蒋颖
- 作品数：21 被引量：103H指数：6
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 布鲁氏菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
- 用BCSP31作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了布鲁氏菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法,对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,...
- 丁家波张存帅程君生彭小兵蒋颖张尔利蒋玉文毛开荣
- 关键词：布鲁氏菌多重PCR
- 文献传递
- 布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用被引量：14
- 2009年
- 用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。
- 丁家波张存帅彭小兵蒋颖程君生张尔利蒋玉文毛开荣
- 关键词：布鲁菌多重PCR
- 禽源多杀性巴氏杆菌多位点序列分型研究被引量：6
- 2017年
- 为了解国内禽源多杀性巴氏杆菌流行情况,对分离自18省份的84株多杀性巴氏杆菌采用荚膜多重PCR分型和多位点序列分型对其血清型和基因型进行鉴定。结果表明:禽源多杀性巴氏杆菌主要以血清A型为主,占96.4%(81/84);多位点序列分型可将禽源多杀性巴氏杆菌分为5种ST型,其中ST129为主要流行型,占94.0%(79/84)。本研究为我国禽源多杀性巴氏杆菌的流行病学监测和基因多样性提供了数据支持。
- 李伟杰田野岂晓鑫蒋颖魏财文蒋桃珍
- 关键词：多杀性巴氏杆菌多位点序列分型
- Ⅴ型分泌系统菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素及其受体结合位点的确定被引量：6
- 2007年
- 自主转运蛋白(V型分泌系统)的β结构域已被证明可以将异源性多肽展示在细菌表面。运用DNA重组技术优化构建V型分泌系统MisL并在菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1。含重组质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1大肠杆菌(E.coli)DH5α经厌氧诱导后,分别与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子血清和F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪的小肠上皮细胞做玻板凝集试验和体外黏附试验,结果表明上述两株诱导表达重组菌与FedF抗血清发生明显的凝集反应,且能较好地黏附于F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪小肠上皮细胞。而菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF突变体FedF(M)(黏附素受体结合域第88和89位组氨酸残基双突变为丙氨酸)的重组菌则失去上述凝集和黏附特性。以上试验结果说明,F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,并进一步证明了位于FedF受体结合域内第88和89位组氨酸残基对FedF受体结合域的形成至关重要。
- 原志伟蒋颖王建业朱国强
- 基因2型牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立和初步应用被引量：15
- 2008年
- 根据已发表的牛病毒性腹泻病毒基因1型(BVDV-1)和2型(BVDV-2)5'非编码区(5'-UTR)的序列,分别设计了针对BVDV-1型、BVDV-2型以及针对BVDV-1和BVDV-2两型的特异性引物和通用引物,以标准参考株BVDV-1NADL株和BVDV-2890株为对照,建立了分别能检测BVDV-1、BVDV-2和BVDV-1/BVDV-2的RT-PCR检测方法。在此基础上,进一步对疑似BVDV-2感染牛的临床病料组织(脾、淋巴结、心肌、血液等)检测结果表明,在所检测的18份样品中,BVDV-2阳性8份(44%)。经RT-PCR鉴定为阳性的组织病料,进一步通过MDBK细胞进行病毒分离,病毒分离率为100%;结合感染细胞病变观察,间接免疫荧光试验RT-PCR和序列测定鉴定,所分离的病毒均为BVDV-2。上述研究表明,该RT-PCR检测方法敏感、特异;并证实我国牛群已存在BVDV-2的污染或感染。
- 任敏焦海宏蒋颖刘振华王传彬朱国强
- 肉毒中毒症实验室诊断的研究进展被引量：3
- 2009年
- 肉毒中毒症是一种潜在的致死性瘫痪疾病,快速准确的诊断对该病的治疗显得尤为必要。本文综述了肉毒中毒症毒素检测、细菌培养、分子检测、遗传鉴定等实验室诊断的进展情况,以期对本病的快速诊断有所启示。
- 彭小兵蒋玉文蒋颖牟巍
- 关键词：毒素检测
- 布鲁氏菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
- 用BCSP31作为布鲁氏菌属特异性基因，以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志，建立了布鲁氏菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法，对11株(牛种A19，A544，A387;羊种M111，...
- 丁家波程君生彭小兵蒋颖张存帅蒋玉文毛开荣
- 关键词：布鲁氏菌流行病学
- 文献传递
- 肠炎沙门菌间接ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 本试验建立和优化了重组蛋白rSEFA介导的间接ELISA方法以特异性检测肠炎沙门菌感染血清。确定其抗原最佳包被量为7.5μg/mL,血清最适稀释度1∶100,作用时间为60 min;酶标二抗最适稀释度为1∶4 000,作用时间为60 min;判定标准为OD值≥0.346。基于rSEFA介导的间接ELISA有较好的特异性,能特异性识别肠炎沙门菌和都柏林沙门菌感染血清,不能识别相近的鸡白痢沙门菌感染血清,此方法与菌体凝集反应同时检测临床血清样品100份,二者阳性率分别为67%和54%,结果符合率为80.6%。这一方法的建立对肠炎沙门菌特异性抗体检测有潜在的应用前景。
- 康孟佼朱春红蒋颖姚丰华吴娟段小丽朱国强
- 关键词：肠炎沙门菌间接ELISA
- 补体结合酶联免疫吸附试验方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为改进免疫学诊断技术的准确性,研究了一种基于补体结合的免疫学检测新技术———补体结合酶联免疫吸附试验(CF-ELISA)。CF-ELISA技术采用酶标记抗菊糖纯化豚鼠补体C3抗体及其酶显色系统作为补体参与反应的指示系统,用ELISA方法进行补体结合试验。经对布氏菌病抗体检测的初步试验结果显示,CF-ELISA技术可检测到0.01 IU的布氏菌病抗体,灵敏度与间接酶联免疫吸附试验(iELISA)相当,是虎红平板凝集试验(RBPT)试管凝集试验(SAT)的5 000倍、补体结合试验(CFT)的10 000倍。对349份确诊布氏菌病感染群牛、羊血清的检测结果显示,CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性率分别为35.82%3、6.39%、31.81%、30.09%、36.1%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性符合率分别为:98.4%、88.8%、80.0%、90.6%。CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT对490份布氏菌病阴性群牛、羊血清的阴性率分别为100%、99.6%、100%、99.4%、99.8%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阴性符合率分别为:99.6%1、00%、99.4%、99.8%。研究表明,CF-ELISA是具有高特异性和高敏感性的布氏菌病免疫学检测技术。
- 毛开荣王楠李文平蒋颖程君生刘轶秋蒋玉文丁家波
- 关键词：布氏菌病敏感性特异性
- 不同动物源生产用多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因序列分析被引量：1
- 2017年
- 为了解国内不同动物源生产用多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因的变异情况,采用PCR方法对16株不同动物源生产用多杀性巴氏杆菌的ompH基因进行扩增测序和分析。结果显示:16株菌株的ompH基因开放阅读框在1002~1056 bp之间;信号肽为N端20个氨基酸残基,成熟蛋白氨基酸残基数量在313~331 aa之间,氨基酸同源性为82.1%~100%;基于Omp H氨基酸序列的系统发育树中鸡源菌株(荚膜A型)、猪源和牛源菌株(荚膜B型)分别在不同的分支。序列分析结果表明,ompH基因序列差异与荚膜型之间存在相关性,而与毒力大小无相关性。
- 李伟杰魏财文岂晓鑫田野蒋颖蒋桃珍
- 关键词：多杀性巴氏杆菌
