彭小兵
- 作品数：64 被引量：175H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：科技基础性工作专项公益性行业(农业)科研专项引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 肉毒中毒症实验室诊断的研究进展被引量：3
- 2009年
- 肉毒中毒症是一种潜在的致死性瘫痪疾病,快速准确的诊断对该病的治疗显得尤为必要。本文综述了肉毒中毒症毒素检测、细菌培养、分子检测、遗传鉴定等实验室诊断的进展情况,以期对本病的快速诊断有所启示。
- 彭小兵蒋玉文蒋颖牟巍
- 关键词：毒素检测
- 产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价被引量：4
- 2018年
- 为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。
- 杜吉革彭小兵张秀坤朱真薛麒王磊李启红印春生姚文生康凯蒋玉文陈小云
- 关键词：突变毒力抗原性
- 重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果被引量：1
- 2019年
- 为了研究重组腐败梭菌α毒素的生物活性及其灭活疫苗的免疫效果,采用PCR法扩增腐败梭菌α毒素基因,构建重组表达质粒pET28α-csa,转化E.coli BL21(DE3);对表达产物的细胞毒性、小鼠致死毒力和抗毒素中和试验等生物活性进行鉴定,并将其制成灭活疫苗免疫家兔和靶动物绵羊,通过攻毒素试验和血清中和试验与类毒素疫苗进行比较。结果显示,重组α毒素能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,具有细胞毒性,小鼠致死毒力超过300 MLD/mL,其毒性可以被腐败梭菌抗毒素中和。制成灭活疫苗免疫家兔,随着免疫剂量的增加血清中和效价随之提高,0.25 mL/只(含重组α毒素0.11 mg)免疫即可使家兔获得100%保护,免疫效果优于类毒素疫苗;0.50 mL/只(含重组α毒素0.22 mg)免疫绵羊攻毒保护率为75%。结果表明,重组腐败梭菌α毒素具有很好的生物活性,所制成的灭活疫苗可以作为预防羊快疫的候选疫苗。
- 彭国瑞蒋玉文彭小兵王秀丽李旭妮王猛
- 关键词：腐败梭菌Α毒素生物活性羊快疫
- 一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基
- 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成：示蛋白胨(proteose peptone)1.5‑2.0g，酪蛋白胨1.5‑2.0g，酵母浸粉0.5‑0.75g，ZnSO<S...
- 蒋玉文彭小兵李旭妮彭国瑞
- 布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展被引量：42
- 2011年
- 对布鲁氏菌病的病原学和血清学诊断技术的研究进展进行了综述,包括灵敏特异的ELISA、FPA、PCR、核酸探针技术、胶体金标记技术及新型可视化LAMP等,以期为布鲁氏菌病的研究提供参考。
- 王秀丽蒋玉文毛开荣丁家波王秋菊何宇彭小兵
- 关键词：布鲁氏菌病病原学血清学
- 表达O型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法
- 本发明涉及表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过在布鲁氏菌S2株菌基因组中稳定地整合进O型FMDV缅甸株(Mya)的VP1基因，并同时破坏了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构...
- 丁家波支海兵彭小兵王楠李旭妮戴志红
- 文献传递
- 布鲁氏菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
- 用BCSP31作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了布鲁氏菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法,对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,...
- 丁家波张存帅程君生彭小兵蒋颖张尔利蒋玉文毛开荣
- 关键词：布鲁氏菌多重PCR
- 文献传递
- 布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用被引量：14
- 2009年
- 用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。
- 丁家波张存帅彭小兵蒋颖程君生张尔利蒋玉文毛开荣
- 关键词：布鲁菌多重PCR
- 多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株被引量：17
- 2010年
- 用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。
- 彭小兵程君生夏业才毛开荣蒋玉文丁家波
- 关键词：布鲁氏菌多重PCR
- 一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用。所述类毒素制备方法如下：将A型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中发酵培养，得到发酵产物，然后将发酵产物在L‑赖氨酸、甲醛水溶液和pH6.8下灭活脱毒，灭活脱毒...
- 彭小兵彭国瑞李旭妮蒋玉文
- 文献传递
