并解析基因结构,分析Actin基因在芍药不同组织中的表达情况。方法根据本课题组报道的芍药Actin基因cDNA序列(JX310002)设计特异性引物,以芍药栽培品种"桃花飞雪"总DNA为模板,用KOD-Plus高保真DNA聚合酶扩增芍药Actin基因组基因,克隆PCR产物并进行测序。应用生物信息学软件预测芍药Actin基因的外显子及内含子,基于Blastn程序分析芍药Actin基因在核苷酸水平上的同源性,应用MEGA5.0软件构建分子系统进化树;设计跨越内含子的半定量RT-PCR扩增引物,分析芍药Actin基因在芍药根、茎、叶、花中的表达情况。结果测序结果表明芍药Actin基因组DNA序列全长1 405 bp,含4个外显子和3个内含子,3个内含子中共6个剪接位点均遵循高等真核生物5’端供位GU与3’端受位AG模式;共编码377个氨基酸,GenBank登录号为KF363830。设计了一对半定量RT-PCR扩增引物,其中上游引物跨越了芍药Actin基因的第1个内含子,可有效防止由DNA污染而造成RT-PCR扩增的假阳性;半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因在芍药根、茎、叶、花等不同组织中的表达量保持恒定。结论首次克隆了芍药Actin基因组DNA序列并明确了其基因结构,半定量RT-PCR分析结果表明Actin基因可以作为芍药功能基因表达分析的内标基因。
范丙友张文婷徐杰骞光耀高水平郭丽丽侯小改
关键词：芍药肌动蛋白基因组DNA克隆基因结构
芍药乙烯受体PlETR1基因过表达载体的构建及烟草转化被引量：1
2020年
芍药是乙烯敏感型花卉,乙烯受体感知并传导乙烯信号,在乙烯信号转导途径中发挥重要作用。芍药PlETR1基因cDNA全长序列已分离,为了鉴定芍药PlETR1基因的功能,本研究基于PlETR1基因和表达载体序列,应用Primer Premier 5.0软件设计了一对特异性PCR引物,采用RT-PCR技术扩增出了PlETR1编码区片段,进一步构建了芍药PlETR1基因过表达载体。基于优化的模式植物烟草的组培体系和筛选出的潮霉素抗性浓度,应用农杆菌介导的叶盘法开展了芍药PlETR1基因转化烟草的研究,对转基因抗性烟草植株进行了PCR检测,结果表明HPT基因和芍药PlETR1基因已导入到烟草基因组中,且芍药PlETR1基因转录表达成功,为下一步鉴定芍药PlETR1基因的功能提供科学依据。
高水平徐杰张文婷张文婷李芳史国安李芳
关键词：芍药烟草
芍药Actin基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
2015年
目的构建芍药Paeonia lactiflora Actin（Pl Actin）基因原核表达载体,优化Pl Actin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。方法基于Pl Actin基因c DNA序列及原核表达载体p ET-32a（＋）多克隆位点序列,设计一对5’末端分别插入Bam H I和Hind III酶切位点的特异性PCR引物,基于RT-PCR技术亚克隆Pl Actin基因;用Bam H I和Hind III双酶切重组质粒p MD18-T-Pl Actin和原核表达载体p ET-32a（＋）,胶回收纯化目的基因和空载体,连接、转化后应用菌落PCR、质粒PCR和双酶切鉴定出重组子p ET-32a（＋）-Pl Actin,转化BL21（DE3）菌株获得基因表达工程菌;分别设置诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度梯度、诱导的菌体起始密度梯度及表达时间梯度,诱导Pl Actin基因在大肠杆菌中表达,SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝R250染色后制备干胶并比较重组Actin蛋白的表达量。结果亚克隆测序结果表明Pl Actin与目的序列完全一致,且其编码区序列（CDS）上下游成功插入了Bam H I和Hind III酶切位点;成功构建了芍药原核表达载体p ET-32a（＋）-Pl Actin;诱导剂IPTG的最佳浓度为0.1 mmol/L,诱导的菌体起始密度（A600）为0.4~0.6,最佳表达时间为4 h。结论构建了Pl Actin基因原核表达载体p ET-32a（＋）-Pl Actin,建立了Pl Actin基因在大肠杆菌中的高效表达体系。
徐杰高水平张文婷史国安范丙友
关键词：芍药ACTIN大肠杆菌SDS-PAGE电泳
芍药肌动蛋白基因的克隆及表达分析
肌动蛋白基因表达量大且基本恒定,因此常作为功能基因转录表达分析的内标基因.根据GenBank报道的芍药近缘物种Actin基因cDNA序列设计PCR扩增引物,用改良的CTAB-LiCl法提取'桃花飞雪'芍药...
李芳范丙友高水平张文婷史国安
关键词：芍药肌动蛋白基因克隆
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